三七粉對小鼠免疫調節功能的影響

劉成明，王 麗，寧俞媛

(昆明圣火藥業集團有限公司，云南 昆明 650217)

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三七粉對小鼠免疫調節功能的影響

劉成明，王 麗，寧俞媛

(昆明圣火藥業集團有限公司，云南 昆明 650217)

目的：考察三七粉對機體免疫功能的作用。方法：用碳粒廓清實驗法、2,4-二硝基氯苯致小鼠遲發型超敏反應和雞紅細胞致小鼠血清溶血素生成法，觀察三七粉對小鼠免疫功能的影響。結果：三七粉1.34g/kg劑量可使吞噬指數K值及吞噬系數a明顯增加(P<0.05)；三七粉0.34、0.67、1.34g/kg劑量能明顯增強小鼠的遲發型超敏反應(P<0.01)且能明顯提高小鼠的血清溶血素生成水平(P<0.05)。結論：三七粉具有增強免疫調節功能的作用。

三七粉；免疫功能；碳粒廓清；遲發型超敏；血清溶血素

三七粉具有多種功能，如免疫調節、抗衰老、改善記憶、抗疲勞等作用。三七粉可雙向調節人體機能，增強機體的應激能力和提高機體的免疫能力，是療補功能兼備的藥食同源植物藥。本試驗擬從小鼠非特異性免疫、體液免疫和細胞免疫等方面觀察三七粉對小鼠免疫功能的影響，旨在探討三七粉對免疫功能的作用，為其進一步開發研究提供藥效學實驗依據。

1 材料與方法

1.1 藥物

三七粉，昆明圣火藥業(集團)有限公司, 批號20110524；貞芪扶正顆粒，甘肅扶正藥業股份有限公司，批號110505；醋酸潑尼松片，5mg/片，浙江仙居制藥有限公司，批號110437。

1.2 動物

昆明種小鼠，18～22g，昆明醫學院實驗動物中心，動物合格證號：SCXK(滇)2005-0008。

1.3 試劑

一得閣墨汁，北京一得閣墨業有限責任公司；2,4-二硝基氯苯(DNCB)，分析純，天津市軒昂科工貿有限公司，批號20110525；丙酮，分析純，重慶川東化工(集團)有限公司化學試劑廠；無水碳酸鈉，分析純，上海虹光化工廠。

1.4 儀器

TU-1901雙光束紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限責任公司；L600型離心機，湖南湘儀離心機儀器有限公司；YLS-Q4耳腫打耳器，安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司。

1.5 方法

1.5.1 小鼠碳粒廓清實驗[1]雄性小鼠60只，隨機分為6組，分組情況見表1。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(每日灌胃4h后，再次灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。末次給藥后30min，鼠尾靜脈注射20%墨汁0.1mL/10g，于注射后2min(t1)和12min(t2)時，分別于眼眶靜脈取血20μL置于4mL 0.1%NaCO3溶液中混勻，用紫外可見分光光度計在680nm波長處測定光密度(OD)。按下式計算吞噬指數K和吞噬系數a。

1.5.2 小鼠遲發型超敏反應實驗[2]18～22g雄性小鼠60只，隨機分為6組，分組情況見表2。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(給藥4h后，再灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。各組動物第21天給藥后1h腹部均勻涂抹1% DNCB丙酮油混合液100μL/只，于第2天加強1次。給藥第29天，各鼠右耳兩面均勻涂抹1% DNCB混合液100μL /只，左耳涂等量丙酮油混合液。24h后處死動物，剪下左右兩耳，用打耳器于同部位切下耳片稱重，計算左右耳片重量之差。

1.5.3 小鼠血清溶血素生成實驗[3]雄性小鼠60只，隨機分為6組，分組情況見表2。各組動物每日按20mL/kg灌胃給藥1次，連續30天，對照組灌服純水，醋酸潑尼松組和各給藥組在第21、23、25、27、29天灌胃醋酸潑尼松(給藥4h后，再灌胃醋酸潑尼松10mg/kg)。各組動物第23天給藥后1h，腹腔注射5%雞紅細胞生理鹽水懸液0.2mL進行免疫，末次給藥后30min，眼眶靜脈取血，4 000rpm離心10min，血清用生理鹽水稀釋100倍。將血清稀釋液2mL、5%雞紅細胞懸液1mL、10%補體1mL依次加入試管中，混合后37℃恒溫30min，置0～4℃冰箱終止反應，離心，取上清液用紫外可見分光光度計于540nm波長處測定OD值作為小鼠血清溶血素的指標。

2 結果

2.1 三七粉對小鼠碳粒廓清的影響

由表1可見，與空白對照組比較，醋酸潑尼松能明顯抑制小鼠的網狀內皮系統吞噬功能，吞噬指數K值明顯減小(P<0.01)，吞噬系數a值明顯減小(P<0.05)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉1.34g/kg劑量可使吞噬指數K或吞噬系數a明顯增加(P<0.05)。

2.2 三七粉對小鼠遲發超敏反應的影響

由表2可見，醋酸潑尼松能明顯抑制小鼠的耳腫脹度(P<0.01)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉0.34、0.67、1.34 g/kg劑量對免疫功能低下小鼠的遲發性超敏反應均有明顯增強作用(P<0.01)。

表1 三七粉對小鼠網狀內皮系統吞噬功能的影響 (±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與醋酸潑尼松組比較，*P<0.05。

2.3 三七粉對小鼠血清溶血素生成的影響

由表2可見，醋酸潑尼松能明顯降低小鼠的血清溶血素水平(P<0.01)，說明造模成功；與模型組比較，三七粉0.34、0.67、1.34g/kg劑量對免疫功能低下小鼠的血清溶血素生成均有提高作用(P<0.05)。

表2 三七粉對小鼠遲發性超敏反應和血清溶血素生成的影響 (±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與醋酸潑尼松組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3 討論

人體自身的免疫防御機制用于人體識別和消滅外來侵入的任何異物(病毒、細菌等)，處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細胞以及識別和處理體內突變細胞和病毒感染細胞。免疫力低下最直接的表現即容易生病，長此以往會導致身體和智力發育不良，還易誘發重大疾病。因此，提高機體免疫力，開發相關藥物顯得尤為重要。

本研究表明，三七粉可明顯增強免疫功能低下小鼠的網狀內皮系統吞噬功能，明顯增強免疫功能低下小鼠的遲發性超敏反應，顯著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素的生成。表明三七粉具有明顯增強機體免疫功能的作用，為其進一步開發研究提供了實驗基礎。

[1] 覃筱燕,黎榮昌,云妙英,等.藏藥旺拉水煎劑對小鼠免疫功能的調節作用[J].山東中醫雜志，2007，26(12)：842.

[2] 肖波，陳康桂,勞光生.貞芪扶正顆粒聯合金水寶膠囊對免疫低下小鼠免疫功能的影響[J].中國中醫藥科技，2010，17(4)：308-309.

[3] 覃筱燕，黎榮昌,唐麗,等.紅藥提取物對小鼠免疫功能的調節作用[J].遼寧中醫雜志，2008，35(6)：932

(責任編輯：魏 曉)

2015-07-22

劉成明(1981-)，女，昆明圣火藥業集團有限公司工程師，研究方向為中藥藥理與應用。

R285.5

A

1673-2197(2015)23-0007-02

10.11954/ytctyy.201523003