通脈復方中川芎揮發油提取及包合工藝研究

吳純偉，關琴笑，路 麗，趙 路，容悅瑩，梁生旺，王淑美

(廣東藥學院 中藥學院，廣東 廣州 510006)

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通脈復方中川芎揮發油提取及包合工藝研究

吳純偉，關琴笑，路 麗，趙 路，容悅瑩，梁生旺，王淑美*

(廣東藥學院 中藥學院，廣東 廣州 510006)

目的：對通脈復方中川芎揮發油的提取及β-環糊精包合的最佳工藝進行研究。方法：采用正交設計試驗，以揮發油的提取率為指標，考察萃取壓力、萃取溫度、萃取時間的最佳條件；以揮發油的包合率為指標，考察β-環糊精與揮發油比例、包合時間及包合溫度等因素的最佳條件。結果：川芎揮發油最佳提取工藝為萃取壓力28MPa，萃取溫度45℃，萃取時間40min。川芎揮發油最佳包合工藝為川芎揮發油與β-CD的比例為1∶8 (mL∶g)，在包合溫度為50℃的條件下包合1h。結論：優選的揮發油提取及包合工藝穩定可行。

通脈；揮發油；提取；包合

復方通脈由川芎、丹參、葛根三味藥組成，具有活血通脈的功效，用于治療缺血性心腦血管疾病，如腦缺血、腦血栓、動脈硬化、心絞痛、冠心病等。臨床多用于冠心病的治療[1]。方中川芎的揮發油，為方劑中活血行氣、祛風止痛的有效成分[2]。由于揮發油在生產和儲存過程中易氧化、易揮發，從而降低療效。因此，本實驗對揮發油提取工藝及β-CD包合工藝進行優選，以保證制劑的質量及其臨床療效。

1 儀器和試藥

LC-20AT高效液相色譜儀、LCSOLUTION(VER.1.21)工作站；CTO-20A柱溫箱(日本島津)；FY221-50-60型超臨界萃取儀(南通市飛宇石油科技開發有限公司)；BSZZ4S型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)；DK-S26型電熱恒溫水浴鍋(上海精宏試驗設備有限公司)。

川芎藥材購自于廣州致信藥材有限公司，經廣東藥學院中藥學院劉基柱教授鑒定為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖。甲醇、乙腈(瑞典歐森巴克環境化學公司，色譜純)，其他試劑為分析純。

2 川芎揮發油提取工藝研究

2.1 川芎提取正交試驗方法設計[3-4]

本實驗以超臨界萃取法提取揮發油，以萃取壓力(A)、萃取溫度(B)、萃取時間(C)作為考察因素，各設計3個水平，以揮發油提取率為指標，采用正交設計方法，按照L9(34)正交表設計試驗，優選揮發油的提取工藝。因素水平設計見表1，正交試驗結果、方差分析見表2、表3。

表1 提取工藝因素水平

表2 提取工藝正交試驗結果

表3 提取工藝方差分析結果

注：F0.05(2,2)=19.00，*P<0.05；F0.01(2,2)=99.00，**P<0.01。

以揮發油體積為試驗指標，對揮發油提取結果進行直觀分析，比較3個因素的極差，Rc>Rb>Ra，故影響因素的大小順序為C>B>A。由上述方差分析結果可知，因素萃取溫度(B)、萃取時間(C)各水平間有顯著性差異，再結合揮發油各水平含量及實際生產，優選最佳揮發油提取工藝為A2B2C2，即：萃取壓力為28MPa，萃取溫度為45℃，萃取時間為40min。

2.2 驗證試驗

按上述最佳提取工藝進行3次試驗，提取揮發油體積分別為1.18mL，1.17mL，1.20mL。結果表明，該提取工藝穩定可行。

3 揮發油β-環糊精包合研究

3.1 川芎揮發油包合工藝正交試驗方法設計[5-6]

通過預實驗，采用飽和水溶液法，以β-環糊精∶揮發油(g∶mL)，包合時間(min)，包合溫度為因素(℃)為考察因素，每個因素確定3個水平，以包合物得率為評價指標，采用L9(34)正交表，優選出揮發油的包合工藝。因素水平見表4，正交試驗結果、方差分析分別見表5、表6。

表4 包合工藝因素水平

表5 包合工藝正交試驗結果

表6 包合工藝方差分析結果

注：F0.05(2，2)=19.00，*P<0.05;F0.01(2，2)=99.00,**P<0.010。

直觀分析表明，三個因素對評價指標的影響程度由大到小排列順序為：A>C>B，即揮發油與β-CD的比例對指標的影響最大，包合時間影響最小。由方差分析結果可知，因素揮發油與β-CD的比例(A)、包合溫度(C)各水平間有顯著性差異。因此最終確定最佳包合工藝條件為A3B2C2，即：川芎揮發油與β-CD的比例為1∶8 (mL∶g)，包合溫度為50 ℃，包合時間為1h。

3.2 驗證試驗

按上述最佳包合工藝條件進行3次試驗，揮發油包合得率分別為74.18%、75.44%、73.97%。結果表明，該包合工藝穩定可行。

4 討論

本研究運用正交試驗對揮發油提取和包合工藝進行研究，確定揮發油最佳提取工藝為萃取壓力28MPa，萃取溫度45℃，萃取時間40min；揮發油最佳包合工藝為川芎揮發油與β-CD的比例為1∶8(mL∶g)，在包合溫度為50℃的條件下包合1h。有文獻報道，正交試驗結果得50℃攪拌揮發油的得率最高，這是因為β-CD在50℃的溶解度高于室溫，既可使揮發油能更多的包合，同時又可避免高溫攪拌而引起揮發油逸散[7]。

川芎中的揮發油為復方通脈中的主要有效成分，易揮發且遇熱、光不穩定，無法保證制劑的質量和臨床療效。經β-CD包合后，液態變成固態，掩蓋揮發油的不良氣味，質量穩定，有利于生產保存以及制劑的療效[8]。

[1] 肖純,孫明,周宏研.通脈顆粒治療冠心病心絞痛的臨床研究[J].中國現代醫學雜志, 2004,14(9):57-61.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：化學工業出版社，2010：70.

[3] 郁威,張鋒,蘇克曼.超臨界CO2萃取當歸和川芎的研究[J].中成藥,2002, 6(24): 411-415.

[4] 張虹,柳正良,王洪泉.超臨界萃取法提取川芎中有效成分的研究[J].中草藥, 2001, 32 (12): 1077-1079.

[5] 張海英,李偉.正交法優化異株百里香揮發油提取及β-環糊精包合工藝研究[J].中藥材, 2010,33(12):1942-1946.

[6] 朱冉,郭玫,魏舒暢,等.當歸揮發油β-環糊精包合物的制備工藝及定性分析[J].中藥材, 2012,35(8):1322-1326.

[7] 靳怡然,杜英峰,袁志芳,等.戒毒膠囊制備工藝中揮發油提取及其β-環糊精包合工藝的研究[J].中成藥,2008,30(11)：1710-1713.

[8] 賈曉斌,高成林,陳彥,等.小兒腹瀉暖臍散中揮發油的提取及其β-環糊精包合物的制備研究[J].中成藥,2009,31(4)：632-633.

(責任編輯：魏 曉)

Study on the Technological Process of the Extraction and the β-Cyclodextrin Inclusion of the Volatile Oil in Tongmai

Wu Chunwei，Guan Qinxiao，Lu Li，Zhao Lu，Rong Yueying，Liang Shengwang，Wang Shumei*

(Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China)

Objective:To study on the technological process of the extraction and the β-Cyclodextrin inclusion of the volatile oil in Tongmai.Methods:With the index of the yield of volatile oils, the extraction technology of volatile oils from Tongmai was optimized by orthogonal test with factors of extraction pressure, temperature and time. With the index of inclusion rate, inclusion process of β-CD was optimized by orthogonal test with factors of β-CD to volatile oils, inclusion temperature and mixing time. Results:The optimized extract process of volatile oil was that the extraction pressure is 28 Mpa at 45℃ for 40min. The β-CD inclusion processl was that the proportion of β-CD and volatile oil was 8∶1 (g∶mL) at 50 ℃ for mixing 1 h.Conclusion:This method established for the extraction of volatile oil and β-cyclodextrin inclusion was feasible and steady.

Tongmai; Volatile oil; Extraction; Inclusion

2014-09-02

國家自然科學基金項目(81274060)；廣東省中醫藥局基金項目(20112152)

吳純偉(1990-)，男，廣東藥學院碩士研究生，研究方向為中藥質量控制。

王淑美(1966-)，女，廣東藥學院教授，研究方向為中藥質量控制。E-mail：shmwang@sina.com

R283

A

1673-2197(2015)03-0022-02

10.11954/ytctyy.201503009