應用TRIZ研究測定黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷含量的方法*

摘 要：黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量對藥性和藥效有重要意義，所以要找到一種行之有效的檢測法，文章結合TRIZ進化理論，嘗試應用液相色譜檢測法測定黃芪甲苷含量，通過實驗檢驗證明采用Hypersil ODS-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以乙腈-水（32：68）為流動相的方法快速簡便、高效。

關鍵詞：TRIZ；HPLC；黃芪甲苷；含量測定

黃芪桂枝五物湯噴干粉由黃芪、桂枝、芍藥、生姜、大棗五味藥組成。具有益氣溫經、和血通痹；調養榮衛，祛風散邪的功效，臨床上可用于治療肩周炎、末梢神經炎、坐骨神經痛、類風濕性關節炎、中風后遺癥等疾患。噴干粉在生產中常做顆粒劑，片劑或膠囊劑的中間產品，生產中具有一定現實意義。本實驗應用TRIZ理論對方中君藥黃芪的主要有效成分黃芪甲苷的含量測定方法進行了摸索，以期為黃芪桂枝五物湯新劑型的改進提供一定的質量依據。

1 存在的問題（矛盾或沖突）

黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量需要測定，但資金少儀器、藥物有限這是一種矛盾。如何解決是需要思考的問題。

TRIZ理論中的理想解IFR指出技術系統是沿著提高其理想度，向最理想系統的方向進化。理想度水平衡量公式為：I=ΣUF/ΣHF

式中：I-理想化水平（理想度）；ΣUF-有用功能之和；ΣHF-有害功能之和。

所以在測量黃芪甲苷的含量過程中我們應遵循利用的資源最少，成本低，效率高的思路。TRIZ理論提供了發現，解決問題的工具和技術，可以幫助科研人員避免解決問題過程中繁瑣的試湊工作。TRIZ理論自始至終強調運用積極的思維客服慣性思維的束縛，TRIZ理論中克服思維慣性的方式有很多，如最終理想解，用非專業術語描述問題，STC算子，九屏法，小人法金魚法，物-場分析法等，通常情況下，工程技術人員解決技術問題的步驟為：一是了解具體問題、分析問題； 二是查找有關資料，了解所有已有方法并比較各種方法的優缺點；三是結合具體問題的種種限制條件，設計出技術方案。TRIZ理論中常用的科學效應大約有100多個，作者在分析了該技術問題是測量問題后，直接查找TRIZ的科學效應庫，從科學效應的功能代碼表中查找到代碼 F22（檢查物體容量的狀態和特性）。F22中推薦的科學效應和現象有E1（X射線）、E6（標記物）、E43（放射現象）、E45（感光材料）、E50（光譜）、E3（巴克豪森效應）、E60（熱磁效應）等。經綜合分析上述幾個方法，光譜是可以采納的方案[1]，所以我們選擇了液相色譜檢測法。

2 儀器與試藥

儀器：Agilent Technologies 1200Series型高效液相色譜儀；Agilent數據處理系統（美國產）；SEDEX-85蒸發光散射檢測器；色譜柱：Thermo Electron corporation；Hypersil ODS（C18），（4.6mm×250mm，

5um），填充為十八烷基硅烷鍵合硅膠。流動相：乙腈-水（32：68）；流速：1ml/min；柱溫：30℃；黃芪甲苷對照品：中國藥品生物檢定所，批號：110781-200613。

樣品來源：實驗室自制。

3 溶液制備

3.1 對照品溶液的制備

按含量測定項下方法制備對照品溶液，精密稱定黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每lml含黃芪甲苷0.53mg的對照品溶液。

3.2 供試品溶液的制備

取本品適量，加去離子水15ml攪拌溶解，加水飽和正丁醇振搖提取4次 （25ml、25ml、20ml、20ml），合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次（20ml、20ml），棄去氨試液，加正丁醇飽和的水振搖提取2次 （20ml、20ml），棄去水層，正丁醇液水浴蒸干，甲醇溶解定容至5ml，為供試品溶液。

4 方法學考察

4.1 線形范圍及標準曲線的制備

精密吸取對照品溶液適量，分別稀釋成0.106、0.212、0.318、0.424、0.53mg/ml溶液，分別精密吸取10？滋l按上述條件進行測定，可得到相關數據。

將含量及峰面積取自然對數，進行線形回歸，以峰面積自然對數值為縱坐標，以進樣量（黃芪甲苷含量）自然對數值為橫坐標，僅得回歸方程為：Y=5.8352+1.4938X線性關系（r=0.9994），表明相關性顯著，具有良好的線性關系。結果表明，黃芪甲苷在1.06？滋g～5.3？滋g之間有良好的線性關系。

4.2 陰性對照試驗

取陰性樣品7g，按供試品溶液的制備方法，制成陰性樣品溶液，精密進樣20？滋l.結果表明，黃芪桂枝五物湯固體湯劑中其他成分對黃芪甲苷的測定無干擾。供試品溶液、對照品溶液、陰性溶液的色譜圖見圖1。

4.3 精密度試驗

分別精密量取同一批黃芪甲苷對照品溶液10？滋l（0.53mg/ml），重復進樣5次，按含量測定項下色譜條件測定峰面積，結果黃芪甲苷RSD=0.86%（n=5），表明進樣精密度良好。

4.4 穩定性試驗

精密稱取供試品（批號：20090705）7.0217g，按含量測定項下制備供試品溶液。精密進樣20？滋l，按設定時間連續進樣5次，結果黃芪甲苷RSD=1.81%，表明樣品溶液在12h內穩定性良好。

4.5 重復性試驗

稱取同一批號（批號：20090705）供試品5份，每份約7g，精密稱定重量，按含量測定項下制備供試品溶液和測定，結果黃芪甲苷RSD=1.91%，表明方法重復性好。

4.6 加樣回收率試驗

取本品（批號：20090705），稱取5份，每份約3.5g，精密稱定，分別加入濃度為0.23mg/ml的黃芪甲苷對照品1ml，分別按含量測定項下制備供試品溶液方法制備并測定，結果見表1。

黃芪甲苷平均回收率為98.24%，RSD為1.05%；表明回收率較高，方法可靠。

5 樣品測定

按上述方法測定3批樣品中黃芪甲苷含量的平均值為0.0551mg/g，考慮到藥材來源、以及制劑生產，貯存等因素，按降幅20%計為本品含量限定值，則其含量應不低于0.044mg/g。

6 結束語

通過以上方法學的驗證，結果表明，用蒸發光散射檢測器高效液相色譜法測定黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量，該方法操作簡便、準確、重現性好，適用于該劑型的質量控制。

參考文獻

[1]朱險峰，沙洪，謝小波，等.TRIZ在生物醫學工程中的實證分析[J].天津大學學報（社會科學版），2010，12（9）：433-437.

[2]趙敏.TRIZ入門及實踐[M].北京：科學出版社，2009（1）.

作者簡介：李連闖（1980-），男，黑龍江省哈爾濱市人，講師，碩士，從事藥劑學及質量標準研究。