口蹄疫合成肽疫苗研究新進(jìn)展

高佃平

（中牧實(shí)業(yè)股份有限公司，北京600195）

口蹄疫合成肽疫苗研究新進(jìn)展

高佃平

（中牧實(shí)業(yè)股份有限公司，北京600195）

1 口蹄疫概述

口蹄疫是什么？它是由口蹄疫病毒引起的一種偶蹄動(dòng)物病毒性傳染病，臨床上以口部和蹄部皮膚發(fā)生水皰和爛斑為主要特征。具有傳染性強(qiáng)、發(fā)病率高、傳播速度快等特點(diǎn)。雖然此病的病死率不高，但可引起動(dòng)物生產(chǎn)力下降，因此，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)影響很大，OIE也將其列為A類傳染病的首位。

口蹄疫一般癥狀為：發(fā)熱、厭食、水皰（口腔部、蹄部、乳房周圍）、流涎、跛行。臨床診斷中豬只的主要表現(xiàn)在蹄部，豬只得此病的第一表現(xiàn)為突然跛行，然后喜歡跪臥、不愿走動(dòng)，蹄部皮膚、口腔或舌部是否有水皰，厭食等等。

2 我國(guó)現(xiàn)有口蹄疫疫苗的種類

滅活疫苗類：豬口蹄疫O型滅活疫苗。

疫苗研究方向：毒株選育、生產(chǎn)工藝改進(jìn)如懸浮培養(yǎng)、純化濃縮等。

合成肽疫苗：豬口蹄疫O型合成肽疫苗。

疫苗研究方向：研制針對(duì)性更強(qiáng)的B細(xì)胞抗原、效果更優(yōu)點(diǎn)T細(xì)胞位點(diǎn)、佐劑改進(jìn)等。

2.1 滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)與不足

優(yōu)點(diǎn)：全世界證實(shí)滅活疫苗的效果確實(shí)可靠、性能穩(wěn)定。

不足：生產(chǎn)、流通和使用存在生物安全隱患；給檢疫和流行病學(xué)研究帶來(lái)混亂，動(dòng)物多次免疫同樣會(huì)產(chǎn)生NS抗體，難以區(qū)分疫苗免疫和病毒感染；不良反應(yīng)嚴(yán)重，群眾抵觸使用，限制了疫苗的廣泛應(yīng)用，免疫密度嚴(yán)重不足（遠(yuǎn)達(dá)不到85％的最低要求），疫苗浪費(fèi)，難以保證防疫效果。

2.2 豬口蹄疫O型合成肽疫苗（多肽98+ 93）新的針對(duì)性B細(xì)胞抗原

參考中國(guó)與東南亞近年口蹄疫O型9個(gè)拓?fù)湫偷?3個(gè)流行毒株的全基因組序列，設(shè)計(jì)針對(duì)性B細(xì)胞位點(diǎn)，抗原譜更廣，保護(hù)效果更好。多肽98針對(duì)緬甸98毒、多肽93針對(duì)泛亞和豬毒譜系病毒，兩個(gè)序列的組合實(shí)現(xiàn)了對(duì)我國(guó)O型口蹄疫各種毒株的全覆蓋。

新的針對(duì)于豬的T細(xì)胞位點(diǎn)：重新設(shè)計(jì)了更高效針對(duì)豬的T細(xì)胞位點(diǎn)，進(jìn)一步提高疫苗的細(xì)胞免疫功能。

獨(dú)有的肽鏈結(jié)構(gòu)球狀化技術(shù)：使合成肽的空間構(gòu)型與天然抗原完全一致，確保多肽抗原的穩(wěn)定性和高效性。

全新的佐劑：同樣具體促進(jìn)細(xì)胞免疫功能。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)：免疫針對(duì)性強(qiáng)、免疫譜廣，對(duì)緬甸98毒、泛亞毒、新豬毒和舊豬毒等各種O型流行毒株均具有極強(qiáng)的抵抗力；可誘導(dǎo)細(xì)胞免疫功能，重新構(gòu)建了含有更多MHCⅡ型結(jié)合位點(diǎn)的豬口蹄疫專屬T-Helper細(xì)胞表位，進(jìn)一步提升了疫苗的細(xì)胞免疫功能；免疫安全性高，當(dāng)前國(guó)際上使用最安全的口蹄疫疫苗，無(wú)局部和全身過(guò)敏反應(yīng)，無(wú)流產(chǎn)和食欲下降等副反應(yīng)；可區(qū)分免疫與感染，不影響鑒別診斷、檢疫和流行病學(xué)研究，更有利于豬場(chǎng)凈化；無(wú)生物安全隱患，具有配套的免疫檢試劑盒，免疫檢測(cè)高效、快速、準(zhǔn)確；專用新型佐劑確保疫苗更高效、安全。

2.3 關(guān)于豬A型合成肽苗的研究

基于同樣的原理，已經(jīng)完成了A型肽苗、OA二價(jià)肽苗的研制，對(duì)預(yù)防豬A型口蹄疫效果很好，已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，正在申請(qǐng)文號(hào)。

3 口蹄疫疫苗計(jì)劃免疫策略

免疫劑量：豬、牛不管多大日齡都按正常劑量免疫，不可減少注射劑量。羊可以按牛的正常劑量的一半接種。

母源抗體會(huì)干擾免疫反應(yīng)，需合理確定首免時(shí)間。

初次免疫后間隔1個(gè)月要加強(qiáng)免疫一次，不管是何種動(dòng)物，也不管是多大月齡，只要以前沒(méi)接種過(guò)疫苗，初免都應(yīng)間隔1個(gè)月加強(qiáng)1次。即使疫苗株與流行株很匹配，免疫間隔也不得超過(guò)6個(gè)月，最好每4個(gè)月免疫一次，建議加大免疫次數(shù)。

要注重群體免疫力，一定要提高畜群的免疫密度，低的免疫密度很難起到預(yù)防效果（85％）。

免疫期：說(shuō)明書中的6個(gè)月免疫期，但實(shí)踐中由于受免疫操作、免疫密度、機(jī)體狀態(tài)、其他疾病的干擾等原因的影響，有時(shí)可能達(dá)不到6個(gè)月。

3.1 口蹄疫采取的免疫程序

仔豬：初免30～60日齡，具體時(shí)間可根據(jù)母豬的免疫狀況確定，初免后1個(gè)月左右加強(qiáng)一次（商品豬一般5～6月齡出欄，所以加強(qiáng)免疫后可以維持到出欄）。

種母豬：可以在產(chǎn)前1個(gè)多月前免疫，也可和仔豬同時(shí)免，或者是一年3次。

種公豬：每3～4個(gè)月免疫一次。

接種劑量：大小豬均按正常劑量接種。

3.2 口蹄疫疫苗的不良反應(yīng)

正常反應(yīng)：體溫略有升高，減食或停食1～2天等。多數(shù)較輕微，反應(yīng)多呈一過(guò)性。無(wú)需治療，會(huì)自然恢復(fù)。

嚴(yán)重反應(yīng)：與正常反應(yīng)無(wú)實(shí)質(zhì)差異，個(gè)別因機(jī)體差異，反應(yīng)程度加重、持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，需治療才可恢復(fù)。對(duì)癥治療：發(fā)熱用安乃近或復(fù)方氨基比林，往身上潑涼水物理降溫，為防止繼發(fā)感染，可注射抗生素。

過(guò)敏反應(yīng)：注苗后短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的非常劇烈的反應(yīng)，主要癥狀有突然倒地、休克、全身發(fā)軟、發(fā)紺、體溫下降、焦躁不安、共濟(jì)失調(diào)、呼吸困難、流延、肌肉振顫、腹瀉、頻繁排尿排糞、口角出現(xiàn)白沫、鼻腔出血、對(duì)各種刺激反應(yīng)遲鈍等，甚至因搶救不及時(shí)死亡。特點(diǎn)是發(fā)作迅速、反應(yīng)強(qiáng)烈、消退較快，有明顯的遺傳傾向和個(gè)體差異。對(duì)癥治療：0.1％腎上腺素1毫升，30分鐘可恢復(fù)，地塞咪松1毫升（5毫克/1毫升）2小時(shí)恢復(fù)。若治療后仍未恢復(fù)，可30分鐘后再注一次。此外，容易引起懷孕母畜流產(chǎn)。

局部反應(yīng)：注射局部出現(xiàn)腫脹，感染發(fā)炎形成膿腫，一般無(wú)需治療。

3.3 接種疫苗需注意的問(wèn)題

3.3.1 疫苗：保存條件：2℃～8℃。

檢查疫苗：外包裝是否包裝完好，有效期，疫苗是否分層，若分層不能使用，顏色變化（淡粉紅色到白色），從冰箱拿出疫苗后，室溫下放置一段時(shí)間（1～2小時(shí)），讓疫苗恢復(fù)到室溫，用前充分搖勻疫苗。

3.3.2 接種器械和藥物：注射器和針頭必須潔凈無(wú)菌，針頭數(shù)量足夠，保證一頭動(dòng)物一個(gè)針頭，準(zhǔn)備好抗過(guò)敏藥物腎上腺素或地噻米松。

3.3.3 人員：為防止人為機(jī)械傳播，進(jìn)入村莊或牧場(chǎng)時(shí)，須消毒、更換衣帽鞋和洗手。

3.3.4 牲畜要求：待接種的牲畜經(jīng)臨床觀察應(yīng)未見(jiàn)異常。免疫前應(yīng)了解接種動(dòng)物品種、健康狀況、病史、免疫史及過(guò)敏史，凡病弱不應(yīng)接種，臨產(chǎn)母畜（30天內(nèi)）慎用。注射時(shí)要保定牲畜，注射部位要消毒，消毒液一定要接觸到皮膚。一定要確保注射深度到達(dá)肌肉中。如果發(fā)現(xiàn)有漏、冒疫苗液現(xiàn)象，要補(bǔ)種。

3.3.5 禁止野蠻注射，杜絕皮下注射。

3.3.6 注射后要有必要的觀察。

3.4 生物安全體系

中心思想：嚴(yán)格的隔離、消毒和防疫。

關(guān)鍵點(diǎn)：在于對(duì)人和環(huán)境的控制。建立起防止病原入侵的多層屏障，使畜禽生長(zhǎng)處于最佳狀態(tài)的生產(chǎn)體系。