消痔靈注射治療兔直腸黏膜內(nèi)脫垂實(shí)驗(yàn)研究

柯敏輝，葉 玲，陳立武，魏 霖，鄭鳴霄，萬(wàn) 丹

(福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院，福建 福州 350003)

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消痔靈注射治療兔直腸黏膜內(nèi)脫垂實(shí)驗(yàn)研究

柯敏輝，葉 玲*，陳立武，魏 霖，鄭鳴霄，萬(wàn) 丹

(福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院，福建 福州 350003)

目的：觀察消痔靈注射治療兔直腸黏膜內(nèi)脫垂(IRP)的療效。方法：將16只兔按直腸黏膜內(nèi)脫垂兔造模方案造模，造模后隨機(jī)分為兩組各8只。第1組為IRP組，肛門鏡下觀察后解剖取兔直腸進(jìn)行病理分析；第2組為消痔靈注射組，在注射后第14天肛門鏡下觀察后解剖取兔直腸進(jìn)行病理分析。結(jié)果：IRP組兔肛門鏡下觀察見直腸黏膜遮擋肛鏡視野范圍均在3/4以上，直腸顯微鏡下見腺體組織增生，血管擴(kuò)張充血，間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)聚集，間質(zhì)水腫、疏松；消痔靈注射組在注射后第14天肛門鏡下觀察見直腸黏膜遮擋肛鏡視野范圍均在1/6以下，直腸顯微鏡下見黏膜下層呈慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維組織增生，黏膜層與肌層排列較IRP兔直腸緊密。結(jié)論：消痔靈注射治療兔IRP效果肯定。

直腸黏膜內(nèi)脫垂；消痔靈；兔；病理

直腸黏膜內(nèi)脫垂(Internal Rectal Prolapse，IRP)指排便時(shí)近心側(cè)直腸黏膜全周或部分折入遠(yuǎn)心側(cè)直腸腔或肛管內(nèi)而不出肛門，是出口梗阻型便秘中常見的類型之一[1]。中醫(yī)認(rèn)為IRP屬“脫肛”范疇，治療以消痔靈注射為主[2-3]。在前期兔IRP動(dòng)物模型[4]建立的基礎(chǔ)上，本研究通過(guò)肛門鏡下觀察與直腸HE染色后顯微鏡下觀察研究評(píng)價(jià)消痔靈注射治療兔IRP的療效。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

16只健康新西蘭兔，1月齡，體重0.7～0.8kg，雌雄各半，分別編號(hào)。由上海松聯(lián)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，許可證號(hào)：SCXK(滬)2012-0011。

1.2 藥品

生大黃液、番瀉葉液、無(wú)水酒精等由福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院提供；消痔靈由吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z22026175。實(shí)驗(yàn)中1∶1消痔靈注射液按消痔靈10mL與0.5%利多卡因10mL配置。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物造模 按照前期的IRP兔造模方案[4]，采用中藥生大黃液和番瀉葉液灌胃、站立與無(wú)水酒精肛周注射三種方法聯(lián)合造模，時(shí)間為2個(gè)月。

1.2.2 模型標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)兔的生物學(xué)特性，參考2012年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)制定的直腸內(nèi)脫垂診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]和武忠弼等[6]在《中華外科病理學(xué)》中描述的直腸脫垂病理征象，確定IRP兔模型診斷標(biāo)準(zhǔn)如下。

①肛門鏡下見松弛的直腸黏膜遮擋肛鏡視野范圍在3/4以上；②排便時(shí)兔直腸黏膜未脫出肛外； ③直腸HE染色鏡下見：黏膜層腺體增生，黏膜層與肌層血管擴(kuò)張，黏膜層與黏膜下層炎細(xì)胞浸潤(rùn)聚集，黏膜下層間質(zhì)水腫、疏松。

1.2.3 動(dòng)物分組 16只兔IRP造模后，按隨機(jī)數(shù)字表分成兩組，每組各8只。第1組為IRP組，肛門鏡下觀察后解剖取兔直腸進(jìn)行病理分析；第2組為消痔靈注射組，運(yùn)用1∶1消痔靈進(jìn)行注射治療，在注射后第14天肛門鏡下觀察，之后解剖取兔直腸進(jìn)行病理觀察。

1.2.4 消痔靈注射術(shù) 術(shù)前常規(guī)肛周備皮。兔水合氯醛耳緣靜脈麻醉后，固定四肢取仰臥位，常規(guī)碘伏消毒肛周及直腸黏膜后鋪無(wú)菌洞巾，緩慢納入周圍涂抹凡士林的肛門鏡(兩葉內(nèi)窺鏡)，暴露兔直腸黏膜，用2.5mL注射器抽取1∶1消痔靈注射液，于不同點(diǎn)位的脫垂黏膜處，沿平行于肛管直腸方向，以5號(hào)長(zhǎng)針頭于脫垂隆起中點(diǎn)位置進(jìn)針(黏膜下層處)，回抽無(wú)血液后，注入消痔靈至黏膜呈蒼白充盈為度，每點(diǎn)注射量約0.2～0.5mL，注射總量約0.6～1.5mL，注射完畢棉簽納入肛內(nèi)按摩，使藥液均勻分布充分吸收。術(shù)畢，消毒肛周及直腸黏膜，將兔送回兔籠(見圖1)。

圖1 注射前后模型圖

1.3 觀測(cè)內(nèi)容

1.3.1 肛門鏡下觀察 觀察直腸黏膜遮擋肛鏡的視野范圍。

1.3.2 HE染色后顯微鏡下觀察 將兔解剖取出直腸，取距肛緣1.5cm的直腸組織固定于4%多聚甲醛緩沖液中。常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色行顯微鏡下觀察。主要觀察內(nèi)容：黏膜層腺體與血管情況，黏膜下層炎細(xì)胞浸潤(rùn)與水腫疏松程度。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量分析

納入兔16只，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)3只死亡及時(shí)補(bǔ)充，最終16只兔進(jìn)入結(jié)果分析無(wú)脫失值。

2.2 肛門鏡下觀察

IRP組兔肛門鏡下觀察見直腸黏膜遮擋肛鏡的視野范圍均在3/4以上，未見黏膜脫出肛外(見圖2)。消痔靈注射組兔注射前見直腸黏膜遮擋肛鏡的視野范圍均在3/4以上，未見黏膜脫出肛外；注射后第14天肛門鏡下觀察見直腸黏膜遮擋肛鏡的視野范圍均在1/6以下(見圖3)。

圖2 IRP組

圖3 消痔靈注射組

2.3 病理觀察

IRP組兔直腸顯微鏡下見直腸固有層腺體組織增生，血管擴(kuò)張充血，間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)聚集，間質(zhì)水腫、疏松(見圖4)；消痔靈注射組兔直腸顯微鏡下見黏膜下層呈慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維組織增生，黏膜層與肌層排列較IRP兔直腸緊密(見圖5)。

圖4 IRP組

圖5 消痔靈注射組

3 討論

關(guān)于IRP的發(fā)生中醫(yī)記錄較早，如明代薛己《醫(yī)案》記載：“脫肛，屬大腸氣血虛而兼濕熱，有久痢氣血俱虛而脫者，有因肺虛而脫者，有因中氣虛而脫者?！边@是將脫肛的病機(jī)歸納為虛、實(shí)兩端，虛者中氣下陷，失于固攝；實(shí)者大腸濕熱，下迫直腸肛管。西醫(yī)關(guān)于IRP發(fā)生的學(xué)說(shuō)主要有滑動(dòng)性疝學(xué)說(shuō)、腸套疊學(xué)說(shuō)、提肌功能障礙綜合征學(xué)說(shuō)等[7]，病理改變?yōu)橹蹦c下端黏膜層與肌層之間結(jié)締組織過(guò)于松弛，黏膜層下移[8]。

臨床曾運(yùn)用牛奶、酒精、生理鹽水等進(jìn)行注射治療[9-12]。Ezer SS等[13]運(yùn)用鼠進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，將硬化劑5%石炭酸杏仁油注入鼠直腸的黏膜下層，28天后解剖取直腸經(jīng)HE染色鏡下可見黏膜下層纖維化、異物炎癥反應(yīng)等征象。根據(jù)“酸可收斂、澀可固脫”的理論，中醫(yī)選用消痔靈注射治療IRP，消痔靈主要成分為五倍子和明礬，注射后主要通過(guò)無(wú)菌性炎癥引起組織纖維化，使脫出的直腸黏膜層與肌層瘢痕粘連愈合而發(fā)揮治療作用[14]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)合相關(guān)研究及前期基礎(chǔ)，選取消痔靈注射治療兔IRP，從與人直腸結(jié)構(gòu)相似的兔直腸上更深入的研究消痔靈注射療法。

在預(yù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，總結(jié)注射經(jīng)驗(yàn)如下：①因兔直腸黏膜較少呈環(huán)狀內(nèi)脫垂且直腸壁較薄，較難按臨床注射方案在固定的層面、點(diǎn)位進(jìn)行分步注射或者行黏膜下柱狀注射，只能在脫垂黏膜隆起處進(jìn)行注射；②兔肛門較小，臨床用的喇叭肛門鏡無(wú)法納入，筒狀肛門鏡暴露視野不夠，經(jīng)比較耳鼻喉科的兩葉內(nèi)窺鏡(前鼻鏡)適合用于暴露兔直腸黏膜進(jìn)行消痔靈注射。注射過(guò)程中禁忌松開內(nèi)窺鏡，造成直腸黏膜損傷；③注射后需按摩使消痔靈充分吸收，術(shù)者手指無(wú)法納入，選用棉簽代替；④兔直腸壁較薄，應(yīng)緩慢注射于直腸黏膜下層以利于藥液吸收，針尖刺入不宜深至肌層，要回抽無(wú)血且針尖無(wú)束縛感方可注藥；⑤注射后未選用抗生素治療，未發(fā)現(xiàn)兔直腸黏膜發(fā)生潰瘍，無(wú)惡寒發(fā)熱等癥狀。此外，臨床消痔靈注射，后常囑患者于術(shù)后24h后排便，但兔與人存在差異，兔排便無(wú)規(guī)律性且術(shù)后禁食易導(dǎo)致死亡，可能影響消痔靈注射研究結(jié)果。

本實(shí)驗(yàn)提示消痔靈注射后，較注射前肛門鏡下直腸黏膜遮擋的視野范圍明顯減少，能夠使松弛的直腸黏膜充分上提。相應(yīng)的病理機(jī)制可能在于直腸黏膜下層慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維組織增生后，直腸黏膜層與肌層排列較注射前緊密，故見直腸黏膜位置趨于正常。綜上所述，消痔靈注射治療兔IRP效果肯定。

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(責(zé)任編輯：魏 曉)

Curative Observation on the Rabbits of Internal Rectal Prolapse after the Xiaozhiling Injection

Ke Minhui, Ye Ling*, Chen Liwu, Wei Lin, Zheng Mingxiao, Wan dan

(The Second People’s Hospital of Fujian Province, Fuzhou 350003, China)

Objective:To observe the curative effect in the IRP rabbits after Xiaozhiling injection.Methods:16 rabbits were randomly divided into two groups after making the IRP model. There were 8 rabbits in each group. The IRP group was group 1, the rabbits were executed to pathological analysis after the anoscopic observation. The Xiaozhiling injection group was group 2. At the 14th day after injection, the rabbits were executed to pathological analysis after the anoscopic observation.Results:In the IRP group, there was over 3/4 view which was keeped out by the rectum mucosa in the anoscopic observation. We could find that there were gland hyperplasia, vasodilation congestion, interstitial inflammatory cells infiltration, interstitial edema and osteoporosis through pathological analyzing. In the Xiaozhiling injection group, there was below 1/6 view which was keeped out by the rectum mucosa in the anoscopic observation. We could find that there were chronic inflammatory cell infiltration and fibrous tissue hyperplasia in the rectum submucosa. Mucosa and muscle layer was arranged more closely than the IRP rabbit rectum.Conclusion:Xiaozhiling is effective to cure the IRP

Internal Rectal Prolapse; Xiaozhiling; Rabbits; Pathology

2015-06-23

國(guó)家自然科學(xué)基金(81173272)；福建省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2015J01402)

柯敏輝(1981-)，男，福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院主治醫(yī)師，研究方向?yàn)楦亻T直腸疾病的臨床與基礎(chǔ)研究。

葉玲(1957-)，女，福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院主任醫(yī)師，研究方向?yàn)楦亻T直腸疾病的臨床與基礎(chǔ)研究。E-mail：yeling0223@163.com

R285.5

A

1673-2197(2015)21-0007-03

10.11954/ytctyy.201521003