姚莉菊等


特約欄目主持:萬勇
高級工程師,武漢市農(nóng)科院農(nóng)業(yè)機械化科學(xué)研究所副所長,負責(zé)科研、科技管理工作。長期在農(nóng)業(yè)科技推廣一線從事新產(chǎn)品開發(fā)和高新技術(shù)的引進、改進工作。參與“七萬畝建設(shè)”相關(guān)技術(shù)規(guī)范的起草與制定;主持、完成《七萬畝設(shè)施蔬菜技術(shù)集成示范推廣》(農(nóng)機部分);長期從事“溫室內(nèi)環(huán)境智能控制系統(tǒng)”、“現(xiàn)代設(shè)施條件下水肥耦合與配方施放技術(shù)”的研究;致力于小型設(shè)施蔬菜機具開發(fā),擁有專利5項。
農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全事關(guān)民眾消費安全和社會穩(wěn)定。近年來,武漢市蔡甸區(qū)以區(qū)農(nóng)檢站為主體,不斷強化監(jiān)管措施,按照統(tǒng)一標準為各街鄉(xiāng)鎮(zhèn)配備了TTNJ-16通道檢測儀器,以提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的準確性,在使用過程中建議注意以下幾點。
1 試劑配制及保存
1.1 緩沖液
取一包緩沖液,加入500 mL蒸餾水,溶解攪拌均勻后密閉,于避光、陰涼處保存。
1.2 顯色劑
取顯色劑一瓶,加入15 mL緩沖液溶解,4℃冰箱中保存。
1.3 底物
取底物一瓶,加入15 mL蒸餾水,4℃冰箱中保存。
1.4 乙酰膽堿酯酶
取乙酰膽堿酯酶一瓶,加入3 mL緩沖液溶解,4℃冰箱中保存。
2 對照溶液測試
2.1 自動對照的設(shè)置
在試管中加入2.5 mL緩沖液,再加入100 μL酶、100 μL顯色劑,搖勻后置于水浴鍋中,在恒溫37.5℃下放置15 min。15 min后再加入100 μL底物搖勻,立即倒入1 cm比色皿,放入儀器比色池中,按“對照”按鈕,儀器開始作對照,3 min后自動對照完成。
2.2 測定
建議測定對照值在0.4~0.8,當對照值在0.3~0.4時盡快使用本試劑盒,同時冷凍保存未使用完的乙酰膽堿酯酶液。當排除溫度、檢測設(shè)備等其他因素后,已測定的對照值仍然<0.3,則應(yīng)停止使用該瓶乙酰膽堿酯酶液,重新配制一瓶乙酰膽堿酯酶液后,嘗試再次測定對照值,通常情況下僅更換乙酰膽堿酯酶液即可繼續(xù)正常使用本試劑盒。
3 樣品處理
3.1 取樣部位
為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部;果蔬從不同個體的表皮處取樣。樣品不可用水沖洗,剪成1 cm×1 cm的碎片,稱取樣品2 g,放入燒杯中。
3.2 樣品處理
在裝有樣品的燒杯中加入10 mL緩沖液,振蕩1~2 min后過濾,用移液槍提取2.5 mL過濾后的待測液于試管中,加入100 μL酶、100 μL顯色劑,搖勻。在37.5℃水浴恒溫鍋中放置15 min,放置時間與對照液放置時間一致。
3.3 檢測
15 min后再加入100 μL底物搖勻,此時檢測液開始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1 cm比色皿,放入儀器比色池中,按“測量”按鈕,3 min后儀器測量完成,顯示測量結(jié)果。當樣品提取液對酶的抑制率小于50%時,樣品為合格;當≥50%時,表示蔬菜中有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在,即樣品檢測結(jié)果為陽性。
4 檢測結(jié)果的歸檔
對檢測結(jié)果為超標的樣品要重復(fù)檢測2次以上,以確保結(jié)果的可靠性。應(yīng)在檢測工作完成后將檢測結(jié)果粘貼在記錄本上,同時保存在檢測儀器內(nèi),便于存檔、備查等。
5 檢測器皿的清洗
檢測所用的比色皿,必須用洗滌液清洗,后用清水清洗干凈,再晾干。不要用洗潔精之類的清潔劑,以免影響測量,不可用堿液洗滌,也不能用硬布、毛刷刷洗。試管、燒杯、剪刀一定要干凈,操作過程中應(yīng)分開使用,以免影響檢測結(jié)果的準確性。
6 其他需注意的事項
①蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸泡。對一些葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取整株(體)浸泡的方法,減少色素的干擾。
②試劑溶解前冷凍保存的保質(zhì)期為1年;酶粉溶解后應(yīng)盡快用完,可短期冷藏保存,如1周不能用完,應(yīng)冷凍保存,反復(fù)冷凍不可超過3次,冷凍保存不超過1個月;底物和顯色劑溶解后冷藏保存,保質(zhì)期1個月,可冷凍長期保存,配制檢測試劑時請勿劇烈振蕩。
③樣品處理時勿將樣品剪得太碎。
④加入酶試劑必須定量準確,勿將液體滴在玻璃壁上,否則誤差較大。向下操作。
⑤樣品結(jié)果抑制率大于50%的需要重復(fù)檢驗2次,才能判斷為陽性。
參考文獻
[1] 秦桂云.蔬菜農(nóng)藥殘留檢測的方法及原理[EB/OL].(2013-05-17)[2014-02-11].http://www.agrichem.cn/news/2013/3/25/201332514442058255.shtml.
[2] 普春,歐陽繼敏.蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法介紹及注意事項[J].云南農(nóng)業(yè)科技,2009(S2):97-98.