雄性化黃顙魚卵睪體的研究

吳美仙　陳頁

摘要 [目的]對雄性化黃顙魚卵睪體進行初步觀察。[方法]從形態學和組織學角度，觀察雄性化處理后黃顙魚卵睪體的發育過程。[結果] 黃顙魚卵睪體的形態結構可分為卵巢形、上下異形、左右異形3種主要類型。[結論] 雄性化處理后黃顙魚性腺組織結構的發展趨勢是卵巢逐漸萎縮，精巢逐步發育，最終黃顙魚可能徹底雄性化。

關鍵詞 黃顙魚；雄性化；卵睪體

中圖分類號 S9651.99 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）19-107-04

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco Richardson），隸屬鯰型目、鲿科、黃顙魚屬，俗名昂刺。黃顙魚肉質鮮嫩，味道鮮美，營養豐富，無鱗，無肌間刺，可食部分大，深受消費者喜愛。但是，在野生狀態下黃顙魚生長速度較慢，遠遠不能滿足市場需求，因此黃顙魚是目前淡水養殖的重要對象。研究表明，在相同養殖條件下雄性黃顙魚比同胞雌魚的生長速度快30% 左右[1]。杭嘉湖一帶養殖戶也大多養殖雄性化黃顙魚，以提高經濟效益。

鑒于黃顙魚全雄魚的養殖推廣還需要時間[1]，目前養殖戶大多以雄性激素性逆轉方式育苗獲得雄性化黃顙魚。黃顙魚性腺天然的組織結構、發育過程已有較多的研究[2-7]，但黃顙魚雄性化過程中性腺的形態學和組織學變化鮮有報道[8]。筆者從形態學和組織學角度對黃顙魚卵睪體進行了初步觀察研究。

1 材料與方法

1.1 試驗材料和試劑 試驗用黃顙魚仔魚通過人工授精于2012年6月29日孵化獲得。雄性化激素為甲基睪酮。

1.2 試驗方法

1.2.1 雄性化處理。取孵化后第5天的混性黃顙魚魚苗大約1 500尾分成3組，每組500尾，投入已消毒處理的4 m2的正方形水泥池（邊長2 m，水深60 cm），池1和池2為試驗組，池3為對照組。3 d后魚苗的卵黃囊消失，開始投喂餌料。對照組直接用自來水拌粉料捏合成團投喂；試驗組用

純酒精溶化激素后拌粉料捏合成小團，待酒精揮發后投喂。激素處理共持續52 d。投飼量根據魚苗進食情況逐漸調整。管理過程同養殖生產。

1.2.2 性腺組織摘取。從激素處理后第60天開始，按月取材[2] ，每池隨機抓取5尾魚，第6個月抓取15尾，第13個月結束養殖生產。黃顙魚個體較小時去頭尾，采用Bouin氏固定液固定，固定后解剖取性腺，系列酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，連續切片厚度為8 μm ，H-E染色，中性樹膠封片，Leica DM6000B顯微鏡鏡檢，并拍照。

2 結果與分析

2.1 形態結構 黃顙魚的性腺位于鰾和腎臟的腹面，左右兩葉在后方合并為一體，以1個共同的開口開于生殖乳突上。天然黃顙魚未成熟性腺呈細線狀，無法區分精巢和卵巢；隨著性腺的逐步發育，精巢從幼小的齒狀分枝發展到成熟時高度分支的菊花瓣狀，卵巢從狹帶狀到扁帶狀直至成熟時呈明顯膨脹的囊狀，卵粒充滿其間。

卵睪體的形態結構與天然的精巢和卵巢有明顯的區別。出苗98 d的黃顙魚卵睪體僅憑外觀判斷是1個純粹的卵巢，呈表面光滑的狹帶狀（圖1A）；以后的卵睪體有的呈表面不光滑的圓筒狀，局部有鈍齒 （圖1B、D、I），也有的呈帶鈍齒的狹帶狀，更類似卵巢（圖1C）；發展到后期，卵睪體更趨近于扁帶狀的卵巢，但又以鈍齒有別于卵巢（圖1E、H）；還有的兩條性腺的上半部分類似卵巢，下半部分類似精巢的結構（圖1G、K），但形似精巢的下半部分其顯微結構還是出現了卵母細胞（圖2I、J）。即使外觀形態結構是純粹的高度分枝的菊花瓣狀（圖1F），從切片的組織結構來看還是卵睪體（圖1H）。另外。有的2個性腺中的一條類似精巢的形態，另外一條類似卵巢的形態（圖1J）。

2.2 組織結構 出苗98 d和出苗121 d的黃顙魚，切片中可清晰看到卵巢和精巢各據一方，二者的面積比大約是1∶1（圖2A～B）。卵母細胞周圍發現有敗育的性細胞（圖2C）。

出苗121 d的黃顙魚（圖2D），有的精巢組織完全把卵巢包圍；出苗200 d的和340 d的都有類似的結構（圖2E～F）。精巢組織面積明顯大于卵巢組織。隨著發育時間的延續，精巢的發育越來越成熟，而大多數卵母細胞都處于第II時相[2-5，7，9-11] ，有較多的卵母細胞出現退化的跡象（圖2C，G～H）。

卵睪體總的發展趨勢是卵巢面積逐漸減少，精巢面積逐漸增加，到發育后期只出現屈指可數的幾個卵母細胞。出苗397 d，偶有幾個卵母細胞（圖2G）和只有3個卵母細胞（圖2H）的，其中2個敗育；出苗340 d的只有2個卵母細胞（圖2I）和1個卵母細胞（圖2J）。但也有例外，出苗228 d的1個樣本，卵巢面積遠大于精巢面積，精巢呈現一細條狀偏居一隅（圖2K）。

前述卵睪體中精巢和卵巢多是各自集中分布，這與Bubley W J等[12]在石斑魚中觀察到的一致。但是，在出苗212 d的黃顙魚體內觀察到1個精巢和卵巢相間分布的樣本（圖2L）。

3 討論

3.1 激素處理開始時間 魚類的性腺發育存在一個對外源激素誘導的敏感期，這個過程發生在性腺分化以前，決定性別向某一特定表型分化的方向[13]。尹洪濱等[6]認為黃顙魚性分化最早發生于出苗13 d左右。該試驗激素處理開始于出苗后7 d應該仍處于未分化前的敏感期。

3.2 形態結構和組織結構 該試驗雄性激素處理后黃顙魚性腺較多地呈現卵睪體的結構。典型卵睪體的形態結構可以基本分成3類：①卵巢形卵睪體：2條性腺都接近于卵巢的各個發育時期，或狹帶狀、或囊狀、或扁帶狀；②上下異形卵睪體：2條性腺的上半部分類似囊狀的卵巢，下半部分類似分枝狀的精巢；③左右異形卵睪體，其中一條是精巢，另一條是卵巢。

第一類卵睪體的組織結構，除1個樣本的卵巢面積遠大于精巢面積外，其余的隨著發育的持續，二者從面積比大致相等到卵巢面積逐漸減少，精巢面積逐漸增加；及至發育到第二類卵睪體的組織結構，卵巢只以少數幾個細胞殘留在精巢組織中。第三種類型的卵睪體，2條異形的性腺主體部分分別做切片，其顯微結構是單純的精巢或卵巢。

4 結論

樓允東[11]發現黑鯛（Mylio macrocephalus）幼魚的性腺是精巢，年長后反轉成卵巢，中間存在著一個雌雄同體的過渡期。綜上所述，卵睪體總的發展趨勢是卵巢面積逐漸減少，精巢面積逐漸增加，直至卵巢只以少數幾個卵母細胞甚至1個卵母細胞殘留在精巢組織中。卵睪體中的卵母細胞比較一致地處于第II時相，有的卵母細胞周圍發現有敗育的性細胞，多數可以清楚地判斷是退化的卵母細胞。在外源雄性激素的作用下，卵巢逐漸萎縮，大多數終止在第II時相；精巢逐步發育，最終黃顙魚可能徹底雄性化。

參考文獻

[1] 劉漢勤，崔書勤，侯昌春，等. 從XY雌魚雌核發育產生YY超雄黃顙魚[J].水生生物學報，2007，31（5）：718-725.

[2] 劉文彬，張軒杰. 黃顙魚的卵巢發育和周年變化 [J]. 湖南師范大學自然科學學報，2003，26（2）：73-78.

[3] 劉文彬，張軒杰. 黃顙魚精巢發育和周年變化及精子的發生與形成[J]. 湖南師范大學自然科學學報，2004，27（1）：66- 70.

[4] 楊家云.瓦氏黃顙魚精巢發育及精子生物學研究[J].西南師范大學學報：自然科學版，2005，30（4）：719-724.

[5] 陳偉興，范兆廷，楊潔. 黃顙魚性腺的組織學觀察[J]. 東北農業大學學報，2006，37（2）：194-198.

[6] 尹洪濱，賈中賀，姚道霞，等. 黃顙魚性腺分化的組織學觀察[J]. 動物學雜志2008，43（6）：103-108.

[7] 張曉芳.黃顙魚性腺發育及周年變化的研究[D].大連：大連水產學院，2005.

[8] 林丹軍，尤永隆. 江黃顙魚的人工繁殖及雄性化技術探討[J]. 福建水產，2004（2）：9-13.

[9] 盛曉灑.嘉陵江瓦氏黃顙魚雌性性腺發育周年變化的研究[D].重慶：西南大學，2008.

[10] 姚道霞.黃顙魚性分化及激素誘導性轉化研究[D].哈爾濱：東北林業大學，2007.

[11] 樓允東 組織胚胎學[M].2版.北京：中國農業出版社，1994：126-137.

[12] BULEY W J，PASHUK O.Life history of a simultaneously hermaphroditic fish，Diplectrum formosum[J]. Journal of Fish Biology，（2010，77：676-691.

[13] NAKAMURA M.Morphological and xperimental studies on sex differentiation of the gonad of several teleost fishes[D].Foc Fish，Hokkaido Univ，1978：174.