并發根尖周炎對根管治療患者持續性根尖周感染影響的研究

王景暉，石靈萍，劉志壽

（甘肅臨夏州人民醫院 口腔科，甘肅 臨夏731100）

研究已證實[1]，口腔中約有500多種細菌，不注意口腔清潔者的口腔內的細菌達到1萬億個。一般而言，如果口腔細菌微生態破壞，則會使根尖周嚴重損傷而無法恢復。臨床上反復根管治療仍不能有效清除的根內感染為持續性根尖周感染。研究證實[2]，根管內外微生物是引起持續性根尖周感染的主要原因。在此背景下，本研究即探討根管治療后并發根尖周炎對患者持續性根尖周感染病原菌的影響，為其研究提供可參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年1月-2014年10月來我院行根管治療的患者作為研究對象，男38例，女42例，年齡（60～75）歲，平均（64.3±3.1）歲，診斷符合1999年牙周病分類國際研討會制定的標準[3]。根據治療后是否伴發根尖周炎分為并發組40例與未并發組40例，兩組性別、年齡等基本資料比較差異無統計學意義（P>0.05）。

納入標準：患牙均為單根牙，根尖周炎穩定期，無牙髓炎癥，探診深度（probing depth，PD）<3mm，無附著喪失（attachment loss，AL）及牙槽骨吸收。排除標準：根尖周炎急性發作期，PD≥6mm，AL≥4 mm，根尖X線片示有鄰面牙槽骨吸收，結締組織病，惡性腫瘤，吸煙史，近3個月行牙周治療或服用抗生素等。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

唾液采集前清水漱口，生理鹽水清除食物殘渣，吹干后棉球隔濕、碘酊棉球消毒。在無刺激條件下留取唾液。放于培養基，4℃厭氧袋中保存，1 h內送檢行細菌培養。以1mm直徑取菌環于培養基上，給予相應的溫度及pH值，培養48 h后取合適的菌落進行鑒定。在×1 000顯微鏡下計數200個菌細胞，共分為球菌、桿菌、梭狀菌、絲狀菌、彎曲菌和螺旋體6類，以百分比表示。將轉種培養基分別接種于牛心腦浸液培養基和胰蛋白酶大豆血瓊脂培養基上培養，條件：氮氣N2為80%、二氧化碳CO2為10%和氫氣H2為10%的無氧環境，37℃培養3～7 d。分析牙齦卟啉單胞菌（porphyromonas gingivalis，Pg）、核梭桿菌（fusobacterium nucleatum，Fn）、福塞氏類桿菌（bacteroides forsythus，Bf）和放線桿菌（actinobacillus pleuropneumoniae，Aa）的檢出率。并采用全自動生化儀檢測堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性。

1.3 統計學方法

應用SPSS 17.0統計軟件對數據進行處理。數據資料經正態性檢驗，符合正態分布數據的計量資料采用（±s）表示，兩組間的比較采用獨立樣本t檢驗；非正態分布資料采用中位數表示，采用秩和檢驗；計數資料以構成比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗或者精確概率法。P<0.05差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組患者致病菌分布情況

不同組患者致病菌分布情況結果顯示：并發組檢出20個菌門，未并發組檢出18個菌門。兩組患者檢出菌屬構成比比較差異有統計學意義（P<0.05）；并發組放線菌門構成比明顯高于未并發組（P<0.05）；其他菌門構成比比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 不同組患者致病菌培養情況

不同組患者致病菌培養情況結果顯示：并發組Aa檢出率明顯高于未并發組，差異有統計學意義（P<0.05）；但兩組Pg、Fn和Bf檢出率比較差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

2.3 不同組患者唾液ALP活性情況分析

不同組患者唾液ALP活性情況結果顯示：并發組患者唾液ALP活性明顯高于未并發組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表1 不同組患者致病菌分布情況

表2 不同組患者致病菌培養情況

表3 不同組患者唾液ALP活性情況分析（μU/30 s，±s）

表3 不同組患者唾液ALP活性情況分析（μU/30 s，±s）

組別 例數 ALP并發組 40 194.32±56.65未并發組 40 150.45±89.12 t值 3.938 P值 0.000

3 討論

臨床上根尖周病是指局限于根尖部的牙周組織，包括牙骨質、牙周膜和牙槽骨的炎癥[3]。目前根尖周感染主要采用根管治療，其主要是通過清除根管內的壞死或壞疸物質，進行適當的消毒，并根管充填去除不良刺激，促進尖周病變愈合。研究發現[4]，根管治療根尖周病的成功率為86.00%～98.00%，有部分患者根管治療療效不佳，甚至反復多次治療仍未痊愈，成為持續性根尖周感染。凌均柴等[5]研究認為，根管中細菌滯留是引起持續性根尖周感染的主要原因。因此，更好的了解根管治療后是否并發根尖周炎患者根管內的細菌情況，可促進研究持續性根尖周感染的發生機制。

本研究分析根管內致病菌分布情況發現，并發組檢出20個菌門，未并發組檢出18個菌門。兩組厚壁菌門、變形菌門、放線菌門所占比例均比較高，在前3位。但并發組放線菌門構成比明顯高于未并發組，其他菌門構成比差異無統計學意義。可見是否并發根尖周炎對根管內菌類分布產生影響，放線菌門比例增高可能增加并發根尖周炎發生風險。王娟等[6]進行類似研究發現，檢出132種細菌，分屬于21個菌門和96個菌屬。在門水平，伴根尖周炎組群落的主要菌門為厚壁菌門[32%（18 534/58 688）]、變形菌門[27%（15 626/58 688）]、放線菌門[15%（8 685/58 688）]和梭桿菌門[8%（4 761/58 688）]；無根尖周炎組群落的主要菌門為厚壁菌門[3l%（16 941/55 480）]、變形菌門[27%（14 748/55 480）]、梭桿菌門[10%（5 307/55 480）]和放線菌門[9%（4761/55 480）]，兩組比較伴根尖周炎組放線菌門比例明顯高于無根尖周炎組，差異有統計學意義（P<0.05），與本研究結果相似。

本研究進一步分析致病菌培養情況發現，并發組Aa檢出率明顯高于未并發組。可見Aa比例的增高可能與持續性根尖周感染存在相關性。李欣[7]通過變性梯度凝膠電泳技術分析根管治療后伴發根尖周炎對根管內細菌影響發現，無論是否伴發根尖周炎根管內均可檢測到細菌定植，但不同菌類構成比有差異，但該研究未進一步通過定性分析了解細菌種類。SETZER等[8]通過基因豐度檢測發現，放線菌屬在伴根尖周炎組菌群中的豐度和檢出率分別為6.00%和100.00%，而在無根尖周炎組中分別為2.00%和50.00%，差異有統計學意義（P<0.05）。分析認為臨床上Aa感染可表現為慢性肉芽腫，可伴有瘺道形成，其可有硫磺顆粒形成[9]，與持續性根尖周感染有相似表現。目前關于Aa在持續性根尖周感染中的作用機制尚不明確，其可能與Aa的黏附力、共聚能力以及逃避宿主免疫反應有關。Aa有發達的菌絲，可以與其他細菌發生共聚而形成生物膜樣屏障，進而可以避免根管治療中沖洗等操作的影響[10]；此外生物膜樣屏障亦可保護Aa進而逃避宿主免疫反應[11]。有研究認為[12]，Aa較強的生存能力可以使其在根管治療后根管內低營養環境中長期生存。

ALP是一種能夠將對應底物去磷酸化的磷酸酶，可以進行去磷酸化作用，在堿性環境下最為有效[13]。本研究分析不同組患者唾液ALP活性情況發現，并發組患者唾液ALP活性明顯高于未并發組。分析可能與Aa可以促進牙周組織溫度、pH值升高，抑制正常有益菌活性，引起ALP分泌增加。

綜上所述，本研究顯示，根管治療后伴發根尖周炎可引起根管內細菌比例改變，放線菌與根管治療后持續性根尖周感染存在相關性。

[1]袁志紅.甲硝唑治療竇道型根尖周炎的療效觀察[J].中國現代醫學雜志,2012,22(25):103-104.

[2]TRIPATHI NB,PATIL SN.Treatment of class II division 1 malocclusion with myofunctional trainer system in early mixed dentition period[J].J Contemp Dent Pract,2011,12(6):497-500.

[3]BOKHARI SA,KHAN AA,BUTT AK,et a1.Non-surgical periodontal therapy reduces coronary heart disease risk markers:a randomized controlled trial[J].J Clin Periodontol,2012,39(11):1065-1074.

[4]李紅,侯本祥.持續性根尖周炎根外生物膜的研究進展[J].國際口腔醫學雜志,2013,40(6):754-757.

[5]凌均柴,韋曦,劉紅艷.難治性根尖周炎的病因及防治策略[J].中華口腔醫學雜志,2010,45(1):52-57.

[6]王娟,唐志娟,李謹,等.根管治療后伴或不伴根尖周炎患牙根管內微生物群落的比較分析[J].中華口腔醫學雜志,2014,49(10):607-613.

[7]李欣.慢性牙髓炎及根尖周炎感染根管微生物病因分析的研究現狀[J].2010,26(3):437-439.

[8]SETZER FC,SHAH SB,KOHLI MR,et al.Outcome of endodontic surgery:A meta-analysis of the literature-part 1:Comparison of traditional root-end surgery and endodontic microsurgery[J].J Endod,2010,36(11):1757-1765.

[9]郭惠杰,田綺,高承志.未經治療和根管治療失敗的慢性根尖周炎的細菌學研究[J].實用口腔醫學雜志,2011,27(1):71-74.

[10]吳麗華.一次性根管治療慢性根尖周炎和牙髓炎療效觀察[J].中國基層醫藥,2012,19(18):2789-2790.

[11]周卓君,何宏.2種根管預備系統一次性根充治療慢性根尖周炎的療效評價[J].上海口腔醫學,2013,22(01):85-88.

[12]陳青宇,趙越.派力奧聯合竇道搔刮術治療有竇型慢性根尖周炎的臨床療效觀察[J].中國現代醫學雜志,2012,22(27):49-51.

[13]MESTNIK MJ,FERESM,FIGUEIREDO LC,et a1.The effects of adjunctive metronidazole plus amoxicillin in the treatment of generalized aggressive periodontitis:a l-year double-blinded,placebo-controlled randomized clinical trial[J].J Clin Periodont01,2012,39(10):955-961.