泰國葛不同部位幾種次生代謝產物的研究

馬樹運，楚紀明，李海峰，徐 立*

（1.大理學院基礎醫學院，云南大理 671000；2.大理學院藥物研究所，云南大理 671000）

泰國葛Pueraria mirifica屬于豆科葛屬植物，是泰國的珍稀保護植物，主要生存在泰國北部、東北部和西部，泰國民間稱之為白高顆（White Kwao Kura）。泰國葛根作為泰國傳統藥用植物有著悠久的歷史，并因含有較豐富的葛雌素而著稱〔1-2〕，近年來隨著研究的深入，應用更加廣泛。葛根素、大豆苷和染料木素等異黃酮類化合物為葛根的有效成分，且對心血管系統、免疫系統等疾病有較好的治療作用〔3-5〕。本文首次分析泰國葛不同部位葛根素、大豆苷和染料木素的含量，為探討其最佳藥用部位提供依據。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀，包括G1315A/B DAD檢測器、G1313A ALS自動進樣器、Agilent ChemStation色譜工作站（美國惠普）；FY135型中草藥粉碎機（天津市泰斯特）；SK5200H型超聲波清洗儀（上?？茖В幻诽乩针娮犹炱紸E240（瑞士梅特勒）；純水處理系統（美國Millipore）等。

1.2 藥品與試劑 葛根素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110752-200912）、大豆苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：111738-200501）、染料木素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：111704-200501）；甲醇為色譜純，其他試劑為分析純。植物樣品2013年5月采自泰國南邦，大理學院徐立副教授鑒定為泰國葛Pueraria mirifica。

2 方法與結果

2.1 方法 采用楚紀明等〔6〕報道的葛根中異黃酮成分含量測定方法。

2.2 樣品測定 分別測定泰國葛根、莖、葉中葛根素、大豆苷、染料木素的含量，每個樣品均做3組平行試驗。所得數據用SPSS17.0統計軟件進行單因素方差分析，根、莖、葉中葛根素和染料木素含量為根＞莖＞葉，各組之間差異均有統計學意義（P＜0.05）；大豆苷含量為根＞葉＞莖，各組之間差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 泰國葛樣品中異黃酮類成分含量測定（±s，n=3）

表1 泰國葛樣品中異黃酮類成分含量測定（±s，n=3）

注：與根相比，a.P＜0.05，A.P＜0.01；與莖相比，b.P＜0.05，B.P＜0.01。

部位 葛根素質量分數/%大豆苷質量分數/%染料木素質量分數/%根莖葉0.531±0.0890.226±0.0340.075±0.001 0.024±0.006A 0.041±0.006A 0.054±0.007a 0.018±0.004Ab 0.135±0.009AB 0.016±0.003AB

3 討論

葛是一種尚未完全開發利用的天然野生植物資源，隨著葛根的藥理、藥化、臨床應用、有效成分提取、分離和檢測技術等方面研究的不斷深入，其藥理功能、保健作用和應用價值將會日益引起人們的重視〔7-8〕。自20世紀90年代以來，HPLC法測定葛根及其制劑中葛根素成為主流，該方法簡便快速、重現性好、回收率高，是質量控制的可靠手段〔9-11〕。此次研究采用HPLC法分析泰國葛不同部位葛根素、大豆苷和染料木素的含量，旨在探討其最佳藥用部位。

本實驗結果顯示，泰國葛根、莖、葉中葛根素和染料木素含量為根＞莖＞葉，大豆苷含量為根＞葉＞莖。染料木素作為葛根的活性成分，其具有誘發細胞程序性死亡、提高抗癌藥效、抑制血管生成等作用，是一種很有潛力的癌癥化學預防劑，其抗癌作用及機制具有廣泛的應用前景〔12〕。故而在抗癌研究方面，泰國葛的應用價值為根＞莖＞葉。而葛根素和大豆苷是葛中的兩大主要活性成分，具有改善心腦血管循環、降血脂、解酒等多種藥理作用，其藥源豐富、療效確切，具有良好的開發前景〔13-14〕。本研究結果顯示，其含量順序亦為根＞莖＞葉，且根部含量占絕對優勢，為莖與葉的幾十倍。大豆苷的含量為根＞葉＞莖，且根部含量為葉部的2倍左右，說明除根部以外，葉也含有較高含量的大豆苷。

〔1〕Cho J G，Park H J，Huh G W，et al.Flavonoids from Pueraria mirifica roots and quantitative analysis using HPLC〔J〕.Food Science and Biotechnology，2014，23（6）：1815-1820.

〔2〕Yusakul G，Udomsin O，Juengwatanatrakul T，et al.High performance enzyme-linked immunosorbent assay for determination of miroestrol，a potent phytoestrogen from Pueraria candollei〔J〕.Analytica Chimica Acta，2013，785：104-110.

〔3〕曹銘希.葛根素的提取及其藥理活性的研究進展〔J〕.中國醫藥指南，2012，10（28）：48-49.

〔4〕賴玲.葛根的研究進展〔J〕.海峽藥學，2013，25（1）：10-14.

〔5〕楊旭東，王愛勤，何龍飛.葛根種質資源及其開發利用研究進展〔J〕.中國農學通報，2014，30（24）：11-16.

〔6〕楚紀明，馬樹運，李海峰，等.HPLC同時測定不同種葛根中3種異黃酮成分的含量〔J〕.食品與藥品，2015，17（1）：50-53.

〔7〕鐘凌云，馬冰潔，葉喜德，等.中藥葛根研究現狀分析及展望〔J〕.亞太傳統醫藥，2014，10（17）：18-21.

〔8〕宋卉，李銀花，鄭暉，等.葛根素的藥理作用與臨床研究進展〔J〕.現代醫藥衛生，2011，27（19）：2936-2937.

〔9〕張開霞，章軍，荊文光，等.HPLC測定粉葛飲片中3種黃酮類成分的含量〔J〕.中國實驗方劑學雜志，2013，19（6）：78-80.

〔10〕王治平，李衛民，高英，等.HPLC同時測定不同產地葛根中6種主要異黃酮類成分的含量〔J〕.中國實驗方劑學雜志，2013，19（8）：125-128.

〔11〕李丹，王培卿，張丹，等.HPLC測定3種葛根素注射液中葛根素〔J〕.中國實驗方劑學雜志，2014，20（24）：66-69.

〔12〕葉惠煊，熊力夫，劉向前.藥食同源植物葛根的研究進展〔C〕//中國商品學會中藥商品專業委員會.第三屆中國中藥商品學術年會暨首屆中藥葛根國際產業發展研討會論文集.2012：9.

〔13〕程斯倩，陳雪，于馨洋，等.葛根異黃酮藥理作用的研究進展〔J〕.吉林醫藥學院學報，2013，34（1）：46-49.

〔14〕Bang M H，Lee D G，Baek Y S，et al.A new miroestrol glycoside from the roots of Pueraria mirifica〔J〕.Chemistry of Natural Compounds，2013，49（3）：443-445.