高效液相色譜法測定血清碘海醇濃度方法的建立和應用

王寶寶，武元，付 強，弓孟春，石希敏，景紅麗，李 方，陳朝英，宋紅梅，秦 巖*，李雪梅

(中國醫學科學院 北京協和醫院1.腎內科;2.藥劑科;3.核醫學科;5.兒科，北京100730;4.首都兒科研究所附屬兒童醫院 腎內科，北京100020)

腎小球濾過率(glomerular filtration rate，GFR)是評價腎臟功能的最佳指標。以內源性標志物為基礎的eGFR(estimated glomerular filtration rate，eGFR)預測公式為臨床廣泛應用。然而，國內兒童eGFR公式多是采用國外公式[1-2]，其在中國兒童中的適用性并未得到廣泛認可。碘海醇血漿清除率因操作方法簡便、無放射性，與菊粉及放射性標志物(如99mTc-DTPA和51Cr-EDTA 等)清除率具有較好的一致性，在國外被用來評估包括兒童在內的廣泛人群的GFR[3-5]。而且，其用于評估腎功能時所用劑量約為5 mL，為常規造影劑量的1/20，安全性非常好[2，6]。但是，國內關于碘海醇濃度測定方法的研究較少，使得碘海醇清除率尚未推廣。本研究擬建立測定血清碘海醇濃度的HPLC 法，并探索碘海醇清除率在慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)兒童腎功能評價方面的可行性。

1 材料與方法

1.1 患者一般資料

33例CKD 患兒中，男13例，女20例，平均年齡(11.8±2.5)歲，身高(148.4±15.7)cm，體質量(45.5±18.0)kg，血清肌酐為(59.42±21.31)μmol/L(酶法)。33例患兒以99mTc-DTPA血漿清除率為CKD分期標準分為:1期13例，2期15例，3期5例。

該研究通過北京協和醫院倫理委員會的審查。所有患兒接受檢查前均由監護人簽署知情同意書。

1.2 HPLC方法建立

1.2.1 試劑:碘海醇標準品(98%，Sigma 公司)。內標(internal standard，IS):碘海醇雜質B(100%，中國藥品生物制品檢定所)。

1.2.2 色譜條件:色譜柱(日本島津CLC-ODS，150 mm×6.0 mm，5 μm)，流動相為乙腈與超純水3∶97體積配制(磷酸調節pH至3.0～3.5)，檢測波長(λ)254 nm，柱溫40℃，流動相流速1.2 mL/min。

1.2.3 溶液配制:1)碘海醇標準母液(10 g/L)。……