龔 偉
(重慶三峽醫藥高等專科學校,重慶 萬州 404020)
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三峽庫區引種百合與原產地百合品質比較
龔 偉
(重慶三峽醫藥高等專科學校,重慶 萬州 404020)
目的:為探索不同品種百合在三峽庫區種植的適宜程度。方法:以三峽庫區3種引種百合為研究對象,通過測量百合的外觀性狀以及采用紫外分光光度法檢測百合多糖和皂苷含量,對不同來源百合進行比較研究。結果:原產地和引種地百合的單體鮮重以及多糖、皂苷含量均存在差異,其中蘭州百合的單體鮮重差異最大,重量相差69g;多糖含量差異最大的也是蘭州百合,原產地為19.46%,引種地為14.58%;龍牙百合和卷丹百合上述兩項差異較小;3種百合的皂苷含量在原產地和引種地間差異范圍為0.36~0.46mg/g。結論:蘭州百合在引種地的產量和多糖含量比原產地均顯著下降,不適宜引種;龍牙百合和卷丹百合的產量以及多糖、皂苷含量在原產地和引種地間無明顯差異,適宜三峽庫區引種種植。
百合;品質比較;多糖;皂苷;引種
百合為百合科(Liliaceae)百合屬(Lilium)所有種的總稱,是一種藥食兼用的花卉。百合為《中國藥典》收載品種,用量較大。中醫認為百合性味甘寒,有養陰潤肺、清心安神之功,用于治療陰虛久咳、痰中帶血、虛煩驚悸、失眠多夢、精神恍惚等癥[1]。現代藥理研究表明百合具有抗腫瘤、抗氧化、抗疲勞、降糖和提高免疫力等作用,在食用時也有潤肺止咳、寧心安神、補中益氣的作用[2-3]。近年來,隨著人們對百合食用需求的增加,百合種植規模不斷擴大,但由于藥農引種的盲目性,使得三峽庫區百合品質參差不齊,無法形成規模效應。現有文獻資料表明,百合中的百合多糖和皂苷是對人體有益的成分,不同品種百合中多糖和皂苷含量有差別[4],但這些百合的種植區域也不同。筆者研究在相同區域內種植的不同品種百合品質是否有差異,同時與原產地百合品質進行比較,為三峽庫區引進適宜百合品種提供參考。
1.1 材料與試劑
于2013年9月份采自重慶市奉節縣引種的龍牙百合、蘭州百合以及卷丹百合,剝取鱗片,沸水微燙后烘干;分別在原產地購買上述3種百合。薯蕷皂苷元對照品(中國食品藥品檢定研究院)、葡萄糖對照品;乙醇、正丁醇、甲醇、苯酚、濃硫酸均為分析純。
1.2 主要儀器
TU-1901紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司),GZX-101-3電熱鼓風干燥箱(上海圣科儀器設備有限公司),FA1004分析天平(上海舜宇恒平科學儀器有限公司),KQ-250DA數控超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司),RE-25134旋轉蒸發儀(上海嘉鵬科技有限公司)。
2.1 百合性狀測量
將百合樣品洗凈后風干,采用五點取樣法,每種樣品選取50個[5],測量其重量和直徑。
2.2 百合皂苷樣品溶液制備[6-8]
將百合粉碎后過40目篩,粉末70℃干燥2h。精確稱量百合粉末3g,加80%乙醇50mL,超聲波提取45min,提取3次,過濾。合并濾液后回收乙醇,加適量水溶解后用水飽和正丁醇15mL萃取3次,回收正丁醇,所得浸膏用甲醇溶解,定容為50mL,精密量取1mL置于50mL容量瓶,定容后備用。
2.3 百合多糖樣品溶液制備[9-10]
將百合皂苷提取后的百合粉末中的乙醇揮干,加水40mL,超聲波提取30min,提取3次,減壓濃縮至10mL,將其移入100mL容量瓶中加水至刻度,精密量取1mL置于100mL容量瓶,定容后備用。
2.4 百合皂苷標準曲線[11]
精確稱量5mg薯蕷皂苷苷元標準品,甲醇溶解后置于50mL容量瓶中,甲醇定容。精確移取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL對照品溶液于帶塞試管中,低溫烘干溶劑后冷卻,加入0.3mL香草醛冰醋酸和0.7mL高氯酸溶液,混勻后60℃水浴加熱20min,取出冰水冷卻后加冰醋酸5mL,混勻后避光放置30min,在535nm處測其吸光度,以對照品含量X(mg/mL)為橫坐標,吸光度Y為縱坐標,繪制標準曲線,得回歸方程Y=6.371 4X+0.015 9,r=0.998 3,薯蕷皂苷在0.02~0.12mg/mL范圍內與吸光度呈良好線性關系。
2.5 百合多糖標準曲線[12]
葡萄糖對照品在105℃干燥2h至恒重,精確稱量50mg置于50mL容量瓶中,加蒸餾水定容。再精確量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL葡萄糖溶液于50mL容量瓶中,分別加蒸餾水定容。移取濃度為0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL的葡萄糖對照品溶液各2mL,分別加5%苯酚溶液1mL后搖勻,再加濃硫酸5mL搖勻,沸水保溫20min,取出冰水冷卻10min。取2mL蒸餾水為空白液同上操作。將上述溶液在490nm波長處測吸光度,以對照品含量X(mg/mL)為橫坐標,吸光度Y為縱坐標,繪制標準曲線,得回歸方程Y=12.299X+0.0418,r=0.992 5。
2.6 精密度實驗
將薯蕷皂苷和葡萄糖對照品溶液按各自顯色條件操作,測6次吸光度。薯蕷皂苷對照品結果為0.415、0.414、0.413、0.404、0.407、0.412,RSD為1.06%;葡萄糖對照品結果為0.447、0.445、0.438、0.445、0.434、0.443,RSD為1.13%。
2.7 穩定性實驗
將重慶奉節產龍牙百合皂苷和多糖樣品溶液按各自顯色條件操作,顯色后在0、20、40、60、80、100、120min測定吸光度。百合皂苷樣品結果為0.478、0.472、0.476、0.465、0.475、0.467、0.475,RSD為1.03%;百合多糖樣品結果為0.349、0.352、0.347、0.343、0.339、0.341、0.342,RSD為1.37%。結果表明百合皂苷和多糖用本方法測定在2h內穩定性良好。
2.8 重現性實驗
精確稱取同批重慶奉節產卷丹百合樣品3g各5份,配制皂苷和多糖樣品溶液,按各自顯色條件操作后測吸光度,結果顯示,百合皂苷平均含量為8.844mg/mL,RSD為1.89%;百合多糖平均含量為6.85%,RSD為2.21%。
2.9 回收率實驗
稱取重慶奉節產卷丹百合粉末樣品約2g各5份,分別加入薯蕷皂苷對照品約10mg,按百合皂苷樣品溶液制備,測吸光度,結果顯示平均回收率為101.30%,RSD為3.11%。
剩余百合粉末分別加入葡萄糖對照品約0.1g,按百合皂苷樣品溶液制備,測吸光度,結果顯示平均回收率為98.87%,RSD為2.74%。
2.10 樣品含量測定
分別稱取不同來源百合樣品各3g,分別制備百合皂苷和多糖樣品溶液,百合皂苷樣品溶液取1mL,多糖樣品溶液取2mL,按各自標準曲線方法顯色,測吸光度,按各自回歸方程計算皂苷與百合含量。
3.1 原產地與引種地百合性狀比較
將百合分瓣繁殖,種植3年后單個百合鮮重和直徑見表1。由表1可以看出,龍牙百合和卷丹百合在引種地的鮮重和直徑比原產地稍低,但沒有太大的差異,蘭州百合在引種地的鮮重和直徑明顯偏低。

表1 原產地與引種地百合產量比較
3.2 原產地與引種地百合皂苷含量比較
由表1可以看出,各種百合皂苷含量在原產地和引種地間沒有較大的差別,其中,卷丹百合在引種地的皂苷含量略高于原產地。
3.3 原產地與引種地百合多糖含量比較
從表2可以看出,龍牙百合和卷丹百合的多糖含量在原產地和引種地間沒有較大的差別,其中龍牙百合在引種地的多糖含量略高于原產地。蘭州百合引種地多糖含量明顯低于原產地。

表2 各樣品百合皂苷和多糖含量比較
從以上測定結果不難看出,龍牙百合和卷丹百合的皂苷和多糖含量在原產地和引種地間沒有顯著的差別,在鮮重和直徑上引種地產量偏低,這可能與引種地百合種植海拔高度偏低有關(部分種植地海拔只有600m),也可能是引種百合在引種地需適應當地環境,增長種植年限可提高產量;而蘭州百合在引種地多糖含量偏低,產量更是顯著降低,這可能與兩地的氣候有很大關系,蘭州屬于典型的溫帶大陸性氣候,而重慶三峽庫區屬于亞熱帶季風性濕潤氣候,蘭州百合不能適應重慶地區的氣候條件,所以在鮮重、直徑和含糖量上與原產地均有較大差異。重慶三峽庫區、江蘇宜興和湖南隆回氣候均屬于亞熱帶季風氣候,故龍牙百合和卷丹百合適應三峽庫區氣候,可引種上述兩種百合在三峽庫區種植。
本文通過對百合鮮重和主要藥用成分含量的研究,較為全面地反映了百合的品質,為其他藥材引種種植品質研究提供了一種方法。在百合多糖和皂苷的含量研究中,從一份樣品中分別獲得多糖和皂苷的樣品溶液,樣品使用量少,采用分光光度法檢測多糖和皂苷含量的方法簡單、經濟、重現性高,可作為百合多糖和皂苷含量的檢測方法之一。
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(責任編輯:宋勇剛)
2015-04-01
重慶市科技攻關計劃項目(2011AC5062);重慶市萬州區科委項目(201301005)
龔偉(1980-),男,碩士,重慶三峽醫藥高等專科學校講師,研究方向為藥物含量分析。
R282.2
A
1673-2197(2015)17-0032-02
10.11954/ytctyy.201517016