中藥含藥血清實驗動物灌胃給藥劑量探討

中藥含藥血清實驗動物灌胃給藥劑量探討

張宏1，王旭昀2，劉美奇1，秦靈靈3,4,5,孫文3,4,5,劉銅華3,4,5*

(1.北京中醫藥大學東方醫院，北京100078;2.首都醫科大學潞河教學醫院，北京 101149;

3.北京中醫藥大學，北京 100029；4.教育部中醫養生學重點實驗室，北京 100029；

5.中醫養生學北京市重點實驗室，北京 100029)

摘要：目的探討使用中藥含藥血清進行體外實驗的實驗動物灌胃給藥劑量的計算方法。方法目前關于實驗動物灌胃給藥劑量的計算方法有很多種，尚無統一標準。結合近年相關文獻中藥含藥血清制備的體外實驗操作中的動物灌胃給藥劑量現狀，如按成人、按體重、按固定劑量等計算方法，探討相對合理和有效的計算方法。結果給藥量計算應參考成人用量、體質量、血清濃度等因素計算。結論具體計算公式的選擇要根據不同的研究內容而定。

關鍵詞：中藥；含藥血清；給藥劑量；計算方法；動物；體外實驗

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.06.029

中圖分類號：R285.5文獻標志碼： A

文章編號：1003-5699(2015)06-0623-03

作者簡介:張宏(1983-)，女，博士研究生，主治醫師，主要從事內分泌、風濕免疫疾病的中西醫治療及實驗研究。

收稿日期:(責任編輯：趙玉芝2014-09-15)

*通信作者:劉銅華，電話-13801020306，電子信箱-thliu@tom.com

Analysis of traditional Chinese medicated serum intragastric dose

ZHANG Hong1,WANG Xuyun2,LIU Meiqi1,QIN Lingling3,4,5,SUN Wen3,4,5,LIU Tonghua3,4,5*

(1.Dongfang Hospital of Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100078,China;

2.Luhe Teaching Hospital of Capital Medical University,Beijing 101149,China;

3.Peking University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;

4.Chinese Medicine Key Laboratory of Ministry of Education,Beijing 100029,China;

5.Chinese Medicine Key laboratory of Beijing,Beijing 100029,China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the method of caculating Traditional Chinese medicated serum dosage.MethodsAt present about experimental animals to fill the stomach to dose calculation method has a lot of kinds,there is no unified standard.In combination with related literature in recent years of the preparation of traditional Chinese medicine medicated serum in vitro experiments of animals to fill the stomach to dose the status quo,such as weight,according to adults,according to fixed dose calculation method,discusses relatively reasonable and effective calculation method.ResultsWe designed one method of caculating dosage by referencing to age,weight,serum concentration.ConclusionThe specific calculation formula should be selected according to the different research content.

Keywords:traditional Chinese medicine;medicated serum;dosage;computational method;animal;in vitro experiments

中藥或其復方的含藥血清是指將藥物口飼動物后從受體獲得的血清，是屬于中藥血清藥理學的范疇。中藥血清藥理學，是指將中藥或中藥復方經口給動物灌胃一定時間后采血、分離血清，并用此含有藥物成分的血清體外實驗的一種實驗技術。目前采用中藥或其復方的含藥血清代替原藥物的粗提物作為供試材料進行體外實驗的研究方法愈來愈受到諸多中醫科研學者的青睞，然而目前關于實驗動物灌胃給藥劑量的計算方法有很多種，各有優缺點，尚無統一標準。本文主要討論近年中藥含藥血清體外實驗操作動物灌胃給藥劑量現狀，并對其進行歸納總結，以期為該項試驗技術的應用提供參考。

1中藥含藥血清實驗操作動物灌胃給藥劑量計算方法現狀

1.1按固定容量和固定藥物質量給藥李潔等[1]制備白花蛇舌草含藥血清時按固定容量給藥，4 mL/次；黃楓等[2]制備補腎方含藥血清則按固定藥物質量給藥，補腎方1.15 kg/L,補腎方藥液2.5 mL相當于給藥2.875 g。另有一部分學者既參考規定容量給藥法又參考規定質量給藥法，如朱華宇等[3]制備鶴蟾片含藥血清時,鶴蟾片組大鼠按4 mL/kg灌胃，而鶴蟾片混懸液1.365 6 g/kg相當于70 kg成年人每日服用鶴蟾片5.098 5 g等效量的3倍。

1.2按單位體質量藥物給藥量給藥如張亞杰等[4]制備狼瘡方含藥血清時按照生藥10 g/(kg·d)灌胃給藥；張士軍等[5]制備復方六月雪含藥血清時予復方六月雪高劑量組6.6 mg/(kg·d)，中劑量組3.3 mg/(kg·d)，低劑量組1.7 mg/(kg·d)；楊柯等[6]在制備廣西藤茶提取物含藥血清時均根據實驗動物體質量計算給藥量，實驗藥物組給予TTF600 mg/kg和陽性對照組給予拉米夫定80 mg/kg；其他學者如李剛等[7]制備藤茶總黃酮含藥血清時給藤茶總黃酮組600 mg/kg；司亮等[8]制備胰敏顆粒含藥血清時，胰敏顆粒組給予胰敏顆粒混懸液10 mL/kg(含生藥1.6 g/mL)。

1.3按人體等效劑量倍數給藥何婉婉等[9]制備補腎健脾方含藥血清時分別按30.2,60.4,120.8 g/kg劑量灌胃(分別相當于50 kg成人所用劑量的5,10,20倍)；陳彩霞等[10]制備金欣口服液含藥血清時予金欣口服液36 g/(kg·d)(相當于人臨床等效劑量的4倍)。還有的學者按體表面積折算的等效劑量給藥。如陸為民等[11]制備益氣清熱方及其拆方的含藥血清時按體質量表面積折算動物的等效劑量，阿莫西林組0.125 g/kg，益氣清熱方組10 g/kg，黃芪組1.25 g/kg，黃芩組0.83 g/kg；常德有等[12]制備阿膠含藥血清時，按人鼠體表面積法換算,以成人臨床等效劑量的7倍為低劑量組(1 g/kg)，低劑量組的2倍為中劑量組(2 g/kg)，低劑量組的4倍為高劑量組(4 g/kg)。

1.4按臨床成人用量的倍數給藥如張敏鷗等[13]在制備加味當歸補血湯含藥血清予生藥含量相當于成人劑量20倍；陸海英等[14]在制備中藥抗纖靈方含藥血清時灌胃量取10倍于人的有效劑量，即每只大鼠每天灌服藥液3 mL，含生藥6 g，1次/d，共4次;李相輝等[15]在制備復方鰲甲軟肝方含藥血清時給藥劑量按人體劑量的3.5,7,14倍配成低、中、高劑量組灌胃給藥。還有學者按成人給藥中劑量給藥，計算公式為臨床常用量×動物等效面積系數×培養基內血清稀釋度，高、低劑量分別為中劑量的2倍及1/2。如呂曉云等[16]在制備扶正解毒湯(FJD)血清凍干粉時每次低、中、高劑量FJD血清組分別灌胃以FJD 12,6,3 g/(kg·d)。

1.5其他計算方法譬如按單位體質量容量給藥，頓愛社等[17]制備蟾酥膠囊含藥血清時給藥予蟾酥膠囊水溶液6 mL/kg體質量劑量灌胃；韓海嘯等[18]制備赤芍水提物藥物血清時給藥劑量為2 mL/kg(相當于人體用量的10倍)；還有按照中藥血清藥理學研究的通法給藥，給藥劑量為臨床常用量×動物有效劑量系數×培養基內的稀釋度。如劉津羽軍等[19]制備紅藤含藥血清時每日灌胃給予按照臨床給藥量換算好的大鼠給藥劑量給藥。

綜上可以看出現在使用的給藥劑量計算方法有很多中，其中：1)采用按固定容量給藥、按單位體質量容量給藥、按固定藥物質量給藥、按單位體質量藥物質量給藥、既規定容量又規定質量給藥按等效劑量倍數給藥的方法只需要規定容量或質量或單位體質量容量或單位體質量質量便可方便進行操作，但其依據性不強，容易出現錯誤，不能較準確反映人與動物血清不同之處及效量關系不同之處[20-21]；2)按等效劑量倍數給藥、按體表面積折算的等效劑量給藥、按給藥中劑量=臨床常用量×動物等效面積系數×培養基內血清稀釋度、按中藥血清藥理學研究的通法給藥(給藥劑量=臨床常用量×動物有效劑量系數×培養基內的稀釋度)、灌胃劑量根據60 kg體質量成人的用藥劑量/體表面積,乘以大鼠相應體表面積進行計算的方法給出給藥的計算公式，相對有一些依據，臨床可重復性操作水平提高，可以相對有效的評估反應系的效量關系；3)按給藥相當于臨床劑量具體質量給藥、按臨床成人用量的倍數給藥參照臨床實際用量，給予臨床劑量的成倍，一般10～20倍給藥，相對計算明確，但亦容易出現誤差。以上體外實驗操作中給藥劑量計算方法都需結合臨床預實驗情況，進一步評定是否是合適藥量。

2總結

采用中藥或其復方的含藥血清代替原藥物的粗提物作為供試材料加入反應體系中，進行體外實驗，可以提高中藥或其復方體外實驗結果的科學性、可信性。其優點在于：1)進行體外實驗的相對可控性強，藥物效應易于檢測；2)能夠一定程度上避免中藥粗制劑本身的理化性質對實驗結果的干擾；3)實驗條件更接近于藥物在體內產生效應的內環境，可以比較真實地反映中藥的藥效，深入揭示藥物的作用機制。但同時也存在一些缺點：血清藥理學只有20余年的發展史，相對開展時間短暫，缺乏很好的規范性，制備含藥血清的操作方法不統一，尤其是含藥血清體外實驗操作中動物灌胃給藥劑量不統一，沒有一個很好的評價標準，相當多實驗可重復性不強。因此含藥血清體外實驗操作中動物灌胃給藥劑量的計算標準成為挾制其發展的重要因素。

筆者參考上述方法，結合前期所作實驗研究推薦使用如下公式作為灌胃給藥量參考：每日給藥量=成人日用量/成人標準體質量×人與動物等效劑量換算倍數/培養基中含藥血清濃度。人與大鼠等效劑量換算為人∶大鼠=1∶5～7(多選1∶6)。如：人日用量為1 g/kg體質量，大鼠6 g/kg體質量即為等效劑量。具體計算公式的選擇要根據不同的研究內容而定。

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