日本鰻鱺COX-2基因的克隆、鑒定及表達分析

張芳芳，熊 靜，2，段明珠，李春艷，彭喜霞，黃文樹，2，3

（1.集美大學水產學院，福建廈門 361021；2.鰻鱺現代產業技術教育部工程研究中心，福建廈門 361021；3.福建省海洋生物資源開發利用協同創新中心，福建廈門 361021）

日本鰻鱺COX-2基因的克隆、鑒定及表達分析

張芳芳1，熊 靜1，2，段明珠1，李春艷1，彭喜霞1，黃文樹1，2，3

（1.集美大學水產學院，福建廈門 361021；2.鰻鱺現代產業技術教育部工程研究中心，福建廈門 361021；3.福建省海洋生物資源開發利用協同創新中心，福建廈門 361021）

應用PCR及RACE技術從日本鰻鱺（Anguillajaponica）中克隆獲得一個2463 bp環氧化酶基因（Cyclooxygenase-2，AjCOX-2）的cDNA序列.AjCOX-2前體為606肽，含有脊椎動物COX-2的保守結構域，以及加氧酶和過氧化物酶的活性位點.在正常生理條件下，AjCOX-2基因在日本鰻鱺的鰓、鰾和皮膚中高水平轉錄表達.脂多糖刺激后8 h，AjCOX-2基因在皮膚和鰾中的轉錄表達顯著上調（P＜0．05）；多聚胞苷酸刺激后8 h，AjCOX-2在皮膚、鰾和鰓中的轉錄表達顯著上調（P＜0．05）；遲緩愛德華氏菌（Edwardsiellatarda）刺激后8 h，AjCOX-2在鰾中的轉錄表達也極顯著上調（P＜0．01）．結果表明，AjCOX-2基因是對外來病原刺激的早期響應基因，參與機體抵抗外來刺激物的先天免疫應答.

日本鰻鱺；COX-2；脂多糖；多聚胞苷酸；遲緩愛德華氏菌

0 引言

環氧化酶（Cyclooxygenase，COX）也稱為前列腺素內過氧化物G／H合成酶（Peroxide G／H synthetase）（EC 1.14.99.1），具有催化花生四烯酸形成前列腺素內過氧化物G2（Prostaglandin endoperoxides G2，PGG2）的雙加氧酶（或環氧合酶）活性，以及還原PGG2形成PGH2（Prostaglandin endoperoxides H2，PGH2）的過氧化物酶活性［1］.PGH2是前列腺素（prostaglandins）、環前列腺素（prostacyclins）及血栓烷（thromboxanes）的前體.前列腺素類物質在發熱、炎癥反應、維持妊娠、調節離子運輸、水平衡和止血等多種生物過程中……