兩種相似度表征參芪王漿養血口服液指紋圖譜質量研究

祖 雙，劉黎峰，梁 潔，劉明穎，肖 雪2,,4，羅國安

(1.吉林敖東延邊藥業股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學院，廣東 廣州 510006；3.清華大學 分析中心，北京 100084；4. 中山大學 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

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兩種相似度表征參芪王漿養血口服液指紋圖譜質量研究

祖 雙1，劉黎峰1，梁 潔2*，劉明穎3，肖 雪2,3,4，羅國安3

(1.吉林敖東延邊藥業股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學院，廣東 廣州 510006；3.清華大學 分析中心，北京 100084；4. 中山大學 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

目的：用兩種相似度評價方法進行參芪王漿養血口服液指紋圖譜相似度的評價，為其質量控制提供依據。方法：采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)和程度相似度對參芪王漿養血口服液指紋圖譜進行相似度評價。結果：兩種方法對參芪王漿養血口服液指紋圖譜相似度均有有效表征。結論：程度相似度可作為參芪王漿養血口服液的質量控制方法。

參芪王漿養血口服液；指紋圖譜；相似度

參芪王漿養血口服液是由人參、黃芪、當歸、蜂王漿等原料經現代生產工藝制成，主要功能為補益氣血、養心安神，可用于氣血兩虛證，癥見神倦乏力、食欲不振、失眠等[1]。在研究過程中，我們采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)對其進行了相似度評價研究[2-4]，發現其表征參芪王漿養血口服液的整體質量存在些許不足。因此本試驗引入了程度相似度技術[5-7]對參芪王漿養血口服液指紋圖譜進行相似度評價研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀(包括G13158 DAD檢測器、G1312A低壓四元泵、在線脫氣機、自動進樣器、柱溫箱)(Agilent科技有限公司，美國)，KQ-500E超聲波清洗器(昆山超聲設備有限公司)，Mill-Q Synthesis超純水純化系統(美國Millipore公司)，Excellence XP205型十萬分之一分析天平(Mettler Toledo公司)，SL300N型電子天平(上海精密科學儀器有限公司)等。

1.2 材料

乙腈(色譜純、Fisher公司)，甲酸(分析純，北京現代東方精細化工有限公司)，超純水自制。參芪王漿養血口服液由吉林敖東延邊藥業股份有限公司提供。

1.3 軟件

中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)(國家藥典委員會)，程度相似度評價軟件V1.0(清華大學羅國安教授研究團隊自主研發)

2 方法與結果

2.1 色譜條件[8]

Agilent Zorbax-SB C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：采用梯度洗脫，A相為水，B相為乙腈(0～20min，B：1.0～8.0%；20～35min，B：8.0～40%；35～60min，B：40～95%；60～65min，B：95%～95%)；流速：1.0mL/min，DAD檢測器，柱溫35 ℃，檢測波長為203nm，進樣量為5μL。所得到的指紋圖譜見圖1。

2.2 中藥色譜指紋圖譜相似度評價

采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)進行相似度評價，選取13個共有峰為參照，將9個批次指紋圖譜導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)，時間窗設置為0.1min，以S1為基準，設為中位數，自動匹配，生成對照圖譜，并采用夾角余弦法計算相似度，結果見表1。

圖1 參芪王漿養血口服液203nm檢測結果

2.3 程度相似度評價

程度相似度軟件V1.0是清華大學羅國安教授研究團隊自主研發的一款用于評價指紋圖譜量化相似度軟件，其主要原理是通過比較各色譜峰峰面積的差異，來表征指紋圖譜的相似度。本試驗選取“2.2”項下13個指標峰的峰面積作為原始參數，同時求算13個指標峰的平均值，導入程度相似度軟件，以平均值為目標指標，計算各個指標峰的程度相似度，并計算13個指標峰的平均程度相似度作為該指紋圖譜的程度相似度。結果見表1。

表1 9批成品相似度評價結果

3 討論

按照國家藥典委員會關于“中藥注射液指紋圖譜研究的技術要求(暫行)通知”，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A版)計算的相似度均≥0.85，其結果表明，參芪王漿養血口服液指紋圖譜方法可操作性強、重復性好，也說明了在此指紋圖譜條件下參芪王漿養血口服液中含有的物質基礎變化不大。此相似度評價技術可以作為參芪王漿養血口服液指紋圖譜的初步評價基礎。

采用程度相似度軟件得到的相似度數據參差不齊，整體數據偏低，同時程度相似度計算的是各個指標峰的峰面積，其代表了該指標峰所表征的物質含量，因此，程度相似度的數據一定程度上表明了參芪王漿養血口服液中主要指標成分的含量差異較大。

目前諸多中藥(原藥材、提取物、中間體、成品等)采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統進行質量評價，均取得了較好的研究結果[9]。我們建議在保證采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統得到良好的質量保證之后，開展對中藥的主要成分進行含量穩定性的控制研究，而采用程度相似度技術則是一個較好的選擇。

[1] 金光日，洪海. 參芪王漿養血口服液中10-羥基-2-癸烯酸(10-HAD)的含量測定[J].長春中醫藥大學學報，2007，23(5)：32-33.

[2] 羅國安，梁瓊麟，王義明.中藥指紋圖譜-質量控制與新藥研發[M].北京：化學工業出版社，2009.

[3] 羅國安，王義明.中藥指紋圖譜的分類和發展[J]. 中國新藥雜志，2002(11):46-51.

[4] 肖雪，羅國安，王義明，等.中藥板藍根高效液相色譜法指紋圖譜研究[J].江西中醫學院學報，2010，22(3)：67-69.

[5] 段和祥，劉永鎖，羅國安，等.程度相似度結合聚類分析在金銀花藥材質量評價中的應用[J]. 中成藥，2007，29(3)：318-321.

[6] 劉永鎖，孟慶華，蔣淑敏，等. 相似系統理論用于中藥色譜指紋圖譜的相似度評價[J]. 色譜，2005，23(2)：158-163.

[7] 聶磊，曹進，羅國安，等.中藥指紋圖譜相似度評價方法的比較[J].中成藥，2005，27(3)：249-252.

[8] 祖雙，梁潔，劉明穎，等.參芪王漿養血口服液高效液相指紋圖譜研究[J].亞太傳統醫藥，2014,11(2)：19-21.

[9] 曹進，饒毅，沈群，等. 中藥指紋圖譜及其建立原則[J].中藥新藥與臨床藥理，2001，12(3)：200-203.

(責任編輯：宋勇剛)

The Quality Study of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root by Two Kinds of Similarity Methods

Zu Shuang1, Liu Lifeng1, Liang Jie2*, Liu Mingying3, Xiao Xue2, 3, 4, Luo Guoan3

(1.Jilin Aodong Medicine Industry Group Co., Ltd., Yanbian 133700, China; 2.Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 3.Analysis Center, Tsinghua Unviersity, Beijing 100084, China; 4.Nansha Research Institute, Sun Yat-sen University, Guangzhou 511458, China)

Objective:To evaluate the quality of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root (NOLRJGA) by two kinds of similarity methods.Methods:The chromatographic fingerprint similarity evaluation system (2004 A) and the extent similarity were used to evaluate the fingerprints of NOLRJGA.Results: The two kinds of similarity methods were useful to evaluate the quality of NOLRJGA. Conclusion:The extent similarity could be an effective method to control the quality of NOLRJGA.

Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root, Fingerprint, Similarity

2014-09-27

祖雙(1970-)，男，吉林敖東延邊藥業股份有限公司主管藥師，研究方向為中藥質量控制。

梁潔(1969-)，女，廣東藥學院副教授，研究方向為食品質量安全及中藥質量控制。

R284

A

1673-2197(2015)03-0030-02

10.11954/ytctyy.201503012