當歸配方顆粒與當歸飲片質量對比分析

蹇洪軍

(遵義市第一人民醫院，貴州 遵義 563000)

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當歸配方顆粒與當歸飲片質量對比分析

蹇洪軍

(遵義市第一人民醫院，貴州 遵義 563000)

目的：對比當歸配方顆粒與飲片的質量。方法：應用高效液相色譜法，對當歸配方顆粒與當歸飲片中阿魏酸的含量等進行評估，對比二者質量。結果：在0.033～0.165μg范圍內，阿魏酸線性關系良好；阿魏酸峰面積RSD為1.05%，精密度良好；阿魏酸RSD=0.92%，重復性良好；對峰面積積分值測定，RSD=1.17%，表明穩定性良好。當歸飲片含水量為1.6mL，百分比為6.3%；當歸配方顆粒含水量為0.6mL，百分比為2.90%。當歸配方中阿魏酸含量為0.057%，當歸飲片為0.050%。結論：當歸配方顆粒中測定阿魏酸含量的方法可靠、簡單、有較強的重復性，在當歸配方顆粒質量控制中，可以作為有效的方法參與評定，有重要的實施價值。

當歸；配方顆粒；飲片；質量分析

當歸以潤腸通便、調經止痛、補血活血為主要功效，性溫，味辛、甘，歸脾、心、肝經，在臨床各科廣泛應用。當歸始載《神農本草經》，是傘形科植物當歸的干燥根[1]。當歸配方顆粒與原飲片在功效、歸經、性味上基本一致，由當歸單味藥加工制成，應用于中醫臨床配方之中，一方面可以滿足臨床隨證加減、辨證論治的需要；另一方面攜帶方便、免煎易服、安全衛生、作用迅速，應用環境較為理想[2]。當歸主要含酚類、揮發油、生物堿、有機酸等多種成分，分布于有機酸中的阿魏酸，因其可溶于醋酸乙脂、醇、水等溶劑，屬于水溶性有效成分，在制劑中易被提取，但也易被破壞。阿魏酸是國際上近年來公認的防癌物質，屬于天然抗氧化劑，與藁本內酯一樣，為當歸發揮藥理作用的主要物質基礎，阿魏酸含量的測定，可以作為當歸質量的評價指標。本次研究針對當歸配方顆粒與當歸飲片中阿魏酸含量的測定，對當歸配方顆粒的質量進行考察，現將相關內容總結如下。

1 試驗材料

高效液相色譜儀、電熱風干燥器、氣流烘干器、超聲清洗機、分析天平、萬能粉碎機。阿魏酸對照品，純度>98%；當歸飲片：傘形科植物當歸干燥根；當歸配方顆粒；無水乙醇，水，乙腈，甲醇，磷酸。

2 方法與結果

2.1 阿魏酸含量測定

2.1.1 色譜條件 流速：1.0mL/min；柱溫：28℃；檢測波長：316nm；色譜柱：KromasiL C18柱；流動相：選用乙腈(A)-0.05%磷酸水(B)洗脫(梯度)系統。

2.1.2 對照品溶液制備 精密稱取阿魏酸對照品0.275 0g，置于50mL棕色容量瓶中，70%甲醇定容。用移液管吸取3mL，置于50mL棕色容量瓶中，用70%甲醇定容，即得對照品溶液0.33mg/mL。

2.1.3 供試品溶液制備 精確稱取當歸配方顆粒、飲片粉末各0.5g，置于容量瓶中，精密加入70%甲醇20mL，密塞，超聲處理30min，過濾定容，即得供試品溶液，在低溫狀態下貯存，上樣前用微孔濾膜過濾。

2.1.4 線性關系考察 精密吸取上述對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，分別置于10mL容量瓶中，用70%甲醇定容。用0.45μm微孔濾膜過濾，進樣10μL，記錄色譜圖，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標。結果表明，阿魏酸在0.033～0.165μg范圍內與峰面積呈良好線性關系。

2.1.5 精密度試驗 精密吸取對照品溶液10μL，注入液相色譜儀中，連續進樣6次，結果阿魏酸峰面積RSD=1.05%，表明儀器精密度良好。

2.1.6 重復性試驗 分別制備6份供試品溶液，取10μL測定，阿魏酸峰面積RSD=0.92%，表明該方法重復性良好。

2.1.7 穩定性試驗 提取供試品溶液，在色譜條件下取樣測定，測定結果如圖1所示。峰面積積分值測定，RSD=1.17%，表明穩定性良好。

圖1 當歸配方顆粒和當歸飲片中阿魏酸HPLC圖譜

2.2 水分測定

依據《中華人民共和國藥典》(2010年版)測定。對當歸飲片粉末和配方顆粒精密測定。于圓底燒瓶中放置，加入甲苯200mL，在電熱套中放置圓底燒瓶，緩慢加熱，當甲苯沸騰時，對溫度進行調節，每秒餾出2滴，完全將水分餾出，不增加，用甲苯沖洗冷凝管內部，蒸餾5min，冷卻至常溫，拆卸裝置，若觀察二層管壁存在水滴情況，可用蘸有甲苯的銅絲行相關操作，對水量進行檢測。當歸飲片含水量為1.6mL，百分比為6.3%；當歸配方顆粒含水量0.6mL，百分比為2.90%。當歸配方顆粒中阿魏酸含量為0.057%，當歸飲片為0.050%。

3 討論

相關試驗中，在色譜條件方面，考察乙腈-磷酸、乙腈-水、甲醇-水不同洗脫系統梯度具體洗脫情況。同一樣品用乙腈-水梯度和甲醇-水梯度洗脫系統分析，結果甲醇-水梯度色譜峰寬，洗脫基線有較重漂移，出峰數目少，峰形不好，乙腈-水梯度洗脫有更好系統。用乙腈-0.05%磷酸梯度洗脫系統與乙腈-水磷酸梯度洗脫系統分析同一樣品，乙腈-0.05%磷酸梯度洗脫有較多吸收峰數目，較好峰形，較乙腈-水梯度洗脫系統更占優勢，故應用乙腈-0.05%磷酸梯度予以洗脫。對供試品溶液進行選取，結果顯示254、270nm處有倒峰，峰形較好為316、322、280nm處，峰目最多且吸收最大為316nm處，各峰均有較高的響應值，具穩定基線，故選用。本次應用的HPLC法與《中華人民共和國藥典》不同，藥典應用相關乙腈-0.085%磷酸梯度完成洗脫，其峰形、分離度、色譜干擾峰與本文方法不同[3]。

本次研究選取不同濃度和種類的溶劑、提取時間進行研究，對當歸配方顆粒中的阿魏酸進行提取，結果效果較好的為70%甲醇超聲30min，有較高提取率。此法可用于對當歸中阿魏酸的有效提取，且提取時間短。依據方法學考察結果，此種方法穩定性好、精密度高，線性良好，符合重復性規定，可對當歸配方顆粒中含阿魏酸量的測定方法提供科學、有效的控制質量依據[4-5]。

當歸配方顆粒含量的各項指標，與藥典中當歸指標要求符合，檢測阿魏酸含量，較藥典規定的0.05%高。應用相同方法，對當歸飲片中阿魏酸的含量進行測定，含量較當歸配方顆粒低，提示從化學成分對當歸配方顆粒分析，較當歸飲片更占優勢。綜上所述，運用HPLC法測定當歸配方顆粒中阿魏酸含量靈敏可靠、精密度高、重復性好，可以有效控制當歸配方顆粒的質量；當歸配方顆粒中阿魏酸含量比當歸飲片高，質量較當歸飲片穩定，值得臨床推廣應用。

[1] 王婕，趙建邦，宋平順.30批當歸中阿魏酸、藁本內酯含量測定[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17(16)：70-72.

[2] 劉偉，王洋.HPLC法測定當歸片中阿魏酸的含量[J].黑龍江醫藥，2011，24(1)：68-71.

[3] 魯建武，宋金春，馬俊玲，等.當歸芍藥散提取液中芍藥苷和阿魏酸在大鼠體內的血濃度測定[J].中國藥師，2010，13(11)：1575-1580.

[4] 馮學花，梁肖蕾.當歸化學成分與藥理作用的研究進展[J].廣州化工，2012，40(22)：16-18.

[5] 庹芹，雷震，黃良永.當歸及其配方顆粒中阿魏酸的含量比較[J].中國藥師，2013，16(10)：1532-1535.

(責任編輯：魏 曉)

2014-12-04

蹇洪軍(1969-)，男，貴州省遵義市第一人民醫院主管中藥師，研究方向為中藥炮制及鑒定。

R283.6

A

1673-2197(2015)07-0036-02

10.11954/ytctyy.201507016