兩種POCT法測定血HCG的比對研究

袁曉華，楊春菊，胡惠萍，張 偉

(黃石市中心醫(yī)院檢驗科，湖北 黃石435000)

兩種POCT法測定血HCG的比對研究

袁曉華，楊春菊，胡惠萍，張 偉

(黃石市中心醫(yī)院檢驗科，湖北 黃石435000)

目的分析金標斑點POCT法和免疫熒光POCT法檢測血HCG的性能。方法將306例樣本按照濃度從低到高分為6個組，第1組86例、第2組60例、第3組14例、第4組68例、第5組41例、第6組37例。用電化學發(fā)光法(ECLIA)、金標斑點POCT法、免疫熒光POCT法平行檢測這6個組的血HCG濃度。以ECLIA法為標準對金標斑點POCT法和免疫熒光POCT法的結果進行配對資料的t檢驗。結果(1)免疫熒光POCT法的比對：第1組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的符合性好；2～5組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異無統計學意義；第6組樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果的差異有統計學意義(P＜0.05)。(2)金標斑點POCT法的比對：1～2組樣本，金標斑點POCT法和ECLIA法的符合性好；3～4組樣本，金標斑點POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異有統計學意義。結論免疫熒光POCT法能簡便、快速、準確的檢測血HCG的濃度，且檢測的準確度比金標斑點POCT法好，檢測的量程比金標斑點POCT法寬。免疫熒光POCT法更適合于目前各類醫(yī)院血HCG的急診檢驗。

人絨毛膜促性腺激素；即時檢驗(POCT)；免疫熒光干式定量法；電化學發(fā)光法(ECLIA)

隨著免疫技術的發(fā)展，即時檢驗(Point-of-care testing，POCT)在檢驗醫(yī)學中的新領域受到人們的關注和重視，它能快速的發(fā)出檢驗報告，對急診搶救的意義重大，已擴展到監(jiān)測血凝狀態(tài)、心肌損傷、酸堿平衡、感染性疾病和激素水平監(jiān)測等方面[1]。人絨毛膜促性腺激素(HCG)是一種糖蛋白激素，尿液定性檢測HCG只能診斷早孕，而血液定量檢測HCG能診斷早孕和宮外孕，能動態(tài)的觀察先兆流產及判斷預后，還可用于惡性葡萄胎、絨癌的輔助診斷及治療后隨訪的觀察指標[2]。POCT法檢測血HCG，樣本可用全血、血清或血漿，檢測過程不超過20min，大大縮短了報告時間，現分析這種方法的檢測性能。

1 材料與方法

1.1 一般材料2014年10月1日至2014年10月31日，檢驗科8 h內檢測的血HCG樣本共306例。用ECLIA法檢測的濃度范圍為＜0.1～141428.0 mIU/ml。把這些樣本分為6個組：＜2 mIU/ml為第1組86例；2～25 mIU/ml為第2組60例；26～500 mIU/ml為第3組14例；501～15000 mIU/ml為第4組68例；15001～50000 mIU/ml為第5組41例；＞50000 mIU/ml為第6組37例。

1.2 儀器和試劑 ECLIA法，德國羅氏診斷有限公司生產的cobas6000生化免疫分析系統e601模塊和配套的絨毛膜促性腺激素及β亞單位檢測試劑盒(電化學發(fā)光法)，質控品為兩個濃度的cobas Cobas preciControl Universal和RANDOX非定值血清(人)水平2和水平3，均值分別為5.97 mIU/ml、46 mIU/ml、25.8 mIU/ml、391 mIU/ml。免疫熒光POCT法，韓國BodiTech Med Inc制造的i-CHROMATM Reader免疫熒光分析儀和配套的總β人絨毛膜促性腺激素檢測試劑盒(免疫熒光干式定量法)。金標斑點POCT法，奧普U2型金標斑點法定量讀數儀及配套β人絨毛膜促性腺激素檢測試劑盒。

1.3 方法 每天在白班結束時，用兩種POCT法重新測試當天8 h內用ECLIA法檢測過的血HCG樣本，記錄結果。

1.3.1 POCT法的操作 嚴格按照試劑盒說明書，取血清進行操作，然后在分析儀中掃描并讀取結果。

1.3.2 ECLIA法的操作 遵照試劑盒說明書中有關e601的相關指導，并參照分析儀操作手冊來設置免疫分析儀的操作方法，＞10000 mIU/ml的樣本，儀器自動1:100稀釋。每天用四個濃度的質控品進行質量控制。

1.4 統計學方法 應用SPSS16.0軟件對2～6組各檢測方法的結果進行配對資料的t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩種POCT法檢測低濃度血HCG的符合性 免疫熒光POCT法檢測第1組的86例樣本，其中有82例＜2 mIU/ml(最小表達單位)，符合率為95.3%。金標斑點POCT法檢測第1組的結果全部＜25 mIU/ml(最小表達單位)，符合率為100%，金標斑點POCT法檢測第2組的60例樣本，其中有49例＜25 mIU/ml(最小表達單位)，符合率為81.7%。說明兩種POCT法對于低濃度血HCG的檢測和電化學發(fā)光法的符合性好。

2.2 免疫熒光POCT法檢測中、高濃度血HCG的符合性2～6組的樣本220例，對這幾組的免疫熒光POCT結果和ECLIA結果分別進行配對資料的t檢驗，t值分別為1.824、1.913、1.741、1.975、2.357，其中2～5組的P值均＞0.05，說明當血HCG濃度范圍在2～50000 mIU/ml時免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異無統計學意義。第6組的P值＜0.05，說明當血HCG濃度＞50000 mIU/ml時，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異有統計學意義，見表1。

表1 免疫熒光POCT法和ECLIA法檢測220例樣本的一致性

2.3 金標斑點POCT法檢測中、高濃度血HCG的符合性3～4組的樣本82例，對這兩組的金標斑點POCT法結果和ECLIA法結果進行配對資料的t檢驗，t值分別為2.333和2.608，P值均＜0.05，顯示當血HCG濃度范圍在25～15000 mIU/ml時金標斑點POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異有統計學意義，見表2。

表2 金標斑點POCT法和ECLIA法檢測82例樣本的一致性

3 討 論

HCG在人的血液中有β單位、α亞單位、高糖基化HCG、缺刻HCG等，是維持妊娠的重要激素之一[3]。近20年來，異位妊娠的發(fā)生率持續(xù)上升，已成為孕早期死亡的常見原因[4]。因為HCG定性檢測不能提示胚胎發(fā)育、區(qū)分流產、宮外孕、葡萄胎等多種病理情況，所以HCG定量檢測替代定性檢測這一觀念得到了認可和普及。臨床上也由此對血HCG的檢測技術提出了更高的要求，一是要求檢測準；二是要求檢測快。應運而生的第一代POCT方法是膠體金試紙法，該方法與化學發(fā)光法比較，差異有統計學意義[5]，這里不做討論。第二代POCT方法是金標斑點定量檢測系統和免疫熒光干式定量法。為此，我們做了這兩種方法的比對實驗來驗證哪一種POCT法更適用于臨床，這對于人工授精試管嬰兒植入成功的早期觀察，某些宮外孕以及滋養(yǎng)層細胞腫瘤手術和化療療效觀察可能有更多的參考意義[6]。

我們選擇了以羅氏Cobas6000及配套電化學發(fā)光檢測系統為比對方法，以免疫熒光POCT法和金標斑點POCT法為實驗方法，平行檢測了306例臨床隨機樣本。實驗結果表明：(1)免疫熒光POCT法對于＜2 mIU/ml的低濃度血HCG樣本和ECLIA法的符合性好。對于濃度范圍在2～50000 mIU/ml的中、高濃度血HCG樣本，免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果比較差異無統計學意義。只有當血HCG濃度＞50000 mIU/ml時免疫熒光POCT法和ECLIA法的檢測結果差異才有統計學意義。可是當血HCG結果在＞50000 mIU/ml這種超高濃度時發(fā)生一定程度的偏移，已經不影響醫(yī)生對病情的診斷。(2)金標斑點POCT法對于＜25 mIU/ml低濃度血HCG樣本和ECLIA法的符合性好，對于濃度范圍在25～15000 mIU/ml的中、高濃度血HCG樣本，金標斑點POCT法和ECLIA法檢測結果差異有統計學意義。

以上實驗結果說明免疫熒光POCT法在檢測血HCG濃度的準確性方面要優(yōu)于金標斑點POCT法。另外免疫熒光POCT法的最小濃度表達單位為＜2 nmIU/ml，比金標斑點POCT法低了10倍，最大濃度表達單位為300000 mIU/ml，比金標斑點POCT法高了20倍。這種高量程的檢測方法在低濃度時能讓醫(yī)生直觀確切的知道血HCG濃度，在高濃度時不僅節(jié)省了稀釋樣本的時間，提高了檢測效率，還節(jié)約了試劑成本，降低了犯錯誤的機會。結論：免疫熒光POCT法能簡便、快速、準確的檢測血HCG的濃度，且檢測的準確度比金標斑點POCT法好，檢測的量程比金標斑點POCT法寬。免疫熒光POCT法更適合于目前各類醫(yī)院血HCG的急診檢驗。

[1]萬本愿,姜青龍.POCT的臨床應用及存在問題[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2011,29(4):387-390.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:520-521.

[3]方從舉.膠體金試紙法和化學發(fā)光免疫法檢測全分子HCG的觀察[J].臨床實驗醫(yī)學雜志,2008,7(5):41-45.

[4]許淑祥.HCG分子結構與免疫定量分析[J].中國醫(yī)學檢驗雜志,2004,2:288-31.

[5]盧桂香.膠體金試紙法和化學發(fā)光免疫法檢測全分子HCG分析[J].當代醫(yī)學,2012,18(5):25-26.

[6]高曉霞.196例POCT法與化學發(fā)光法血HCG檢測結果的分析[J].中國醫(yī)藥導刊,2012,14(8):1412-1413.

Comparative study of two point-of-care testing methods in detecting blood HCG.

YUAN Xiao-hua,YANG Chun-ju,HU Hui-ping,ZHANG Wei.Department of Clinical Laboratory,Huangshi Central Hospital,Huangshi435000, Hubei,CHINA

ObjectiveTo analyze the performance between two point-of-care testing methods POCT,dot immunogold method and immunofluorescence technique)for detecting human chorionic gonadotropin(HCG).MethodsA total of306 cases of samples were divided into six groups according to the concentration from low to high:86 cases in group1,60 cases in group2,14 cases in group3,68 cases in group4,41 cases in group5,37 cases in group6.The blood HCG concentration of the6 groups was detected by electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA),Dot immunogold method and immunofluorescence technique.On the basis of ECLIAmethod,the performances of dot immunogold method and immunofluorescence technique were analyzed byttest.Results(1)Immunofluorescence technique and ECLIAwere found in good accordance in group1.The detection results of the two methods showed no statistically significant difference in group2～5,while they had statistically significant difference in group6(P＜0.05). (2)Dot immunogold method and ECLIA were in good accordance in group1～2,and the detection results of the twomethods had statistically significant difference in group3～4.ConclusionImmunofluorescence technique is simple,rapid and accurate for the detection of blood HCG,which has better accuracy and wider detection range than dot immunogold method.Thus,immunofluorescence technique is more suitable for the emergency test of HCG in hospitals at present.

Human chorionic gonadotropin(HCG)；Point-of-care testing(POCT);Immunofluorescence technique;Electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA)

R446.61

A

1003—6350（2015）22—3332—03

2015-03-10)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1207

楊春菊。E-mail：184951791@qq.com