毛細管柱氣相色譜法測定醇類消毒凝膠中乙醇含量

徐 緯

(貴州醫科大學 公共衛生學院，貴州 貴陽 550004)

醇類消毒劑歷史悠久，應用廣泛，可較快殺滅細菌繁殖體、分支桿菌、真菌孢子及親脂病毒等［1］。醇類消毒凝膠是近年來出現的新型消毒劑，它以凝膠為載體，均勻附載一種或多種消毒成分，與醇類傳統消毒劑比較優勢明顯。乙醇含量檢測方法很多，主要有比重法和氣相色譜法，前者不適用于凝膠類樣品，而后者方法操作繁瑣［2－7］。目前以氣相色譜法中的直接進樣內標法為主，該法操作更簡便、準確度更高。本文以叔丁醇為內標，采用直接進樣毛細管柱氣相色譜法檢測醇類消毒凝膠中乙醇含量，報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、藥物與試劑

GC-2010 型氣相色譜儀(氫火焰離子化檢測器，日本島津公司)，Mettler Toledo AB265-S 型電子天平(Mettler Toledo 公司)，VDRTEX-5 型漩渦混勻器(其林貝爾儀器制造有限公司，江蘇海門)，超純水機(美國，Millipore)。無水乙醇和叔丁醇均為分析純，實驗用水為Milli-Q 超純水(＞18 MΩ·cm)。乙醇標準溶液(40 g/L)制備:量取乙醇12.67 mL(比重0.789 3 g/cm3)于250 mL 容量瓶中，加超純水定容至250 mL，4 ℃保存。叔丁醇標準溶液(20 g/L)制備:量取叔丁醇12.68 mL(比重0.788 7 g/cm3)于500 mL 容量瓶中，加超純水定容至500 mL，4 ℃保存。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱為OV-1701 毛細管柱(50 m×0.25 mm×0.33 μm)，進樣口溫度210 ℃，程序升溫(柱起始溫度50 ℃，保持1 min，以7 ℃/min 的速度升至170 ℃)，檢測器溫度230 ℃，載氣為氮氣(純度≥99.99%)，柱前壓100.6 kPa，柱流量0.84 mL/min，隔墊吹掃流量3 mL/min，氫氣流速30 mL/min，空氣流速300 mL/min，尾吹氣流速30 mL/min，分流比100∶1。

1.2.2 樣品溶液的制備 稱取10.0 g 樣品，用超純水定容至1 000 mL。

1.2.3 空白對照品溶液的制備 稱取10.0 g 按樣品配方不添加乙醇制成的空白對照品，用超純水定容至1 000 mL。

1.2.4 專屬性試驗 量取“1.2.2”和“1.2.3”項下溶液1.0 mL，分別制成空白對照、空白+乙醇、空白+乙醇+叔丁醇、空白+甲醇+乙醇+正丙醇+異丙醇+叔丁醇+正戊醇+異戊醇、樣品及樣品+叔丁醇的供試液，各取1 μL 進樣分析。

1.2.5 線性關系與方法檢測限試驗 配制10、20、40、60、80 及100 g/L 乙醇標準系列，各取1.2.3 項下的空白對照品溶液0.9 mL 分別加入上述乙醇標準溶液100 μL 和叔丁醇標準溶液50 μL，混勻，各取1 μL 進樣，以乙醇濃度值為橫坐標，乙醇與叔丁醇峰面積比值為縱坐標，進行線性回歸;另逐級稀釋乙醇標準溶液，按上述步驟操作，以信噪比約為3∶1時計算方法檢測限。

1.2.6 方法回收率與精密度試驗［8］取18 份同批樣品稀釋液各0.9 mL，均分為3 組，分別加入10、20、40 g/L 乙醇標準溶液100 μL 和叔丁醇標準溶液50 μL，混勻，各取1 μL 進樣。

1.2.7 樣品測定 分別取空白樣品稀釋液0.9 mL和樣品稀釋液1.0 mL 各3 份，空白樣品中加入40 g/L乙醇標準溶液50 μL 和叔丁醇標準溶液100 μL，樣品中加入叔丁醇標準溶液50 μL，混勻后各取1 μL 進樣。

2 結果

2.1 專屬性試驗

結果表明，在“1.2.1”的色譜條件下，空白對照品溶液前6 min 無干擾峰出現，乙醇和叔丁醇峰完全分離，保留時間分別為5.02 min、5.47 min，且樣品溶液中乙醇峰附近無雜峰，適宜選擇叔丁醇作為內標，另常用作消毒劑的其他醇類峰分離較好，不干擾乙醇測定，該法對醇類消毒凝膠中乙醇含量檢測具有專屬性。見圖1。

圖1 專屬性試驗色譜Fig.1 Chromatogram of the specificity test

2.2 線性關系與方法檢測限

結果表明，樣品中乙醇濃度在1 ～10 g/L 范圍時，檢測結果呈良好線性關系，Y=0.607 9X－0.030 3，r=0.999 5;方法檢測限為1.67 mg/L。

2.3 回收率與精密度

結果顯示加標回收率為98.6%～99.9%，精密度較好，RSD ＜2.0%(n=6)，表明，本文方法準確度較高，見表1。

2.4 樣品測定

測定結果顯示該批樣品中乙醇含量為52.2%，RSD 為0.6%(n=3)，屬于該類產品中乙醇含量規定范圍，結果見表2。

表1 消毒凝膠中乙醇的回收率和精密度(n=6)Tab.1 The recovery rate and the precision of ethanol in disinfectant gel

表2 消毒凝膠中乙醇含量測定(n=3)Tab.2 Determination of ethanol in disinfectant gel

3 討論

《消毒技術規范》(2002 年版)中規定了消毒劑中乙醇含量的測定方法，其中的氣相色譜法采用玻璃填充柱和外標法進行測定，操作較為繁瑣。目前氣相色譜技術多采用毛細管柱，比重法僅適用于測定含乙醇和水的溶液［2］。關于固體、半固體消毒劑中乙醇含量測定另有方法，但其蒸餾過程增加了操作復雜程度［8］。

本文樣品基質為水溶性凝膠，可通過直接稀釋方法測定乙醇含量。結果發現選擇叔丁醇作為內標時對其他醇類峰分離較好，且不干擾乙醇測定;樣品中乙醇濃度在1 ～10 g/L 范圍時，檢測結果呈良好線性關系，且方法回收率為98.6%～99.9%，RSD ＜2.0%(n=6)，

測定結果為該批樣品中乙醇含量為52.2%，RSD 為0.6%(n=3);在對樣品測定時結果也顯示乙醇含量在該類產品中乙醇含量規定范圍內，以上說明毛細管柱氣相色譜法對醇類消毒凝膠中乙醇含量檢測具有專屬性，且精密度較好，靈敏度和準確度較高，重現性較好，還能完全分離甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、叔丁醇、正戊醇和異戊醇，檢測中還發現毛細管柱氣相色譜法出峰時間快，且操作簡便，說明毛細管柱氣相色譜法可用于醇類消毒凝膠中乙醇含量的快速測定。

［1］甘平勝，黃聰，楊陽，等.頂空氣相色譜法測定手消毒劑中總醇含量［J］.中國衛生檢驗雜志，2005(3):320－321.

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［3］虞精明，謝勤美，楊鳳華.酒中乙醇含量檢測方法［J］.中國衛生檢驗雜志，2008(9):1930－1932.

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［5］樊娟，劉芳春.紅元帥蘋果貯藏過程中乙醇含量的測定［J］.中國衛生檢驗雜志，2012(09):2061－2065.

［6］王強，安代志，王莉莉，等.手消毒劑中復合醇鑒定與含量測定［J］.中國消毒學雜志，2010(6):665－667.

［7］吳勝.血液中乙醇檢測方法的探討［J］.中國衛生檢驗雜志，2013(16):3316－3318.

［8］銀燕，張聿為.醇類消毒劑及其制劑的發展［J］.中國消毒學雜志，2013(11):1062－1065.