氣相色譜法檢測蔬菜中7種有機磷農藥殘留

郗艷麗，葛紅娟，王長文，樊麗花，劉正陽，馬洪波，宋春梅

（吉林醫(yī)藥學院公共衛(wèi)生學院，吉林吉林132013）

蔬菜是我們日常生活中必不可少的食物之一。蔬菜中富含許多對人體有益的有效成分，常食用蔬菜可以預防慢性、退行性疾病的發(fā)生。蔬菜害蟲防治的最主要方法是噴灑農藥，尤其是有機磷類農藥的大量使用，大大降低了病蟲害對蔬菜的危害。但同時農藥殘留問題又成為了一個比較突出的問題。有機磷農藥殘留已成為影響蔬菜食用安全的一個最主要問題。有機磷農藥因其高效性和廣譜性而被大量的生產(chǎn)和使用[1]，是目前世界上生產(chǎn)量和使用量最多的一類農藥[2]，由此所帶來的污染問題也日益突出[3-4]。人體長期攝入有機磷農藥可產(chǎn)生蓄積作用，造成機體慢性中毒，甚至會導致癌癥，子代發(fā)育障礙，甚至畸形，因農藥導致的急性中毒事件也屢見不鮮[5-6]。加強有機磷農藥殘留監(jiān)測，是保障人群安全的重要措施之一。建立快速穩(wěn)定的檢測體系，對保障蔬菜食用安全更是至關重要。本試驗前期調研，篩選了7種最常用的有機磷農藥，用氣相色譜法檢測蔬菜中有機磷農藥殘留量，建立一種快速檢測有機磷農藥殘留的方法和體系。該方法的穩(wěn)定性好，靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 材料選取

蔬菜于7～8月份購自吉林市3家超市和2家大型農貿市場的早場時間。根據(jù)蔬菜的種類分別采購了葉菜類（菠菜、小白菜和韭菜）、果菜類（西紅柿、黃瓜、青椒和茄子）以及根菜類（胡蘿卜、白蘿卜和土豆）共10種。

1.2 儀器與試劑

GC1100氣相色譜儀（配有氮磷火焰光度檢測器、SPH-300氮氣發(fā)生器和SPN-300氫氣發(fā)生器）：北京普析通用儀器有限責任公司；EV311旋轉蒸發(fā)儀：萊伯泰科公司；HN200多功能氮吹儀：海能儀器股份有限公司；24UV超純水器：美國Millipore公司；敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、樂果、殺螟松、對硫磷、水胺硫磷：均購自農業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所（濃度均為100μg/mL）；乙酸乙酯、無水硫酸鈉（分析純）：山東青島市正大化學試劑廠。

1.3 方法

1.3.1 氣相色譜條件

色譜柱：OV-1701（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；升溫程序：60℃保持1 min，以30℃/min上升到210℃，保持10 min，再以10℃/min升到240℃，保持6 min。檢測器溫度為260℃，進樣口溫度為250℃，不分流。載氣為氮氣（純度 99.999%），壓力 0.41 MPa，流速 1.20 mL/min，氫氣壓力0.39 MPa，空氣壓力0.41 MPa。

1.3.2 農藥標準溶液的配置

取各農藥標準溶液10 μL于1mL容量瓶中，加丙酮 30 μL，輕輕混勻，制成濃度為 10.00 μg/mL 的混合標準溶液，并逐級稀釋成濃度為5.00、2.50、1.00、0.05 μg/mL的混合標準系列。按照“1.2.1”色譜條件進行測定，以峰面積為縱坐標，以標準溶液的濃度為橫坐標作圖，繪制出標準曲線。

1.3.3 最低檢測限

將濃度為0.05 μg/mL的混合標準溶液逐級稀釋，進樣分析，當檢測到的色譜峰高度為噪聲高度的3倍（S/N=3）時，其所對應的濃度即為最低檢測限，根據(jù)公式（1）計算出最低檢測含量。

式中：D為農藥檢出限，mg/kg；N為噪聲高度；Q為進樣量，μL；I為信號響應值。

1.3.4 樣品前處理

將蔬菜可食部分切碎，準確稱取10 g置于250 mL碘量瓶中，加入25 mL乙酸乙酯，混勻后室溫浸泡2 h，加入0.4 g活性炭脫色至無色，無水硫酸鈉脫水，45℃旋轉蒸發(fā)至2 mL，氮吹至近干，乙酸乙酯定容至5 mL，氣相色譜儀測定，進樣體積1 μL。

1.3.5 加標回收率

稱取10 g切碎蔬菜置于碘量瓶中，分別添加1.0 μg/mL和5.0 μg/mL混合標準溶液，按樣品前處理的方法提取，每個樣品重復測定5次，計算回收率和相對標準偏差（RSD）。

1.4 樣品的測定及數(shù)據(jù)處理

樣品經(jīng)0.45 μm的微孔濾膜過濾后，進樣1 μL測定。測得樣品中農藥的峰面積，按照公式（2）計算樣品中農藥的含量。

式中：Xi為樣品中有機磷農藥 i含量，mg/kg；Ai為樣品中有機磷農藥i的峰面積，μV·S；Ci為樣品提取液中的有機磷農藥的濃度，μg/mL；V為濃縮后動容的體積，mL；m為用于提取的樣品的量，g；Ais為混合標準溶液中有機磷農藥i的峰面積，μV·S；Cis為混合標準溶液中有機磷農藥i的濃度，μg/mL。

1.5 國家標準農藥最大殘留限量（MRLs）

國家標準規(guī)定蔬菜中各種農藥最大殘留限量見表1（摘自GB 2763-2014《食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量》）。

表1 國標規(guī)定蔬菜中各種農藥的最大殘留限量（MRLs）Table 1 The standard of maximum residue limits for pesticides in vegetables mg/kg

2 結果與分析

2.1 標準曲線及檢出限

在設定的氣相條件下測定標準系列溶液，得到7種農藥的標準曲線，見圖1?；貧w方程、相關系數(shù)及最低檢出濃度結果見表2。

圖1 氣相色譜法檢測7種有機磷農藥標準品色譜圖Fig.1 Determination of seven organophosphorus standard samples for pesticide by gas chromatography

表2 氣相色譜法檢測蔬菜中7種有機磷農藥的標準曲線和檢出限Table 2 Determination of standard curve and detection limit of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

7 種有機磷農藥在 0.05 μg/mL～10.00 μg/mL 的濃度范圍內線性關系良好，線性相關系數(shù)為0.986～0.999。最低檢出濃度為 0.02 μg/mL～0.05 μg/mL，最低檢出含量為0.01 mg/kg～0.025 mg/kg。

2.2 加標回收率

按照氣相檢測條件，分別檢測1.0μg/mL和5.0μg/mL 2個濃度的加標回收率。在相同條件下，對標準品溶液連續(xù)進樣5次，測定封面積，計算相對標準偏差（RSD），結果見表3。

當標準品濃度為1.0 μg/mL時的加標回收率為71%～86%，RSD在5.8%～16.0%范圍之間；標準品濃度為5.0 μg/mL時的加標回收率為92%～96%，RSD在1.4%～5.0%范圍內。本試驗所采取的樣品前處理方法準確度，儀器的精密度良好，能夠滿足后續(xù)檢測的需要。

表3 氣相色譜法檢測蔬菜中7種有機磷農藥的加標回收率（±s，n=5）Table 3 Determination of recovery rate of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

表3 氣相色譜法檢測蔬菜中7種有機磷農藥的加標回收率（±s，n=5）Table 3 Determination of recovery rate of seven organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography

農藥 1.0 μg/mL 5.0 μg/mL測定值/（μg/mL）回收率/%RSD/%測定值/（μg/mL）回收率/%RSD/%敵敵畏 0.71±0.32 71 12.7 4.62±0.32 92 5.0甲胺磷 0.77±0.11 77 14.3 4.74±0.13 95 2.7乙酰甲胺磷 0.72±0.09 72 12.5 4.74±0.13 95 2.7樂果 0.75±0.12 75 16.0 4.74±0.13 95 2.7殺螟松 0.86±0.05 86 6.1 4.82±0.07 96 1.4對硫磷 0.82±0.07 82 8.5 4.69±0.08 94 1.7水胺硫磷 0.86±0.05 86 5.8 4.71±0.11 94 2.3

2.3 蔬菜的檢測結果

將本方法用于吉林市市售蔬菜的檢測，樣品檢測均未超過國家標準。該方法操作簡單，提高了工作效率，可用于大量樣品的分析檢測。

3 結論

本研究利用氣相色譜建立了蔬菜中7種有機磷農藥同時檢測的方法，通過對不同來源蔬菜的檢測，驗證了該檢測方法的實用性。該方法簡單，試劑使用量少，成本低廉，靈敏度和準確度高，檢測速度快，能滿足農藥快速篩查的需要。

[1] 汪娌娜,徐軍.氣相色譜法測定蔬菜中15種有機磷農藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2009,19(1):63-65

[2] 吳福中,王錦海,劉志紅,等.氣相色譜法測定蔬菜中7種殘留有機磷農藥[J].中國農學通報,2009,25(19):59-61

[3] 汪雅谷,張四榮.無污染蔬菜生產(chǎn)的理論與實踐[M].北京:中國農業(yè)出版社,2001:13

[4] 葛曉光,張智敏.綠色蔬菜生產(chǎn)[M].北京:中國農業(yè)出版社,1997:54

[5] 徐彬.400例口服有機磷農藥中毒搶救分析[J].中國衛(wèi)生標準管理,2015,6(1):108-110

[6]楊偉紅.急性有機磷農藥中毒早期血藥濃度與CD分子的相關性及臨床意義[J].臨床急診雜志,2015,16(1):50-53