某院大腸埃希菌分布及耐藥性分析

周 群 段賢春 任 薇 朱春冬 李春穎 王 勝 季紅燕

某院大腸埃希菌分布及耐藥性分析

周 群 段賢春 任 薇 朱春冬 李春穎 王 勝 季紅燕

目的 了解某院大腸埃希菌的分布特點及其耐藥性，指導臨床合理應用抗菌藥物。方法 對766株大腸埃希菌的分布及耐藥率進行回顧性分析。采用法國生物梅里埃公司全自動細菌鑒定儀 VITEK2 compact進行菌株鑒定，采用K-B法進行藥敏試驗，按美國臨床實驗室標準化委員會2014年標準判讀結果。結果 766株大腸埃希菌主要分離自尿液和痰液標本，分別占52.87%和13.84%；其中鑒定出產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌366 株，占大腸埃希菌總數的47.78%。產ESBLs大腸埃希菌對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產ESBLs大腸埃希菌(P<0.05)。結論 大腸埃希菌是泌尿道和呼吸道感染的常見病原菌，產ESBLs大腸埃希菌的耐藥率高，臨床上應根據藥敏合理使用抗菌藥物。

大腸埃希菌；耐藥率；超廣譜β-內酰胺酶；抗菌藥物；分布

大腸埃希菌是醫院感染的常見致病菌,由于臨床上廣譜抗菌藥物的廣泛應用，導致大腸埃希菌出現了不同程度的耐藥，特別是產超廣譜β-內酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)菌株，其對抗菌藥物表現出多重耐藥性[1]。ESBLs菌株引起的醫院感染位居前列，極大的增加了臨床治療難度。大腸埃希菌的臨床分布以及耐藥趨勢在不同的地區和醫院表現不一。為了解感染患者送檢標本的大腸埃希菌的分布及其耐藥性，本研究對某院分離的大腸埃希菌的分布以及耐藥率進行了回顧性分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 菌株來源于該院2013年1月至2014年12月臨床送檢的尿液、痰液、分泌物及胸腹水等標本，共分離出大腸埃希菌766株，質控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922。

1.2 菌株鑒定 法國生物梅里埃公司全自動細菌鑒定儀 VITEK2 compact進行菌株鑒定，藥敏紙片為英國Oxoid公司產品。

1.3 藥敏試驗 采用K-B法進行藥敏試驗，結果按美國臨床實驗室標準化委員會2014年標準進行判讀,頭孢哌酮/舒巴坦的判定標準參照頭孢哌酮對腸桿菌科細菌的折點。

1.4 ESBLs 菌株的檢測 參照美國臨床實驗室標準化委員會2014年版推薦的表型篩選及確證試驗。以頭孢他啶和頭孢噻肟為底物篩選產ESBLs可疑菌株，再用酶抑制劑增效試驗(頭孢他啶和頭孢他啶-克拉維酸，頭孢噻肟和頭孢噻肟-克拉維酸)確認產ESBLs 菌株，即含克拉維酸與不含克拉維酸抗菌藥物紙片間的抑菌環直徑相差≥5 mm為產ESBLs 菌株。

1.5 統計學方法 應用上海希森美康信息數據管理系統對相關資料進行統計，采用SPSS 17.0進行統計分析，計數資料以百分比表示，統計分析采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 標本分布 766株大腸埃希菌，405株分離自尿液，占52.87%，106株分離自痰液，占13.84%，101株分離自膿液，占13.19%。見表1。

2.2 耐藥率 766株大腸埃希菌對碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥率≤3.00%，對阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、妥布霉素的耐藥率<50.00%，對慶大霉素、復方新諾明、頭孢匹美、氨芐西林/舒巴坦、左氧氟沙星、環丙沙星、頭孢他定、頭孢曲松、頭孢唑啉、氨曲南的耐藥率為50.00%～70.00%，對氨芐西林的耐藥率>80.00%。見表2。

2.3 產ESBLs菌株耐藥率 766株大腸埃希菌中,產ESBLs菌株占47.78%，產ESBLs菌株與非產ESBLs菌株的耐藥率差異有統計學意義(P<0.05)，產ESBLs菌株對亞胺培南、厄他培南敏感，但對氨芐西林/舒巴坦、頭孢曲松、頭孢他定、左氧氟沙星、環丙沙星、氨曲南、頭孢唑啉、頭孢匹美、復方新諾明、慶大霉素的耐藥率均>70.00%，對氨芐西林達100.00%。產ESBLs 菌株呈現多重耐藥傾向。見表3。

3 討論

大腸埃希菌是醫院感染監測的重點病原菌之一。該院大腸埃希菌標本分布主要集中在尿液和痰液，占66.71%。分離出的大腸埃希菌對亞胺培南、厄他培南敏感，故碳青霉烯類抗菌藥物是臨床治療大腸埃希菌嚴重感染的最佳選擇。大腸埃希菌對除頭孢替坦外的頭孢菌素的耐藥率>50.00%，其對頭孢替坦、β-內酰胺酶抑制劑頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦耐藥率低(<6.00%)，可以經驗性選用。對左氧氟沙星和環丙沙星的耐藥率高，分別為58.88%和64.88%，這與臨床上喹諾酮類廣泛應用，導致細菌的藥物作用靶位的改變有關。

ESBLs主要由腸桿菌科細菌產生，產ESBLs是大腸埃希菌最主要的耐藥機制。耐藥率監測發現該院產ESBLs菌株占大腸埃希菌的47.78%，低于中國CHINET細菌耐藥性監測水平(54.00%)[2]。可能與該院為中醫類醫院，多采用中醫中藥方法輔助控制醫院感染，抗菌藥物使用較西醫院相對較少有關。產與非產ESBLs菌的耐藥率明顯不同。非產ESBLs的大腸埃希菌對亞胺培南、厄他培南、呋喃妥因、哌拉西林他唑巴坦、頭孢哌酮舒巴坦、頭孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因較敏感(耐藥率<2.00%)，耐藥率較高的主要是喹諾酮類、青霉素類、一代頭孢。產ESBLs 大腸埃希菌對碳青霉烯類、頭孢替坦、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、呋喃妥因敏感(耐藥率<10.00%)，對常用的一代、三代頭孢菌素、青霉素類、氨曲南、復方新諾明、慶大霉素、喹諾酮類抗菌藥物耐藥率較高(耐藥率>70.00%)，產ESBLs菌對常用抗菌藥物的耐藥率顯著高于非產ESBLs菌(P<0.05)。臨床上治療產ESBLs菌株嚴重感染首選碳青霉烯類藥物，對于一般感染可選用頭霉素、β-內酰胺酶抑制劑，可聯合氨基糖苷類藥物。多數非產ESBLs菌株感染可選用頭孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因等。

表3 766株大腸埃希菌產與非產ESBLs的耐藥比較

本文結果顯示有耐亞胺培南的產ESBLs大腸埃希菌(耐藥率6.28%)，與國內學者報道的耐藥率不一致[3,4]。隨著亞胺培南等碳青霉烯類藥物的廣泛應用，誘導耐藥菌株產生，耐藥形勢嚴峻。細菌對碳青霉烯類藥物的耐藥機制有：①產生碳青霉烯酶，如KPC型碳青霉烯酶、金屬酶、OXA系列等；②外膜蛋白缺失及產Amp C酶；③引起藥物作用靶位的改變、藥物外排機制等[5]。該院大腸埃希菌耐碳青霉烯類藥物的機制考慮由產生碳青霉烯酶引起，具體有待進一步檢測。

在耐藥基因分布上，CTX-M型、TEM型、SHV型均可見[6]，以TEM型為主[7]。質粒介導[8]及其他形式的耐藥基因傳遞[9]，導致大腸埃希菌產ESBLs耐藥的復雜性，其多藥耐藥問題非常嚴重。為減少產ESBLs株的產生與流行，臨床醫師應及時掌握醫院大腸埃希菌的分布及耐藥趨勢，嚴格限制廣譜β-內酰胺酶類抗菌藥物的應用，若無感染依據，需盡量減少三代頭孢及喹諾酮類抗菌藥物的預防和經驗性應用，應據藥敏選擇抗菌藥物，有策略的替換應用抗菌藥物，延緩細菌耐藥性的出現[10,11]，并積極發揮中醫治療優勢，充分利用中藥的抗菌作用，減少抗菌藥物的使用。

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(2015-03-30 收稿 2015-05-27 修回)

Distribution of Escherichia coli and analysis of its drug resistance in a hospital

ZhouQun,DuanXianchun,RenWei,etal

DepartmentofCadresRespiratoryMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofChineseMedicine,Hefei230031,China

Objective To study the distribution and its drug resistance of Escherichia coli in a hospital in order to introduce a reasonable clinical use of antibiotics. Methods We retrospectively analyzed the distribution and drug resistance rates of 766 strains of clinical Escherichia coli collected in the hospital, made the bacteria identifications by BioMerieux automatic bacteria identification analyzer(VITEK2 compact) and adopted Kirby-Bauer method for the drug-sensitivity tests. The results were determined according to the standard of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) issued in 2014. Results It was found that 766 strains of Escherichia coli were mainly isolated from urine (52.87%) and sputum (13.84%) specimens. There were 366 strains (47.78%) of Escherichia coli producing extended-spectrum β-lactamases (ESBLs). The drug resistance rates of Escherichia coli result in ESBLs to the common antibiotics were significantly higher than those of the non-ESBLs-producing Escherichia coli (P<0.05). Conclusion Escherichia coli is a type of common pathogen leading to urinary tract and respiratory tract infections. It is necessary to strengthen the reasonable clinical use of antibiotics in accordance with susceptibility testing because of the higher drug resistance rate of the ESBLs-producing Escherichia coli.

Escherichia coli;Drug resistance;Extended-spectrum β-lactamases;Antibiotics;Distribution

230031 合肥 安徽中醫藥大學第一附屬醫院干部呼吸內科

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.09.009