淺談風險分析在藥品生產設備清潔驗證中的應用

王 剛

淺談風險分析在藥品生產設備清潔驗證中的應用

王 剛

（泰凌生物制藥江蘇有限公司，江蘇泰州225300）

通過風險分析，確定了設備清潔驗證的方法，包括清潔標記物和清潔溶劑的選擇、清潔方法的選擇、活性物質殘留限度的確定、取樣方式和采樣點的確定、取樣回收率的測定、清潔驗證用分析方法驗證以及持續檢測，為藥品生產企業的清潔驗證提供了新方法和新思路。

藥品；清潔；驗證；風險分析

0 引言

設備的清潔是指在某種條件下，用一種或一套清洗方法，清除殘留在設備上可見及不可見產品組分的過程，并達到可接受的殘留限度。設備的清潔驗證，是企業對其制定的設備清潔規程草案的科學性、合理性、合法性（符合清潔標準）進行確認的過程。

1 清潔標記物和清潔溶劑的選擇

1.1 根據風險分析確定清潔標記物

設備清潔的目的是清除殘留在設備上可見及不可見產品組分的過程，并達到可接受的殘留限度。基于此，可以從殘留物的清潔難易程度、毒性大小進行風險評估。其中，清潔難易程度通常取決于每個品種活性成分的理化性質等信息，如溶解度、黏度、吸附性、活性成分的濃度、生產批量、輔料對清洗效果的影響等。

因此，從風險評估的角度考慮，清潔標記物應該是在同種清潔方法、同種清潔劑的情況下，最難清潔的毒性最大的產品。

1.2 根據風險分析選擇清潔溶劑

設備清潔的目的是清除殘留在設備上可見及不可見產品組分的過程，并達到可接受的殘留限度。基于此，清潔劑的選擇要考慮在清除殘留的同時，不能引入新的有毒物質，因此，清潔劑首先要能溶解清潔標記物，其次要有明確的組成，低毒、易除去，還要有監控清潔劑本身的方法。

對于在水中有一定溶解度的產品，清潔劑應盡量選擇水、熱水、堿性或酸性水；對于不溶水、極性小的產品，清潔劑首選乙醇，其次選擇異丙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲基異丙酮等三級溶劑。但需要注意的是，車間要有防爆和防污染的直排設施。另外，一、二級溶劑，如乙氰、氯仿、環乙烷等不能作為清潔劑使用。

2 清洗方法的選擇

設備清潔的目的是清除殘留在設備上可見及不可見產品組分的過程，并達到可接受的殘留限度。基于此，藥品專用設備不存在上批產品對下批產品的殘留污染問題，通常不需要做殘留驗證，只需做微生物的清潔驗證。而對于共用設備，則必須做殘留驗證。

根據設備材質、結構、幾何形狀等特點，可分為易拆卸可擦洗的設備，最好用擦洗法清潔；不易拆卸或拆卸后也無法擦洗的設備，則只能用沖洗法清潔。

沖洗法要求清洗液能到達設備內表面的各部位，被清洗的標記物必須能溶解在清洗液中，以保證沖洗樣品的一致性及有效性。

3 活性物質殘留限度的確定

通常有4種方法來確定活性物質的殘留限度：

（1）目測檢查，每次清潔必須先目測檢查合格，否則其他的判定標準一定會失敗；

（2）以日劑量的0.1%為考核指標；

（3）以殘留物濃度限度10 mg/kg為考核指標。

其中，方法2和方法3都涉及到設備表面接觸面積的計算，通常可以以單個設備計算活性物質的殘留限度，也可以以整條生產線一起計算活性物質的殘留限度，由于整條生產線設備的總面積遠大于單個設備的面積，也就是限度要小于單個設備的計算限度，相當于降低了污染的風險，因此，可以采用整條生產線的設備計算的限度代替單個設備的限度，作為統一的接受標準。

通常方法2和方法3計算的結果是不同的，有時方法2的限度更低，有時方法3的限度更低，因此，簡單地采用方法2或方法3作為活性物質殘留限度的計算是不合適的，最好兩種方法分別計算，取限度最小者，則是風險最小的。

第4種方法是針對特殊產品而言的，如高毒性、高致敏性的產品，方法2和方法3已經不再適用，由于很低的殘留都可能導致過敏反應等，因此，應選擇最低檢測限度作為標準。

4 根據風險分析確定取樣方式和采樣點

4.1 取樣方式的確定

取樣方式通常包括兩種：擦拭取樣方法和沖洗取樣法。擦拭取樣方法的優點是更直觀、更有效地針對難清潔區域，特別是對已經干燥的或者不溶的殘留物進行清潔和評估。沖洗取樣法是一種間接的取樣方法，直接用取樣瓶收集清洗過程中的最終洗出液即可，沖洗取樣法的缺陷是收集的殘留物濃度很可能代表不了實際殘留物濃度。

由于污染物可能是不易清潔的物質或者吸附在設備縫隙中，所以，從降低風險的角度看，首選擦拭取樣方法，沖洗取樣法可以作為輔助方法。采用擦拭取樣方法時要注意棉簽對分析方法的干擾，如果棉簽選擇不當會干擾殘留的檢測結果，因此，在清潔驗證用分析方法驗證時要重點關注空白棉簽的干擾。

4.2 采樣點的確定

選擇采樣點的原則是必須具有代表性，應包括接觸藥品多的高濃度區，如攪拌槳；結構復雜難以清洗區，如觀察口、閥門、管路接口處等；沖洗也不易達到的區域，如設備投料口等，均應定為擦拭采樣點。取樣過程要注意，清潔用水和取樣用水應采用符合《中國藥典（2010版）》規定的純化水，微生物殘留取樣應先于活性物質殘留取樣；生產過程中可先用飲用水清洗設備，最后用純化水沖洗設備。

5 取樣回收率的測定

擦拭取樣方法并不能將所有的殘留物都收集起來，因此，直接采用擦拭取樣方法的測試結果作為殘留測試結果是不合適的，通常需要將回收率的結果計算進去，這樣才能反映真實的殘留情況。

回收率實則包括了取樣的回收率和檢驗方法的回收率。我們采用HPLC法測定藥物A和藥物B的含量，測定其檢驗方法的回收率均在98%～102%之間，棉簽擦拭回收率主要受到棉簽、溶劑、取樣員的操作和藥物溶出情況的影響，一般回收率在60%以上。因此，為了降低取樣不均勻的風險，取樣人員要經過嚴格的培訓，取樣方法要一致。

6 清潔驗證用分析方法驗證

清潔驗證用分析方法驗證通常不同于產品檢驗的方法，清潔驗證用分析方法必須是經過驗證的，這樣才能保證清潔驗證的有效性。驗證包括：

6.1 檢驗方法的專屬性

專屬性是指在其他成分，如雜質、降解物、輔料等存在的情況下，采用的檢驗方法能較準確地檢測被測物質。

6.2 檢驗儀器的靈敏度

要求使用的儀器在檢測標記物時有足夠的靈敏度。常用的檢驗儀器有：高效液相色譜，是最為廣泛使用的分析方法；紫外可見分光光度法，取決于被測物質吸收度的大小；總有機碳測定法（TOC，Total Organic Carbon），具有靈敏度高（＜1 ppb）、測試快速等優點。

6.3 線性

準備至少5個覆蓋中間濃度的標準溶液（建議在分析方法濃度的50%～150%之間），相關系數不得小于0.99。

6.4 精密度

系統精密度測定應取標準溶液同法測定6次，檢驗結果的RSD應不得大于10%。

6.5 檢測限（LOD）和定量限（LOQ）

清潔驗證分析屬于痕量分析。一般使用信噪比法，LOD約是噪音的3倍，LOQ約是噪音的10倍量。

6.6 標記物溶液的穩定性

應考察標記物溶液至少在室溫和光照下48 h內的穩定性。如穩定性較低，則檢測應在規定的時間范圍內完成，以保證數據可靠。

7 持續檢測

清潔驗證不是一勞永逸的工作，在初始驗證合格后，必須定期監測清潔效果的有效性。企業應制定相應的流程，確保清潔效果持續有效。

8 結語

一個優化的、合格的設備清潔驗證是企業藥品質量的重要保證，是避免污染和交叉污染的有效保障，也是企業節省能源、降低成本的有效方法。設備清潔驗證應根據具體問題，進行具體分析，只有運用風險分析和風險控制的指導思想，才能做到有的放矢，效率和成本兼顧。

2015-07-07

王剛（1978—），男，吉林人，工程師，研究方向：質量管理。