一種市售綠茶的抗氧化作用研究

隋思強等

摘要：[目的] 探討一種綠茶浸提物的最佳提取工藝及其抗氧化活性。[方法]以保定市售綠茶為研究對象，通過對不同浸提時間、浸提溫度與料液比等浸提條件對浸提效果影響得出綠茶浸提物的最佳提取工藝并鑒定提取物的抗氧化活性。[結果]試驗表明，綠茶在提取時間為30 min，料液比為1∶20 g/ml，提取溫度為80 ℃時，具有最佳的提取效果。通過在豆油中的抗氧化活性研究表明，提取物有著比維生素E強的抗氧化性。[結論]研究可為綠茶資源的進一步開發利用提供參考。

關鍵詞：綠茶；綠茶浸提物；最佳提取工藝；抗氧化性

中圖分類號：S571 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）08-252-01

綠茶又被稱作不發酵茶。以茶多酚為主的綠茶浸提物含有豐富的兒茶素等多酚類化合物，是茶葉中主要的起生理活性和藥理作用的物質，其浸提物的提取對茶資源的開發和研究有著很大的促進作用[1]。筆者根據不同的條件對綠茶中的抗氧化物質進行浸提，確定了最佳提取方案，并對浸提物的抗氧化作用做了初步的驗證，證明其有良好的抗氧化作用[2]。研究確定的最佳提取方案可應用于試驗研究以及化工生產，可以免去一些不必要的測試、鑒定等。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑。 75%乙醇，氯仿，乙酸乙酯，冰乙酸，維生素，可溶性淀粉，碘化鉀植酸，冰乙酸，酒石酸。

1.1.2 主要儀器及用具。

萬能粉碎機（FW-80），恒溫水浴鍋（HH-S6），電子分析天平（BS224S），離心機（TD25-WS），鼓風干燥箱（DHG-9245A），燒杯，試管，量筒，分液漏斗，滴定管等。

1.2 方法

1.2.1 綠茶浸提物的提取。先取100 g綠茶用萬能粉碎機粉碎，再取1 500 ml 75%乙醇備用。

根據以往研究可知，影響提取效果的因素主要有加熱溫度、加熱時間以及加熱時的料液比等。分別以不同的提取溫度、不同的提取時間以及料液比做3個單因素試驗，來驗證不同條件對綠茶浸提效果的影響[3]。

1.2.2 浸提物的純化。

將綠茶粗提物在2 000 r/min離心2 min，棄掉沉淀后加入等體積的氯仿對溶液進行萃取。振蕩、靜置分層后取出上層水相。向水相中加入等量的乙酸乙酯。振蕩、靜置分層后取下層有機相。乙酸乙酯易揮發，加熱有機相使其蒸發結晶，最后得到純度較高的綠茶提取物[4]。

1.2.3 綠茶浸提物抗氧化研究。利用浸提物對豆油的抗氧化作用來檢驗浸提物抗氧化能力[5]。將150 g豆油與100 mg硫酸亞鐵混合等量分成5組，其中1組作為對照，另外4組分別加入：① 6 mg綠茶浸提物，② 6 mg維生素E，③ 6 mg綠茶浸提物和6 mg酒石酸，④ 6 mg綠茶浸提物和6 mg植酸。將5組樣品于65 ℃，無光條件下放置。每3 d測量一次豆油的抗氧化值，稱取樣品3 g，加入30 ml三氯甲烷-冰乙酸混合液并立即搖動使其溶解，然后加入1 ml飽和KI溶液，加塞后輕微振蕩30 s，置于暗處3 min。

靜置后取出樣品并加入100 ml的水，輕輕搖晃，立即用硫代硫酸鈉標準溶液滴定樣品，滴定至淡黃色后，向樣品中加入1 ml的淀粉指示劑，繼續滴定樣品，滴定至藍色時油脂氧化時會在油脂當中產生一些氧化物質，這些物質的氧化性可以將碘離子氧化成碘，而碘可以使淀粉溶液變藍。當用硫代硫酸鈉滴定時，這些碘又變成碘離子，而藍色也隨之消失。

滴定硫代硫酸鈉的體積用于油脂的過氧化值（PV）的計算：

PV = 1 000（V-Vo）C/m

式中，V，滴定的硫代硫酸鈉體積（ml）；

Vo，空白組消耗的硫代硫酸鈉體積（ml）；

C，硫代硫酸鈉的濃度（mol/l）；m，油脂試樣的質量（g）。

2 結果與分析

2.1 不同浸提條件對浸提效果的影響

2.1.1 最佳提取溫度。

通常提取效果與提取溫度成正比，但是過高溫度的提取會降低提取效果。固定料液比與提取時間，分別對不同提取溫度的綠茶進行浸提。

取5份10 g茶葉粉末，將綠茶粉末與200 ml 75%乙醇混合、攪拌、靜置后，分別在50、60、70、80、90 ℃的水浴鍋中提取30 min。2次重復試驗，取3次試驗提取率的平均值。

試驗得出，提取溫度50、60、70、80、90 ℃時，浸提物提取率依次為5.9%、6.7%、7.5%、8.4%、10.3%。由此可知，當提取時間和料液比固定的情況下，浸提物提取率是隨著提取溫度的升高而遞增，但是當提取溫度90 ℃時，由于加熱溫度過高，會導致提取物的抗氧化活性喪失[6]，所以綠茶浸提物的最佳提取溫度為80 ℃。

2.1.2 最佳提取時間。確定最佳提取溫度后，在這個提取溫度下，固定料液比，對不同溫度下的綠茶進行浸提。

取5份10 g茶葉粉末，將綠茶粉末與200 ml 75%的乙醇混合、攪拌、靜置后，在80 ℃的水浴鍋中分別加熱10、20、30、40、50 min。2次重復試驗，取3次試驗提取率的平均值。

試驗得出，當提取時間為10、20、30、40、50 min時，浸提物提取率依次為6.1%、6.9%、7.9%、7.1%、6.5%。由此可知，當料液比和提取溫度固定的情況下，改變提取時間對最后得到的提取率的影響較小，提取率先是隨著提取時間的增加而增加，但當提取時間超過30 min后，隨著提取時間的增加，提取率減小。由結果比較得出，當料液比和提取溫度2個條件確定時，最佳提取時間為30 min。

2.1.3 最佳提取料液比。

取5份10 g茶葉粉末，分別與75%的乙醇100、150、200、250、300 ml（即料液比為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g/ml）混合、攪拌、靜置后，在80 ℃的水浴鍋中分別加熱30 min，2次重復試驗，取3次試驗提取率的平均值。

試驗得出，當料液比為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g/ml時，浸提物提取率依次為6.2%、7.3%、8.2%、6.8%、5.6%。由此可知，當提取時間和提取溫度固定的情況下，逐步增加料液比中溶劑用量會改變影響提取的效果，初步增加液料比中溶劑用量時可以增加提取率，當料液比小于1∶20后，隨著料液比中溶劑用量的增加，提取率逐漸減少。這是由于浸提物混合物中不同物質的不同溶解度造成的，所以當提取溫度和提取時間確定時，最佳液料比為1∶20 g/ml。

2.2 綠茶浸提物與普通抗氧化物的抗氧化效果的比較 由表1可知，對照組是所有樣品中過氧化值最高的，當在樣品中加入綠茶提取物和維生素E等抗氧化物后，過氧化值有著不同水平的降低。數據表明，添加綠茶浸提物的樣品過氧化值低于添加維生素的樣品，這證明了綠茶浸提物有著比維生素E強的抗氧化性。酒石酸與植酸的添加可增強茶多酚在油脂中的抗氧化能力。根據試驗數據得知，植酸促進茶多酚抗氧化的能力要優于酒石酸。

3 結論與討論

通過試驗驗證綠茶茶多酚最佳提取條件為80 ℃，浸提時間為30 min，料液比為1∶20 g/ml。而通過對豆油的抗氧化試驗可以看出，綠茶浸提物抗氧化能力比維生素E高出數倍，有著較好的抗氧化力，而對比植酸和酒石酸對浸提物的看氧化促進能力來看，植酸有著較好的促進能力。

根據在油脂中測量的抗氧化值可知，以茶多酚為主綠茶浸提物有著比維生素E強的抗氧化性；在試驗中最大提取率達到10%，證實茶多酚等抗氧化物在綠茶中的含量是比較高的，這是綠茶有著較高的保健價值的因素之一。

參考文獻

[1] 潘根生.茶葉大全[M].北京：中國農業出版社，1995：89-217.

[2] 趙大洲，石蓓梅，葉主紅.茶多酚水提與醇提比較研究[J].食品開發與研究，2007，28（8）：69-71.

[3] 王洪新，戴軍，張家儷，等.茶葉兒茶素單體的分離純化及鑒定[J].無錫輕工業大學學報，2001，20（2）：117-121.

[4] 王玉春.茶多酚的提取方法及應用研究進展[J].甘肅聯合大學學報，2008，22（3）：51-55.

[5] 熊何建，胡慰望，謝筆鈞.茶多酚分離制備的新工藝[J].食品工藝科技，1997（6）：34-36.

[6] 董文斌，胡英.茶多酚的制備工藝及研究現狀[J].西北輕工業學院學報，2002，20（4）：18-24.