膽堿酯酶定量檢測在有機磷中毒中的應用

摘要：目的 探討膽堿酯酶定量檢測在有機磷中毒中的應用價值。方法 設計實驗，在接收有機磷中毒患者后，采樣定量計算膽堿酯酶，并重復試驗5次計算誤差，選擇健康人重復試驗10次，計算檢測誤差。結果 定量檢測結果顯示，患者在50～100U/L水平中分布比重最高，其次為100～150U/L；膽堿酯酶嚴重程度癥狀評價：輕度12例、中度37例、重度33例，輕度分布在50～220U/L，中度分布在50～150U/L，重度分布在0～150U/L，Kappa一致性系數(shù)為0.92；重復定量檢測kappa一致性系數(shù)為0.83，精密度實驗，正誤差<4%，中度患者誤差<3%。結論 定量檢測操作簡單、快速、可靠、數(shù)據(jù)穩(wěn)定，以\"0～50U/L重度，50～150U/L中度，150～220U/L輕\"為標準，評估中毒水平，可基本滿足臨床需要。

關鍵詞：定量檢測；農藥中毒；有機磷農藥中毒（AOPP）；膽堿酯酶；中毒水平

我國是農業(yè)大國，農藥生產量、使用量巨大，農業(yè)工作者、農藥產銷者接觸農藥頻繁，成為農藥中毒高風險人群，同時因生存壓力加大，服藥自盡者例數(shù)也顯著上升，每年農藥中毒者超10萬人，其中約1/5患者死亡。急性有機磷農藥中毒（AOPP）是我國最常見的急性中毒疾病之一，約占農藥中毒80%[1]。AOPP患者輕則伴有生理功能紊亂，重者可出現(xiàn)休克、呼吸衰竭甚至死亡，重癥AOPP死亡率、并發(fā)癥發(fā)生率極高，常用的治療方法包括血流灌洗、藥物解毒、洗胃等，其中部分療法存在一定使用風險，使用應據(jù)患者病情而定，及時、快速、準確的判斷患者病情，采取正確的搶救措施是改善患者預后的關鍵。膽堿酯酶活力檢測是評估AOPP中度程度的重要依據(jù)、常用手段，但檢測困難、成本高、臨床難普及，考慮到AOPP患者多來自于廣大的農村基層，醫(yī)療條件有限，而膽堿酯酶定量檢測相對容易、成本低，適合臨床推廣[2]。本次研究就膽堿酯酶定量檢測在有機磷中毒中的應用價值進行探討，并初步擬定定量檢測評估AOPP中毒水平標準。

1 資料與方法

1.1一般資料 本組患者82例，收治于2009年2月～2014年8月，其中男32例，女50例，年齡14～79歲，平均（34±6）歲。中毒途徑：噴灑毒藥中毒12例，誤服或自服70例，服用劑量5ml～145ml，平均（82±31）ml；服用至就診時間：50min～80min，平均（51±14）min。中毒藥物種類：①劇毒類4例，甲拌磷2例、內吸磷1例、對硫磷1例；②高度類44例，敵敵畏24例、氧化樂果20例；③中等毒類27例，樂果26例、敵百蟲1例；⑤低毒類7例，均為馬拉硫磷。納入標準：①非他院轉入，本院收治；②未合并有其它類型農藥中毒，后期確診為AOPP；③臨床資料均完整[2]。

1.2方法

1.2.1 實驗一 日立7180自動生化分析儀及其配套試劑。其基本原理是擬膽堿脂酶催化丙酰硫代膽堿水解，產生丙酸與硫代膽堿，后者與無色二硫代雙反應，形成黃色的5巰基-2-硝基苯甲酸。選擇1體積底物與100ml配套試劑混合，搖勻，備用。采用速率法，波長405nm，取2μl樣品稀釋至38μl，試劑體積200μl，稀釋量10μl，溫度控制在30℃，延滯35s、間隔15s，測定點數(shù)8，測定公式：膽堿酯酶（IU/L）=△A/min×12632，△A/min為1min內吸光度變化值。

1.2.2實驗二 重復實驗5次，計算檢測誤差，評價每次檢測評價中毒水平一致性。選擇健康人，重復試驗10次，計算檢測誤差。

1.3判定標準 膽堿酯酶嚴重程度癥狀評價：①輕度，頭暈、頭痛、惡心、嘔吐、多汗、胸悶、視力模糊、無力、瞳孔縮小等癥狀表現(xiàn)；②中度：除上述癥狀外，還有肌纖維顫動、瞳孔明顯縮小、輕度呼吸困難、流涎、腹痛、步態(tài)蹣跚等癥狀表現(xiàn)，但意識尚清楚；③重度：除中度癥狀外，還可伴有昏迷、肺水腫、呼吸麻痹與嚴重受限、腦水腫等嚴重并發(fā)癥。

1.4統(tǒng)計學處理 以SPSS18.0軟件包處理所獲數(shù)據(jù)資料，以（x±s）表示計量資料，以[n（%）]表示計數(shù)資料，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1實驗一

2.1.1定量檢測值域分布 定量檢測結果顯示如下表1，患者在50～100U/L水平中分布比重最高，其次為100～150U/L。

2.1.2中毒水平 參照膽堿酯酶嚴重程度癥狀評價中毒水平，輕度12例、中度37例、重度33例。以\"0～50U/L重度，50～150U/L中度，150～220U/L輕\"為標準，評估中毒水平，Kappa一致性系數(shù)為0.92，屬高度一致，見表2。

2.2實驗二 重復檢測kappa一致性系數(shù)為0.83，屬高度一致，誤差較小，見表3。

精密度實驗，正誤差<4%，中度患者誤差<3%，見表4。

3 討論

以膽堿酯酶活力水平評價AOPP中毒標準已較明確，即輕度中毒CHe活力50%～70%，中度中毒CHe活力30%～50%，重度中毒CHe<30%，采用公式\"膽堿酯酶活性=被測血樣中的膽堿酯酶活性絕對值/正常人中膽堿酯酶活性絕對值[3]\"，膽堿酯酶活力檢測正常值5000～13200U/L，中國常模健康人平均值為9100U/L（100%），輕度中毒CHe活力50%～70%，中度中毒CHe活力30%～50%，重度中毒CHe<30%，據(jù)公式推算平均值：輕度中毒4500U/L～6370U/L，中度中毒2730U/L～4500U/L，重度中毒<2730U/L[4]。但考慮到個體差異，這種推算誤差較大，而檢測不易受中毒影響的羥基膽堿酯酶，按照比重換算正常狀態(tài)下全血膽堿酯酶再計算膽堿酯酶活性，則需要耗費大量的時間，難以應用于臨床，且所需儀器、試劑較多。本次研究結果顯示定量檢測以\"0～50U/L重度，50～150U/L中度，150～220U/L輕度\"為標準，評估結果與膽堿酯酶嚴重程度癥狀評價結果一致性系數(shù)K=0.92，反映定量檢測評估中毒水平效果較好。后經實驗二，證實定量評估結果較穩(wěn)定，可滿足臨床需要。

綜上所述，定量檢測操作簡單、快速，以\"0～50U/L重度，50～150U/L中度，150～220U/L輕\"為標準，評估中毒水平，可基本滿足臨床需要。

參考文獻：

[1]王文余，任從棉，張曉軍.血清膽堿酯酶與電解質的持續(xù)檢測在重度有機磷中毒診治中的臨床意義[J].當代醫(yī)學，2009，24（179）：72-73.

[2]白一偉.膽堿酯酶活力快速測定盒在有機磷中毒治療中的指導價值[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2011，13（18）：202-203.

[3]張永年，李國玉，焦賢芳.有機磷農藥作業(yè)工人血清膽堿酯酶活力分析[J].職業(yè)與健康，2006，22（22）：1938-1939.

[4]王元明.膽堿酯酶活力測定在有機磷中毒中的作用評價[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5（2）：114-115.編輯/哈濤