苦杏仁苷研究進(jìn)展

吾熱婭提古麗·克維爾，艾百拉·熱合曼，依米提·熱合曼

（1.新疆大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，新疆 烏魯木齊830046；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京100083）

1 引言

苦杏仁苷（Amygdalin）是在薔薇科植物種仁中普遍存在的含氰基的糖苷化合物，存在于杏、桃，李子、蘋果、山楂、批把等［1，4，14］植物的種仁中。它又稱作苦杏仁甙，苯乙醇腈－β－葡糖苷酸，維生素B17，苯乙醇腈。雖然苦杏仁苷和苦杏仁甙（Laetrile）之間存在著結(jié)構(gòu)和異構(gòu)差別，但是相互等同使用。天然的苦杏仁甙是有活性的右旋物，異構(gòu)化以后形成沒(méi)有活性的左旋物［1］（圖1、圖2）。

2 苦杏仁苷在植物中的含量

除了薔薇科外，它在忍冬科、含羞草科和木犀科植物中也存在，在青梅中含量最高，其次為杏子、黑梅、桃子、紅櫻桃和黑櫻桃、紫梅、黃梅和紅梅，油桃的苦杏仁苷含量最小［2］。苦杏仁苷在桃仁中的含量為2.72%～3.13%，在杏仁中含量為3.62%～5.19%，在烏梅中含量為0.23%［3］，在苦杏仁中含量一般2%～3%［4］。苦杏仁苷含量直接影響杏仁的苦味程度，隨著苦杏仁苷含量增加苦味度也增加。苦杏仁的苦杏仁苷的含量比甜杏仁的苦杏仁苷含量大于1000倍以上［5］。

3 苦杏仁苷的藥理作用

50多年以來(lái)，苦杏仁苷在歐美洲國(guó)家成為非常流行的癌癥藥物［1］。苦杏仁苷在醫(yī)藥上主要用于祛痰止咳劑、輔助性抗癌藥［4］。在日本，桃仁是 Oketsu（血瘀綜合癥治療藥物）的主要成分，并用于很多其他傳統(tǒng)藥物的成分；活血通路凍干注射粉（HTLPI）（6g包含25.3 mg苦杏仁苷和35.8mg芍藥苷）是主要由桃仁和芍藥根提取物組成的傳統(tǒng)中藥藥物，主要適用于治療嚴(yán)重腦出血中風(fēng)過(guò)程中的血瘀阻塞癥狀［6］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明苦杏仁苷和其降解物有抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗腎間質(zhì)纖維化、抗肺纖維化、抗高氧誘導(dǎo)肺損傷、免疫抑制、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗炎等作用［4］。苦杏仁苷有止咳、鎮(zhèn)痛和抗腫瘤作用［3］。在中醫(yī)，苦杏仁苷應(yīng)用于治療哮喘、支氣管炎、肺氣腫、便秘、麻風(fēng)病和白斑病等多種疾病［7］。

Chen等人的研究結(jié)果顯示苦杏仁苷對(duì)人宮頸癌細(xì)胞有顯著的抑制作用，苦杏仁苷可激活細(xì)胞凋亡蛋白酶3的活性，抑制Bcl－3蛋白的活性，從而激活內(nèi)源性細(xì)胞凋亡機(jī)制［8］。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示苦杏仁苷通過(guò)激活細(xì)胞凋亡抑制Hela細(xì)胞生長(zhǎng)［9］。Guo等人的細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示苦杏仁苷可抑制腎臟纖維原細(xì)胞（KFB）的增值和轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子（TGF－β1）在淋巴細(xì)胞中分泌，從而改善腎臟單側(cè)輸尿管梗阻而導(dǎo)致的損害，延遲腎小管間質(zhì)纖維化的發(fā)展［10］。Toll樣接受體（TLRs）和TLR信號(hào)放大作用在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過(guò)程中有關(guān)鍵作用。苦杏仁苷可降低TLR2和TLR4的mRNA和蛋白質(zhì)含量，可抑制MyD88依賴信號(hào)物質(zhì)的表達(dá)，從而改善 ApoE敲出大鼠動(dòng)脈粥樣硬化［11］。Mirmiranpour等人的研究結(jié)果顯示苦杏仁苷對(duì)鏈脲酶素誘導(dǎo)糖尿病大鼠動(dòng)脈血管形成有顯著抑制作用［12］。

4 代謝

當(dāng)口服時(shí)，苦杏仁苷首先在胃中通過(guò)消化酶的酶解分解為野黑櫻苷和葡萄糖。野黑櫻苷在小腸進(jìn)一步分解為苯乙醇腈。苯乙醇腈在腸道菌群的作用下成為苯甲醛。苦杏仁苷口服時(shí)的LD50為880mg/kg［13］。

苦杏仁苷靜脈注射和口服有不同的代謝機(jī)制。苦杏仁苷靜脈注射以后在血液里出現(xiàn)高濃度的苦杏仁苷，幾乎不會(huì)出現(xiàn)氰化物，硫氰酸鹽的濃度不會(huì)發(fā)生變化，注射濃度最高為692.4±173.4ng/mL［6］；然而口服以后血液中的苦杏仁苷的濃度很少，氰化物濃度增加，苦杏仁苷幾乎變成野黑櫻苷。20mg/kg的苦杏仁苷口服以后，大鼠血液里出現(xiàn)的苦杏仁苷最高濃度為1 702.52±108.06ng/mL（1.50±0.08h）［7］。

5 苦杏仁苷的毒性

苦杏仁苷本身無(wú)毒，但通過(guò)酶解有可能（β－葡糖苷酶和α－醇腈酶）產(chǎn)生有毒的氰化物。苦杏仁苷和真菌毒素顯著影響豬卵巢顆粒細(xì)胞的類固醇激素水平。苦杏仁苷或含有苦杏仁苷的物質(zhì)可能影響卵巢的功能［14］。苦杏仁苷對(duì)人的毒性在0.5～3.5mg/kg。苦杏仁苷中毒表現(xiàn)為頭疼、嘔吐、惡心、腹絞痛、頭暈、身體變虛弱、意識(shí)模糊、抽搐、心跳變慢、呼吸衰竭、昏迷，甚至也有可能死亡［13］。

6 酶解

苦杏仁苷作為最常見(jiàn)的生氰苷類化合物，其酶解過(guò)程分三個(gè)階段；第一階段。通過(guò)苦杏仁苷裂解酶酶解苦杏仁苷為野黑櫻苷和葡萄糖；第二階段：野黑櫻苷裂解酶把野黑櫻苷水解為苯乙醇腈和葡萄糖；最后階段：苯乙醇腈在醇腈酶的作用下水解成苯甲醛和HCN。苦杏仁苷在酸性條件（pH值5.0～5.8）下水解為苯乙醇腈，苯乙醇腈在堿性條件下（pH值10）水解成苯甲醛。苦杏仁苷酶的最適溫度為20～40℃，在過(guò)高的溫度下很容易失活。苦杏仁苷酶水解過(guò)程按浸軟程度不同需要30min到6h的時(shí)間［2］。

苦杏仁苷在體外通過(guò)黑曲霉分泌酶降解為野黑櫻苷、苯甲醛、苯乙醇腈和苯乙腈（37℃）［15］。杏仁碾碎以后酶與苦杏仁苷（AD）接觸，并把它降解為葡萄糖、苯甲醛（苦味來(lái)源）和氰化氫（有毒）［16］。

7 檢測(cè)方法

苦杏仁苷檢測(cè)方法有HPLC和H－1－NMR方法，不過(guò)在H－1－NMR檢測(cè)過(guò)程中不需要制備標(biāo)準(zhǔn)樣品和制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，操作簡(jiǎn)單，快速［3］。在血液和其他生物液體中的苦杏仁苷檢測(cè)方法有氣相色譜（GC）、高效液相色譜（HPLC）、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC－MS）和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC－MS－MS）等方法。苦杏仁苷檢測(cè)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（IS）選擇京尼平苷為其內(nèi)標(biāo)物質(zhì)是最好的選擇［7］。

8 提取方法

除了酶解，苦杏仁苷還在熱水中異構(gòu)化從而降解。D－苦杏仁苷在沸水中加熱3min就變成苦杏仁苷的差位異構(gòu)體［2］。由于苦杏仁苷特別容易降解，因此合適的提取方法特別重要。合理的提取方法可防止苦杏仁苷的降解。苦杏仁苷提取可用水、甲醇和乙醇。Kool等人通過(guò)4%的檸檬酸水來(lái)提取杏仁中的苦杏仁苷，防止其異構(gòu)化并提高提取率。Wei－Feng等人通過(guò)比較酸水提取和甲醇提取方法發(fā)現(xiàn)0.1%檸檬酸回流提取是最佳提取方法。Bolarinwa等人通過(guò)使用水提方法和乙醇提取方法提取巴達(dá)木中的苦杏仁苷發(fā)現(xiàn)乙醇提取比水提取更有效，并且最佳提取時(shí)間為100min，水最佳提取溫度為100℃，乙醇最佳提取溫度為78.5℃［2］。在杏仁中除去苦杏仁苷過(guò)程中β－葡糖苷酶的降解和苦杏仁苷的洗脫是關(guān)鍵因素。在乙醇濃度為20%和50%時(shí)苦杏仁苷洗脫和水解程度達(dá)到最大［17］。

9 展望

苦杏仁苷在薔薇科植物種仁中普遍存在，有止咳、鎮(zhèn)痛和抗腫瘤作用，應(yīng)用于治療哮喘、支氣管炎、肺氣腫、便秘、麻風(fēng)病和白斑病等多種疾病。我國(guó)薔薇科植物資源豐富，但目前對(duì)苦杏仁苷的大量開(kāi)發(fā)利用還未實(shí)現(xiàn)。今后研究當(dāng)中，可以利用豐富的資源優(yōu)勢(shì)進(jìn)一步研究并優(yōu)化其提取及純化方法，研究抗腫瘤機(jī)制，進(jìn)行藥品開(kāi)發(fā)，通過(guò)適當(dāng)處理，讓苦杏仁苷參與食品領(lǐng)域。

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