香花槐生物學特性及其芽分化影響因素研究

王穎，高寶剛

（黑龍江省林業監測規劃院，黑龍江 哈爾濱 150080）

香花槐（Robiniapseudoacaciacv.idaho），又名富貴樹，原產地為西班牙，屬于蝶形花科，落葉喬木，整株高10～12m，樹干為褐色至灰褐色。葉互生，羽狀復葉，葉片美觀對稱，深綠色有光澤，青翠碧綠。總狀花序，花被紅色，有濃郁的芳香氣味，可以同時盛開小紅花200～500朵，異常壯觀美麗。香花槐枝繁葉茂，樹冠開闊，樹干筆直，樹景壯觀，樹的形狀自然開張，樹的狀態蒼勁挺拔，極其具有觀賞價值。又是營造速生豐產林的優良樹種。

香花槐喜光、抗低溫，耐鹽堿，耐干旱瘠薄，還能吸附噪聲，抗病能力較強，為此病蟲害較少，根系發達，萌芽、根蘗性較強，保持水土能力極強。枝繁葉大，葉柄凸出不易脫落，根系比較發達，主側根健壯，萌蘗比較快，可有效地防風和保持水土[1]。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

繁殖材料選取3年生香花槐，并且健壯無病蟲害的植株，分別截取樹干上、中、下部位的當年生枝條，并分別不同時期采集。

1.2 試驗方法

香花槐接種方法：先將超凈臺消毒后，將試驗材料置于超凈臺上，用消毒試劑對試材進行消毒，并用無菌水沖洗數次，之后將試材表面水分吸干后接種到不同啟動培養基中，每瓶裝30～40mL培養基，每瓶接種一個外植體，培養15～20d后調查并統計外植體在不同培養基上的生長狀況。

1.3 培養條件

培養溫度24±2℃，光周期為14h／8h（光照／黑暗），日光燈光源，光強度為1 500～2 000lx。夜間溫度不低于15℃[2，3]。

2 結果與分析

2.1 外植體采集時期的選擇

香花槐每年11月中下旬開始落葉，進入休眠狀態，休眠持續到第2年的3月末，在這一時間里采集同株相近位置不同休眠時期的枝條作為試驗材料。將采集的試材在室內水培養進行催芽，使其逐漸解除休眠。待枝條上的芽萌動露出芽頂后，取已經萌動的芽作為外植體，比較不同休眠時期的冬芽作外植體時的萌動情況，并且調查其生長情況。試驗從2010年12月18日起至2011年3月25日止，采集不同時期的休眠枝條，取芽作外植體接種于啟動培養基上，其結果詳見表1。

表1 不同休眠時期冬芽萌動情況

表1結果表明，2011年3月25日采集即將萌動的冬芽作外植體，其啟動培養所需平均天數為12 d，芽萌動率為87.4%，效果較好；而2010年12月18日、2011年2月5日所取休眠枝上解除休眠的冬芽作為外植體，所需啟動培養天數分別為32和24 d，芽萌動率為60.3%和68.5%，明顯低于3月末采集的冬芽。因此，選用冬芽作外植體時，應選取春季即將萌動時的冬芽，它們的啟動培養所需時間比較短，并且萌芽率比較高。

2.2 基本培養基篩選

基本培養基的選擇是組織培養的重要環節，是試驗成功與否的關鍵步驟。本試驗采用單因子完全隨機分組設計，選用MS、WPM、1／2MS、M四種基本培養基，附加6－BA0.5mgL－1，作培養基對比試驗，以求篩選出芽增殖生長的最佳培養基。其他條件為2%蔗糖，6g·L－1瓊脂粉，pH為6.2。

表2 基本培養基篩選

接種20d后調查結果。由表2可以看出，以MS為基本培養基，植株生長勢良好，生長健壯，腋芽生長狀況良好，但是叢生芽分化少，并且有部分苗木死亡現象；而以WPM為基本培養基，植株生長勢較弱，腋芽生長不良，但是叢生芽生長好，分化多。M培養基為基本培養基，植株生長健壯，叢生芽生長良好，芽分化多。因此，從本試驗的結果得出M是最佳基本培養基。

2.3 細胞分裂素濃度與種類配比試驗

在上述試驗中已經確定M為香花槐最佳基本培養基，因此在激素配比實驗中，以M培養基為基本培養基，同時添加不同濃度、不同種類的細胞分裂素。細胞分裂素種類分別為ZT、KT、6－BA，濃度分別為0.1、0.5、1.0、2.0、3.0和4.0mgL－1。

表3 激素種類、濃度篩選

由表3得知，細胞分裂素以6－BA為最佳。當6－BA的濃度為0.5m·L－1時，植株增殖系數最大，達到2.42，其增殖分化苗生長健壯，叢生芽增殖生長快。但當6－BA的濃度為2.0mgL－1時少數植株的葉片出現枯黃現象，并且增殖緩慢，且隨著6－BA濃度的升高，植株枯黃的現象更加嚴重，甚至出現死亡現象，增殖系數小于1.0。因此，適合香花槐增殖分化的細胞分裂素為6－BA，濃度為0.5mg·L－1[4，5]。

2.4 細胞分裂素與生長素配比試驗

以M培養基附加6－BA0.5mgL－1為基本培養基，分別加入0.05、0.1、0.2mgL－1的IBA或NAA，結果見表4。

表4 激素組合對芽增殖的影響

由表4顯示的增殖系數和增殖率可以看出，IBA對香花槐的增殖效果比NAA效果好。當IBA濃度為0.05mgL－1時，增殖率達73.5%，增殖系數為2.32，增殖效果最好。雖然當IBA濃度為0.20 mgL－1時的增殖系數、增殖率和IBA濃度為0.05 mgL－1時差異不大，但其增殖分化的苗生長較弱，出現葉片枯黃現象。因此，香花槐增殖培養的最佳組合為6－BA0.5mgL－1＋IBA0.05mgL－1＋2%蔗糖[6]。

3 結論

3.1 選用冬芽作外植體時，應選取春季即將萌動時的冬芽，它們的啟動培養所需要的時間較短，并且萌芽率較高。

3.2 當滅菌時間達到8min時，外植體所帶微生物絕大多數已被殺死。并且滅菌時間達到8min時，褐化率達到最小，成活率在滅菌8min時達到最高值52.4%。

3.3 M培養基為基本培養基，植株生長健壯，叢生芽生長良好，芽分化多。因此，從本試驗的結果得出M是最佳基本培養基。適合香花槐增殖分化的細胞分裂素為6－BA，濃度為0.5mgL－1。香花槐增殖培養的最佳組合為6－BA0.5mgL－1＋IBA0.05mgL－1＋2%蔗糖。

[1]林慶昌.植物細胞組織培養匯[M].北京：中國農業大學出版社，2005

[2]曹孜義.實用組織培養技術教程[M].蘭州：甘肅科學技術出版社，2001

[3]程家勝.植物組織培養與工廠化育苗技術[M].北京：金盾出版社，2003

[4]師素恩（譯）.唐菖蒲體細胞胚發生和植株再生 [J].北方園藝，1997（3）：59－60

[5]周麗儂，鄺哲師、陳俊秋，等.白鶴芋體細胞胚無性系的建立[J].廣東園林，1994（4）：18－20

[6]劉選明，周樸華，屈姝存，等.百合鱗片葉離體誘導形成不定芽和體細胞胚[J].園藝學報，1997，24（4）：353－358