雙冬膠囊鑒別方法研究

薛 靜，黃 剛，吳再猛，劉仕靜，蒲 兵，程吉祥

(貴州遠程制藥有限責任公司，貴州 貴陽 550018)

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雙冬膠囊鑒別方法研究

薛 靜，黃 剛*，吳再猛，劉仕靜，蒲 兵，程吉祥

(貴州遠程制藥有限責任公司，貴州 貴陽 550018)

目的：建立雙冬膠囊鑒別方法。方法：采用薄層色譜法(TLC)對雙冬膠囊中梔子、黃芪、麥冬、苦木進行定性鑒別。結果：TLC斑點清晰、分離度好、專屬性強，陰性對照無干擾。結論：所建立的方法可用于雙冬膠囊的質量控制。

雙冬膠囊；薄層液相色譜法；梔子；黃芪；麥冬；苦木

雙冬膠囊是由貴州遠程制藥有限責任公司生產的一種治療下尿路感染的硬膠囊劑。其具有清熱通淋、益氣養陰的功效，用于減輕或緩解急性輕中度單純性下尿路感染下焦濕熱兼氣陰兩虛證出現的尿頻、尿急、尿道灼熱刺痛、尿黃等癥狀。處方由梔子、黃芪、麥冬、苦木等六味藥材組成。參考相關文獻[1-5]，通過試驗制定了處方中梔子、黃芪、麥冬、苦木四味藥材的定性檢測指標，以控制本制劑的質量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

MettLer AE240 天平(梅特勒-托利多上海儀器有限公司)、ZWF三用紫外分析儀(上海興亞儀器有限公司)；超聲波清洗器(北京創新德超聲電子研究所)。

1.2 試藥

梔子苷對照品、梔子對照藥材、黃芪甲苷對照品、黃芪對照藥材、麥冬對照藥材、苦木對照藥材(中國食品藥品檢定研究院提供，批號分別為110749-200714、120986-200806、110781-200613、120974-200609、121183-201003、121017-200403)；硅膠(G、GF254)薄層板(青島海洋化工有限公司)；雙冬膠囊(批號：20130301、20130302、20130303)由貴州遠程制藥有限責任公司生產；本實驗所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 梔子的TLC鑒別

取雙冬膠囊(20130301、20130302、20130303)內容物各2g，分別加甲醇(濃度為50%)20mL，超聲40min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2mL使其溶解，作為梔子TLC供試品溶液。另取梔子對照藥材1g，加甲醇(濃度為50%)10mL，同法制成梔子對照藥材溶液。再取梔子苷對照品，加甲醇制成每1mL含4mg的對照品溶液。取不含梔子藥材的陰性樣品，同法制成不含梔子陰性對照溶液。按照TLC法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述六種溶液各2μL，分別點樣于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙腈-甲醇-濃氨試液(7∶3∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。結果顯示，供試品色譜中，在與梔子對照藥材色譜和梔子苷對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；陰性對照無干擾。梔子的TLC見圖1。

1～3.供試品；4.梔子對照藥材；5.梔子苷對照品；6.陰性對照

圖1 梔子的TLC色譜

2.2 黃芪的TLC鑒別

取雙冬膠囊(20130301、20130302、20130303)內容物各5g，分別加水30mL，超聲處理15min, 水溶液連同殘渣一起移置分液漏斗中，加水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20mL，分取正丁醇液(水液備用)，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20mL，分取正丁醇液(水洗液與上次水液合并，留作“2.3”麥冬的TLC鑒別用)，蒸干，殘渣加甲醇15mL使溶解，濾過，將濾液加入中性氧化鋁柱(100～120目，10g，內徑10～15mm)，用甲醇30mL洗脫，收集洗脫液，將收集的洗脫液濾過，濾液水浴上蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為黃芪TLC供試品溶液。另取黃芪對照藥材3g，加甲醇20mL，加熱回流1h，回流液濾過，將濾液加入中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內徑10～15mm)，用40%甲醇100mL洗脫，收集洗脫液，將收集的洗脫液于水浴上蒸干，殘渣加水30mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20mL，將2次提取的正丁醇液合并，再用正丁醇飽和的水洗滌合并正丁醇液2次，每次20mL，棄去水液，水浴上蒸干，殘渣加甲醇0.5mL使溶解，作為黃芪對照藥材溶液。取缺黃芪藥材的陰性樣品，照上法制成缺黃芪陰性對照溶液。再取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述六種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱數分鐘，至顯色清晰，置日光下及紫外光燈(365nm)下檢視。結果顯示，供試品色譜中，在與黃芪對照藥材色譜和黃芪甲苷對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點；陰性對照無干擾。黃芪的TLC日光下檢視見圖2，紫外光燈(365nm)下檢視見圖3。

1～3.供試品；4.黃芪對照藥材；5.黃芪甲苷對照品；6.陰性對照溶液

圖2 黃芪的TLC色譜(日光下檢視)

1～3.供試品；4.黃芪對照藥材；5.黃芪甲苷對照品；6.陰性對照溶液

圖3 黃芪的TLC色譜(紫外光燈(365nm)下檢視)

2.3 麥冬的TLC鑒別

取“2.2”項下下正丁醇提取后的水液，濃縮至約20mL，加鹽酸1mL，加熱回流1h，放冷，用三氯甲烷振搖提取2次，每次20mL，分取三氯甲烷溶液，濃縮至約1mL，作為供試品溶液。另取麥冬對照藥材1g，加乙醇20mL，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20mL使溶解，移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次提取用水飽和的正丁醇20mL，棄去正丁醇液，水液加鹽酸1mL，照上法制成麥冬對照藥材溶液。再取缺麥冬藥材的陰性樣品，同法制成缺麥冬陰性對照溶液。按照TLC法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述五種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-丙酮(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱數分鐘，至顯色清晰。結果顯示，供試品色譜中，在與麥冬對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；陰性對照無干擾。麥冬的TLC見圖4。

1～3.供試品；4.麥冬對照藥材；5.陰性對照圖4 麥冬的TLC色譜

2.4 苦木的TLC鑒別

取雙冬膠囊(20130301、20130302、20130303)內容物各5g，研細，加甲醇30mL，浸漬過夜，濾過，濾液濃縮至約1mL，作為供試品溶液。另取苦木對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取缺苦木藥材的陰性樣品，同法制成陰性對照溶液。按照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述五種溶液各10μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結果顯示：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的熒光斑點；陰性對照無干擾。苦木的TLC見圖5。

1～3.供試品；4.苦木對照藥材；5.陰性對照圖5 苦木的TLC色譜

3 討論

雙冬膠囊為中藥六類新藥，處方由梔子、黃芪、麥冬、苦木等六味藥材組成。本實驗采用薄層色譜法對處方中的梔子、黃芪、麥冬、苦木四味藥材分別進行定性研究。實驗中采用超聲處理及加熱回流兩種方法提取藥材中的有效成分，反復比較各種顯色方法，最后篩選出正文的方法。結果表明，該方法靈敏度高，專屬性強，斑點清晰，適用于雙冬膠囊中梔子、黃芪、麥冬、苦木四味藥材的薄層鑒別。

[1] 劉訓紅.中藥材薄層色譜鑒別[M].天津：天津科學技術出版社，1990:150.

[2] 吳瑪琍.中藥飲片鑒別[M].天津：天津科學技術出版社，1992:136.

[3] 馬廣慈，唐任寰，鄭斯成,等. 藥物分析方法與應用[M].北京：科學出版社，2000：547.

[4] 孫立華，吳愛英，張春輝.康媛顆粒質量標準的研究[J].中國藥品標準，2006,7(1)：66.

[5] 陳代賢，郭月秋等.中藥真偽質量快速影像檢定(上冊)[M].北京：人民衛生出版社，2012：355.

(責任編輯：魏 曉)

2015-05-20

貴州省中藥現代化科技產業專項項目(黔科合成字[2013]5010號)

薛靜(1985-)，女，貴州遠程制藥有限責任公司工程師，研究方向為藥品質量標準。

黃剛(1965-)，男，貴州遠程制藥有限責任公司總工程師，研究方向為藥品生產和技術管理。

R284

A

1673-2197(2015)17-0030-02

10.11954/ytctyy.201517015