幾種殺菌劑對林芝大棚番茄灰霉菌的毒力測定

龐 佩，蘇 成，翟云霞，鞏文峰，旺 姆

（西藏大學 農牧學院，西藏 林芝860000）

1 引言

灰霉病是全世界蔬菜、觀賞植物、果實甚至一些大田糧食作物上發生最普遍和分布最廣泛的病害，是溫室種植植物最常見的病害［1］。目前，在世界范圍內，灰霉菌（Botrytis.cinerea）侵染葡萄、蔬菜、漿果以及核果類作物，造成嚴重的經濟損失，它不僅能引起田間損失，甚至在果實的儲存和運輸中同樣造成危害［2］。自20世紀70年代以來，我國在防治番茄灰霉病上相繼使用多菌靈、甲基托布津、速克靈等化學藥劑［3～4］，由于長期連續使用同一種藥劑（如多菌靈），不僅使環境受到污染，也使病原菌產生了嚴重的抗藥性問題［5～6］。本實驗通過對6種不同化學藥劑進行室內毒力測定，了解該6種藥劑地區對番茄灰霉菌的毒性強弱，篩選出防治效果較好的藥劑，為番茄灰霉菌抗藥性治理提供理論參考。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

2.1.1 供試菌種

采取林芝地區溫室大棚番茄病果進行室內分離、純化獲得的番茄灰霉菌菌種，并良好保存于實驗室內。

2.1.2 供試藥劑

供試藥劑500g/L撲海因SC，拜耳作物科學（中國）有限公司生產；50% 腐霉利WP，海南正業中農高科股份有限公司；70%純托津超微 WP，山東東信生物農藥有限公司；25%腐霉·福美雙 WP，陜西美邦農藥有限公司；80%多菌靈 WP，江蘇太倉市農藥廠有限公司；75%百菌清WP，海南正業中農高科股份有限公司。

2.2 試驗方法

采用菌絲生長速率法［7］，將提前用滅菌水稀釋好的6種供試藥劑（5 000mg/L）的母液分別以無菌水按倍數逐步稀釋為500μg/mL、200μg/mL、50μg/mL、20μg/mL、12.5μg/mL的藥液，在培養基為50℃左右時，用移液槍分別取1mL藥液于9mlPDA培養基中，混合均勻，制成帶藥培養基平板，以不加任何藥劑的培養基為空白對照，重復3次。

從實驗室取出保存的番茄灰霉菌，活化后，在培養好的平板邊緣用無菌打孔器打取直徑為5mm的菌餅，分別移到帶藥和對照平板上，在20℃恒溫培養箱培養3d后，運用十字交叉法測量菌落直徑。計算出菌落直徑的平均值，將菌絲生長抑制率換算成y，藥劑濃度換算成x，求得線性回歸方程y=kx＋b，求出各菌株的抑制中濃度（EC50）［8］。菌絲生長抑制率公式為：

生長抑制率（%）=（對照菌落凈直徑（mm）- 處理菌落凈直徑（mm）/對照菌落凈直徑（mm）×100%。

3 結果與分析

3.1 6種藥劑劑對番茄灰霉菌的相對抑菌率

據表1可知，在一定范圍內，6種藥劑隨濃度的增加，相對抑菌率增大，濃度越大，抑菌效果越明顯。

3.2 6種藥劑對番茄灰霉菌的EC50比較值

6種藥劑對番茄灰霉病的室內毒力測定表明（表2），百菌清、撲海因、純托津、多菌靈、腐霉利、腐霉 .福美雙對番茄灰霉病菌的質量濃度EC50分別為9.944、0.632 3、1.402 1、0.466 7、5.646 1和0.286 9μg/mL。其中，腐霉 .福美雙的EC50最小，說明對番茄灰霉菌的毒力最大，而多菌靈的EC50最大，說明對番茄灰霉菌的毒力最小。

4 結語

室內毒力測定實驗表明，在防治番茄灰霉病時首選腐霉·福美雙，其次是百菌清、樸海因。在選擇藥劑時，要交替使用，可以提高防效。而多菌靈的毒力最差，可能是長期單一使用多菌靈，使灰霉菌對此藥劑產生了抗藥性，因而多菌靈不再適合單獨使用。因此，采取不同化學藥劑配合使用，例如多菌靈與福美雙混合，對防止草莓灰霉菌抗藥性產生有明顯作用［9］，同時，研究新型低毒、高效的藥劑，配合不同防治措施，綜合治理番茄灰霉菌的抗藥性產生，提高番茄品質與產量。

表1 6種不同藥劑對番茄灰霉病菌的相對抑制率

表2 6種供試藥劑對番茄灰霉病菌的毒力回歸方程及EC50值

［1］阿格里斯 .植物病理學［M］.許崇堯，譯.5版.北京：中國農業出版社，2009.

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［3］楊升炯，張曉鋼 .番茄灰霉病發生規律及防治技術研究［J］.西北農業學報，1996，5（2）：66～70.

［4］劉 波 .對多菌靈、速克靈具多重抗性的灰葡萄孢菌株性質的研究［J］.南京農業大學學報，1994，16（3）：50～54.

［5］張從宇，黃劍鵬，王榮華 .番茄灰霉病菌對速克靈的抗性檢測［J］.安徽農業科學，2004，32（2）：310～311.

［6］劉 波，葉鐘音，劉經芬 .速克靈抗灰霉病菌菌株性質的研究［J］.植物保護學報，1992，19（4）：297～301.

［7］農業部農藥檢定所.NY/T 1156.2-2006.農藥室內生物測定試驗準則：抑制病原真菌菌絲生長試驗——平皿法（農業行業標準）［S］.北京：中國農業出版社，2006.

［8］孫廣宇，宗兆鋒 .植物病理學實驗技術［M］.北京：中國農業出版社，2002：142～143.

［9］楊 謙 .植物病原菌抗藥性分子生物學（第二版）［M］.北京：科學出版社，2012.