食品中過敏因素及其風險控制的研究進展

黃海燕, 張 慧, 陳 亮, 肖志剛

(1.吉林工程職業學院 食品工程分院, 吉林 四平 136001; 2.黑龍江職業學院 食品藥品學院, 黑龍江 雙城 150111; 3.沈陽師范大學 糧食學院, 沈陽 110034)

?

食品中過敏因素及其風險控制的研究進展

黃海燕1, 張 慧2, 陳 亮1, 肖志剛3

(1.吉林工程職業學院 食品工程分院, 吉林 四平 136001; 2.黑龍江職業學院 食品藥品學院, 黑龍江 雙城 150111; 3.沈陽師范大學 糧食學院, 沈陽 110034)

隨著科技進步和經濟發展,食品安全越來越受到人們的重視,食物過敏這一食源性疾病已引起廣大消費者、生產者和研究者的普遍關注。依據近年來有關食品過敏的研究成果,從食物過敏的流行病學、食物過敏因素來源、食物過敏原的檢測及食物過敏因素的風險控制等方面綜述了食物過敏因素的研究進展。對過敏因素在食品加工處理的穩定性研究,過敏原檢測方法,食物過敏與食物過敏研究現狀,食物過敏的發病機制等幾個方面進行了分析總結,并結合國內外最新的研究成果及頒布的法規,對食物過敏因素的研究工作做出了新的展望,未來食品過敏的研究將從過敏食物或食品的適當標注,開發低敏食品并的建立和使用食物過敏數據庫幾個方面入手來控制食品過敏因素的風險。

食物過敏因素; 過敏原檢測; 風險控制

0 前 言

隨著科技進步和經濟發展,食物安全性受到越來越多人們重視,食物過敏這一食源性疾病已引起廣大消費者、生產者和研究者的普遍關注。食品安全性是食品質量最重要組成部分。我國有關專家認為食品安全性應該是食品中不應含有可能損害或威脅人體健康的有毒、有害物質或因素。食用數量是否適當,還取決于消費者自身的一些內在條件。大多數人都經歷過不良的食品反應,但只有少數人(大約8%的嬰兒和2% 的成人)產生過強烈的因食品蛋白質引起的過敏反應。重慶醫科大學兒童醫學院在一年內對3 040名2歲以下兒童進行食物過敏流行病調查,確診160名兒童產生食物過敏,發病率為5.2%,高于美國發病率[1]。食物過敏在相當程度上侵擾著過敏人群健康,因此保護消費者食用安全已成為食品安全管理部門和食品生產商面臨的嚴峻問題。

1 食物過敏的流行病學

食物過敏是指食物進入人體后,機體對之產生異常免疫反應,導致機體生理功能的紊亂和(或)組織損傷,進而引發一系列臨床癥狀。食物變態反應具有特異性,各種免疫病生理機制均可涉及。食物過敏反應的一個共同特點是必須有致敏因素的預先接觸及前接觸,使機體處于致敏狀態,當再次接觸該致敏因素時,才誘發變態反應。食物過敏是臨床上最常見、最重要的過敏性疾患之一。關于食物過敏的研究早在1905年就開始了。當時從事環境醫學的英國精神病醫師Dr.Frances-Hare發現,許多疾病,包括痛風、濕疹和絞痛病等都和食物有關,去除有問題的食物之后,癥狀就會消失。這就是人們最早認識到的食物過敏現象。

由于診斷方法不同,各國報道的人群研究的食物過敏率差異較大;僅有的幾項以雙盲對照食物激發實驗陽性為診斷標準的人群研究顯示,0.5%～2%的成人和6%～8%的兒童有食物過敏問題[2-3]。美國對480多名新生兒進行的前瞻性研究顯示,28%的被調查兒童在3歲前有過食物不良反應,經食物激發實驗證實其中8%兒童至少對一種食物過敏。Hill等[4]報道,澳洲3歲以下兒童食物過敏患病率約為3%～7%,2歲以下兒童對蛋類過敏者為3.2%,對牛奶過敏者為2.0%,對花生過敏者為1.9%。荷蘭白種人食物過敏發病率成人為1.4%,兒童為5%～7%。有關亞洲和非洲國家食物過敏的人群研究很少,中國一項以開放性食物激發試驗為診斷依據的研究顯示,2歲以下幼兒食物過敏率為5.3%。最近的研究顯示,通過測定血清中特異性IgE水平,判斷食物過敏的敏感性和精確性超過95%,運用該方法減少了對激發實驗的需求。同時,嬰幼兒特異性IgE水平可較好地預測以后是否對吸入性過敏因素產生過敏[5-6]。

2 食物過敏因素

食物中能使機體產生過敏反應的抗因素分子稱為食物過敏因素,它們大多為蛋白質。據報道,有8類食物經常引起過敏反應,占總過敏案例90%以上,它們分別為:蛋、牛奶、魚類、甲殼類動物、花生、大豆、核果類食物及小麥[7]。對人類健康構成威脅的食物過敏因素主要來自食物中含有的致敏蛋白質、食品加工儲存中使用的食品添加劑和含有過敏因素的轉基因食品。以下對常見食物過敏因素分布情況分別作一介紹。

2.1 食物過敏蛋白質

食物中90%的過敏因素是蛋白質,但并非所有蛋白質都會引起過敏。值得指出的是,這些特性并不是致敏因素所特有的,因為非致敏因素分子同樣可具有這些特性。由蛋白質引起的過敏反應多為IgE介導的I型變態反應。植物性食物中過敏蛋白主要是醇溶谷蛋白家族的非特異性脂肪轉運蛋白、d-淀粉酶或胰島素抑制劑、雙子葉植物種子2s儲存蛋白等。牛奶里含有20多種蛋白質、d-乳白蛋白、P-乳球蛋白、牛血清蛋白和γ-球蛋白。1999年國際食品法典委員會第23次會議公布了常見致敏食品的清單,包括8種常見的和160種較不常見的過敏食品。臨床上90%以上的過敏反應由8類高致敏性食物引起,這些食物包括:蛋、魚、貝類、奶、花生、大豆、堅果和小麥。其他食品如豬肉、牛肉、雞、玉米、番茄、胡蘿卜、芹菜、蘑菇、大蒜、甜辣椒、桔子、菠蘿、獼猴桃,芥末、酵母誘發的過敏反應較少[8]。

2.1.1 植物性食物過敏原

在植物性食物過敏案例中,以大豆及核果類食物過敏報道最多,因此,對其食物過敏原研究工作也較深入。1993年,Ogawa等分離到大米中主要過敏蛋白質Glym Bd30k,隨后還對該過敏原一級氨基酸序列抗體結合部位進行鑒定,此前他們已經研究發現大豆中3種主要過敏蛋白為Glym Bd30K,Glym Bd28K和β-7S伴大豆蛋白。特別是那些人類以主食消費的谷物食物如水稻、小麥、玉米等,發現在人群中也具有過敏現象,因此引起科學界關注。1978年,Shibasaki等報道水稻蛋白具有過敏作用,1987年Mutsuda等運用HLPC,ELISA,SDS-PAGE及親和層析法分離純化到1種存在于水稻種子胚乳中的過敏原,進一步研究發現該過敏原分子中Pro和Cys含量比谷蛋白和球蛋白要高,而且這種過敏蛋白在100 ℃/60min后仍然可保持60%過敏反應活性[9]。通過進一步分離得到6種過敏蛋白質,分子量分別為14,15.5,16,26,33,和56 KDa,并發現14～16 KDa過敏蛋白具有α-淀粉酶抑制劑活性,33 KDa過敏原蛋白質具有葡萄糖氧化酶Ⅰ活性[10]。

表1 幾種常見植物性食物過敏原[10-11]

2.1.2 動物性食物過敏原

牛奶過敏是小兒最常見食物過敏之一,在歐美發達國家,嬰兒牛奶過敏發生率為2%～7.5%。50%牛奶過敏嬰兒可能對其他食物也產生過敏,如蛋類,豆類,花生仁等。牛乳中含有5種主要蛋白質,即酪蛋白,M-乳白蛋白,P-乳球蛋白,牛血清白蛋白和F-球蛋白。由于嬰兒小腸滲透性高,對上述5種異種蛋白均能吸收,但認為主要過敏原為α-酪蛋白及P-乳球蛋白。由于α-酪蛋白是牛奶中主要蛋白質,也是引起小兒過敏主要過敏原,因此,在牛奶基礎上改良配方奶粉仍然很難免除α-酪蛋白和其他過敏原如P-乳球蛋白的存在,從營養成分角度看,大豆蛋白粉能滿足兒童需要,但大豆蛋白粉對牛奶過敏兒童有效率只在50%左右,原因可能是豆奶粉中蛋白質與牛奶蛋白質有交叉過敏現象。

海產食品過敏反應經常發生在沿海人群中,但以前我們只知道引起過敏的海產品種類如蝦,貝類,一些魚類。而現在研究中發現主要海產品過敏原為熱穩定性糖蛋白,且各種甲殼類動物過敏原具有高度交叉反應性。Masaru[12]等研究被日本及歐美國家食用的主要牡蠣品種(Crassostrea gigas)過敏原為一種富含Cly , Ala,Leu而缺少Pro,Try的原肌球蛋白,起分子量為86 KDa。

表2 幾種常見動物性食物過敏原[12-13]

2.2 食品添加劑

食品添加劑包括防腐劑、色素、抗氧化劑、香料、乳化劑、穩定劑、松軟劑和保濕劑等,其中人工色素、香料引起過敏反應較為常見。為了食品的貨架期、改善感官性狀和口感,這些化學物質被廣泛用于各類食品中,但由于食品標簽中標注不明確或沒有標注,如果不特別注意往往難以觀察。食品添加劑引起的過敏反應通常為非IgE介導的免疫反應,采用皮膚針刺實驗特異性IgE測定常為陰性反應,臨床診斷只能通過DBPCFC來確診[14]。

2.3 轉基因食物過敏因素

轉基因食品安全性一直受到社會廣泛關注,而轉基因食品過敏事件的發生,更增強了人們對轉基因食品安全性的擔憂。Pioneer Hibred 公司將巴西堅果基因轉入大豆中以增加動物飼料蛋白含量,這種基因改良由于引發消費者對巴西堅果的過敏反應而被責令收回。該案例告訴人們,轉基因食物有可能轉進過敏因素基因,使某些人類未知的或從未經人類食用的生物中過敏因素基因轉入到食物性動植物中而引發過敏事件。另據報道,轉基因Bt玉米是利用遺傳工程技術在玉米基因中插入Bt蛋白(一種蘇云金桿菌殺蟲毒素)基因,Bt蛋白一般對人體無毒,但對害蟲有毒,由于有些Bt蛋白耐熱和不能消化,有可能成為食物過敏因素。人們對轉基因玉米存在潛在的過敏性、毒性等表示擔心[15]。

2.4 其他食物過敏問題

1999年,SI Yin-Chung等研究Mallard反應對食物過敏性影響。他們利用無過敏因素活性植物聚集素同葡萄糖或果糖在50 ℃保持28 d,然后將發生Mallard反應的產品進行過敏性研究[16]。結果發現,發生Mallard反應的產品會導致過敏反應,但是否是Mallard反應產物中含有過敏因素還有待進一步研究證實。

3 食物過敏原的檢測

食品過敏原檢測方法主要是免疫分析法,隨著更多過敏原致病機理的發現,它將滲透到未來食品科學和食品分析的各個傳統領域。

3.1 放射性過敏原吸附抑制試驗

放射性過敏原吸附試驗,它是特異性過敏原體外測定方法之一,是國外首選的體外診斷方法。它同其他體外測定方法一樣,最大的優點是絕對安全,可完全避免體內方法可能發生的過敏反應 ,同時不會有使病人致敏或增加病人敏感性的危險,尤其對高度敏感的兒童特應性患者更為適宜。該試驗與支氣管激發試驗的符合率為80%左右,與皮膚試驗的符合率在70%～80%,與白細胞組織胺釋放試驗的相關系數為0.84。該試驗使用離體血清,便于運輸和保存,在方法上敏感性, 特異性和重復性均很高,易于自動化,因此在國外是廣泛應用而僅次于皮膚試驗的測定方法。但該試驗需要的放射性同位素,價格昂貴,半衰期短,操作和處理均需要專門的設備,使其廣泛應用受到一定的限制。

放射過敏原吸附試驗是利用過敏病人血中的IgE作為抗體,與固定相上過敏原和食品中的過敏原(游離)競爭結合,經過一定時間培養后,清洗去游離抗原和抗體,再用標記的兔或羊抗體IgE的抗體檢測與固定相抗原結合的人IgE量,從而計算出食品中的抗原量[15]。此法用于測定不同類型蛋白質過敏原,如花生和乳清等。

3.2 免疫-PCR

免疫-PCR是以一段特定的雙鏈或單鏈DNA來標記抗體,用PCR擴增抗體所連接的DNA,并進行電泳檢測,因此可由PCR產物的量來反映抗原分子的量。由于PCR的高擴增能力,只要存在著極微量的抗原抗體反應,PCR都能大量擴增抗體所連接的DNA分子,再用電泳來表明實驗結果[17]。免疫-PCR的關鍵之處就在于用一個連接分子將一段特定的DNA連接到抗體上,在抗原和DNA之間建立相對應關系,從而將對蛋白質的檢測轉變為對核酸的檢測。

食品過敏原檢測的一個新靶標就是特殊食品蛋白的cDNA。DNA分子可以通過PCR技術擴增,在PCR過程中DNA分子的引物也得到了擴增。產物即可利用分子量的大小在瓊脂糖電泳上進行分離。一般來說通過引物的選擇可以使具有一定同源性的DNA分子之間的交叉反應降低到最低程度,盡可能的避免假陽性結果的產生。PCR擴增技術一般用來對各種食品中經基因修飾的成份(如轉基因大豆和轉基因玉米)的檢測和定量分析。而直到現在,只有2種PCR方法專門針對食品過敏原(榛實和小麥)的檢測。兩種方法均具有很高的靈敏度,都可以達到0.001%[18]。

國外學者對烤榛實(140 ℃,30 min)中低豐度主要榛實過敏原 Coral(0.001%)的DNA進行了擴增(與巧克力和其他不同的食品中榛實蛋白的含量一致)[19]。而且不同的食品類型也大大影響了過敏原DNA的定量檢測限度。也有人應用PCR技術研究了食品處理過程相關參數對面包類食物中轉基因大豆和轉基因玉米成分檢測的影響。結果發現在研究的食品(面包和蛋糕)中含量低于0.5%轉基因玉米的DNA是檢測不到的,而經過各個加工步驟(包括200 ℃30 min)后得到的白面包中加入的0.3%轉基因大豆的DNA是可以檢測的。這就說明在用PCR技術檢測過敏原DNA時一定要考慮食品處理過程中過敏原DNA的降解。

ELISA可以檢測食品樣品中已知來源的蛋白,而PCR可以在相關蛋白不存在的情況下檢測其DNA的存在。因此,PCR技術增加了食品中存在過敏原假陽性測定結果的機率。PCR方法的優點是比較快,如果要研究已知序列的DNA,這個分析過程只需要7～10 d,對于一個已經純化的過敏原,ELISA分析要用一個月甚至更長時間,此外,制備其特異性的抗體要再加一個月[20-21]。PCR技術是以簡單、確定的DNA序列為基礎的,而ELISA分析卻要依賴于質量穩定的動物抗體。將來重組抗體將有助于抗血清的標準化。加工食品中 DNA和蛋白的穩定性都是要考慮的重要因素。總之,PCR技術適合于復雜食品中過敏原的定量分析,在這方面應該得到大力推廣。

3.3 免疫學檢測

利用動物抗體的免疫檢測抗原的方法有很多,也較成熟。它是通過對一些常見的過敏原,制備出一些動物的單克隆抗體,食品中的這些過敏原可以通過如酶聯免疫吸附法(ELISA)和放射性免疫法(RIA)來檢測。

ELISA是一種利用患者血中抗體檢測過敏原的方法。其基本原理為,將已知過敏原抗體包被,通過抗原抗體反應將酶標抗體結合到載體上,然后使結合的酶標抗體和游離的酶標抗體分離,加入酶的底物顯色,根據顏色深淺可定性或定量過敏原。

4 食物過敏因素的風險控制

食品過敏因素風險控制最重要的一點是了解產品中所有配料,并在食品標簽中準確地把食品過敏因素標示出來。對于食品生產廠家而言,危害分析和關鍵控制點(HACCP)體系的實施,可以控制食品的每個階段,以保證食品的安全性。優質生產規范(GMP)和衛生標準操作程序(SSOP)是保證食品安全法制化的規定。由于一般加工方法難以完全消除食物中的過敏因素,因此,如何有效控制過敏性疾病發生成為大家考慮的問題,目前認為可能通過3種途徑來實現。

4.1 對有關食物或食品做適當標注

在現代食品制造業中,食品因素料因素始形態已經完全發生改變,一種食品成分往往來源于幾種乃至幾十種因素料,因此在未加適當標注情況下,食物過敏消費者就很容易因誤食和發生食物過敏事件。如大豆分離蛋白因其較高營養和功能特性而在食品工業中廣泛應用,而大多數食品標簽只是簡單標注為蛋白質或植物蛋白質,消費者因無法識別其蛋白質種類及來源而對大豆過敏人群形成潛在威脅[22]。因此在食品標簽上注明蛋白質成分種類和來源,可有效避免過敏人群發生誤食而產生食物過敏事件。

4.2 食物過敏數據庫的建立和使用

對轉基因食品進行安全性評價和分析是保證消費者使用安全的必要措施。轉基因食品安全性自其產生以來就受到廣大消費者的關注,為此,國際食品生物技術委員會和國際生命科學研究院過敏性與免疫研究所一起,制定了一套分析遺傳改良食品過敏性的樹狀分析法[23]。目前已經有198種主要過敏因素(包括食物過敏因素)氨基酸序列是已知的,通過將目標蛋白序列同數據庫中近200個已知過敏因素氨基酸序列同源比較,可以推斷其過敏性,建立食物過敏因素數據庫就等于得到判定標準。

4.3 開發低敏食品

由于食品中過敏蛋白對各種加工處理表現穩定,完全消除過敏食品中過敏因素即不經濟也不實際,因此開發低敏食品才是切實可行的。開發低敏食品可通過2個途徑來實現:一是利用物理化學或生物化學方法消除或降解過敏因素,使食物過敏性下降,如分離和酶解技術應用;二是利用育種和基因工程技術培育低過敏因素食品因素料,如低過敏轉基因大米,低過敏轉基因大豆等[24-25]。低過敏食品目標就是通過各種不同方法和途徑使特定食物中過敏因素活性降低到敏感人群最低耐受力以下。

食物過敏原在食物中存在是食物安全不利因素,研究食物中過敏原的物理和生物化學特性,將有助于我們開發出低過敏甚至無過敏食品,以防止食品或其他新食品對過敏人群的侵擾。

5 結 語

食物過敏的高危人群為嬰幼兒和兒童,食物過敏是兒童繼發性營養不良的因素因之一,90%的過敏反應由蛋、魚、貝類、奶、花生、大豆、堅果和小麥等8類高致敏性食物引起。食物過敏的主要危險因素為陽性過敏性疾病家族史、純母乳喂養時間短于4個月和輔食添加不當。嬰幼兒期純母乳喂養是預防食物過敏的保護因素。降低食物過敏患病率及其對健康危害的關鍵是早期明確診斷、及早將過敏食物從病人食譜中徹底排除和及時給予喂養指導。盡管國際食品法典委員會已公布了常見致敏食物的清單,但在現實生活中,由于食物標簽的不完善、食物添加劑的廣泛使用使食品中隱含致敏成分增加,患者誤食過敏食品的情況時有發生,加上轉基因食品帶來的隱憂,嚴重威脅著易感人群的健康和安全。因此,強化食品標簽管理,加強轉基因食品安全性評價十分重要。

[1]HENDRA T.Passing the food allergen test[J].Cereal Foods World, 2003,48(1):20.

[2]BOCK S A.Prospective appraisal of complaints of adverse reactions to foods inc-hildren daring the first 3 years of life[J].Pediatrics, 1987,79:683-688.

[3]胡燕,黎海芪.兒童食物皮膚點刺試驗結果影響因素的Logistic回歸分析[J].中華兒科雜志, 2000,38(7):431-434.

[4]HILL D J.Goat milk allerginicity[J].Environ Toxicol Pharmacol, 1997,4:101-110.

[5]KULL I, TOLLIN L.Fish consumption during the first year of life and development of allergic diseases during childhood[J].Arc Dise Chil, 2002,87:478-481.

[6]HOST A,ANDRAE, CHARKIN, et al.Allergy testing in children: why, who, when and how[J]．Allergy, 2003,58:1-11.

[7]HUGHES D A,MILLS C.Food allergy: a problem on the increase[J].Biologist (London), 2001,48(5):201-204.

[8]張楠,陳復生.食物過敏原蛋白檢測技術研究進展[J].糧食與油脂, 2014(9):19-22.

[9]MUTSUDA T.Purification and properties of an allergenic protein in rice grain[J].Agric Biol Chem, 1988,52(6):1465.

[10]MASAYUKI N.Rice(Oryza satival L.)α-amylsae inhibitors of 14～16Kda are pot-ential allergens and products of a multigene family[J].J Agric Food Chem, 1996,44:2644-2628.

[11]KENNET H, ROUX.Detection and stability of the mayor almond allergen in foods[J].J Agric Chem, 2001,49(5):2131-2135.

[12]MASARU I, MASAMI I, KUNIYOSHI S, et al.Tropomyosin, the major oyster crassostrea gigas allergen and its IgE-binding epitopes[J].J Food Sci, 1998,63(1):44-46.

[13]ONEIL C E.Seafood allergy and allergens: areview[J].Food Tech, 1995,49(10)103-113.

[14]卓然.食物過敏的真相[J].食品與健康, 2013(1):23-25.

[15]邱林權,張宇.轉基因玉米的安全性討論[J].內江科技, 2014(9):11-14.

[16]SI Yinchung.Allergenicity of maillard reaction products from peanut proteins[J].Agric Chem, 1999,47:5227-5231.

[17]DANIELS N A, MACKINNON L, ROWE S M, et al.Foodborne disease outbreaks in United States schools[J].Pedi-atric Infec Dis J, 2002,21(7): 623-628.

[18]ROY A, FAYAD A, EARTHE G, et al.A multiplex polymerase chain reaction method for reliable, sensitive andsimultaneous detection of multiple viruses in citrus trees[J].J Virol Meth, 2005,129(1): 47-55.

[19]VANTARAKIS A, KOMNINOU G, VENIERI D, et al.Development ofamultiplex PCR detection of Salmonella spp.and Shigella spp.inmussels[J].Lett Appl Microbiol, 2000,31(2):1052-1091.

[20]劉景武,張偉,何俊萍,等.FTA 濾膜用于PCR檢測肉中的金黃色葡萄球菌[J].生物工程學報, 2005(11):1009-1013.

[21]王海艷,袁飛.食品中過敏原胡桃蛋白間接競爭ELISA檢測方法研究[J].中國食品學報, 2010,10(5):217-222.

[22]SCHARDT D.Food allergies[J].Nut Act Health Lett, 2001,28(3):10-13.

[23]郭明璋,許文濤.中國食物過敏原數據庫的建立與應用[J].食品安全質量檢驗學, 2014,5(9):2948-2952.

[24]唐傳核.低過敏大豆制品的開發[J].糧食與油脂, 2000(1):31-32.

[25]王文高.低過敏大米的研究進展[J].糧食與油脂, 2001(5):32-33.

Progress of research on food allergen and food allergy control

HUANGHaiyan1,ZHANGHui2,CHENLiang1,XIAOZhigang3

(1.College of Food Engineering, Jilin Engineering Vocational College, Siping 136001, China;2.College of Food and Medicine, Heilongjiang Polytechnic, Shuangcheng 150111, China;3.College of Grain Science and Technology, Shenyang Normal University, Shenyang 110034, China)

With the development of scientific and technological progressing, people take more and more attention to the food safety.The food allergies as the food borne disease has drawn attention of the masses of consumers, producers and researchers.In this paper the epidemiology of food allergies, the source of food allergies, the detection of food allergen and the risk control of food allergy factors were reviewed, based on the researches of food allergy in recent years.The stability study and the detection methods of allergic factors in food processing, and the present research situation, the pathogenesis has carried on the analysis summary.A new outlook was carried out based on the latest research achievements of the promulgated laws and regulations, and the factors of food allergy research work has made the future study of food allergies from food allergies or food appropriate annotation, that were the establishment of low sensitivity database and the Proper labeling of food allergy to control the risk of food allergy factors.

food allergy factors; allergen detection; risk control

2014-10-13。

“十二五”農村領域國家科技支撐計劃項目(2012BAD34B02); 黑龍江省教育廳科學技術研究重點項目(12511z006); 哈爾濱市優秀學科帶頭人基金資助項目(2012RFXXN107)。

黃海燕(1984-),女,內蒙古集寧人,吉林工程職業學院講師,碩士。

1673-5862(2015)01-0054-06

TS207

A

10.3969/ j.issn.1673-5862.2015.01.012