蝴蝶蘭組織培養快繁技術研究初報

摘 要 為探索蝴蝶蘭快繁的有效途徑，將蝴蝶蘭無菌種子播種在不同培養基中培育實生苗，從而篩選種子最佳萌發培養基。實驗初步表明，不同培養基對蝴蝶蘭種子的生長萌發有較大影響，1/2MS培養基利于蝴蝶蘭種子的萌發，不會出現萌發后漸漸枯黃的現象；在此基礎培養基中添加“6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L”可以促進種子萌發，節約成本。“MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L”培養基組合利于叢生芽增殖成苗，提高移栽成活率，蝴蝶蘭長勢良好，畸形率極低。

關鍵詞 蝴蝶蘭；組織培養；培養基；種子萌發

中圖分類號：S682.31 文獻標志碼：A 文章編號：1673-890X（2015）31-023-02

知網出版網址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.s.20151205.1608.024.html 網絡出版時間：2015/12/5 16：08：00

蝴蝶蘭（Phalaenopsis amabilis）又稱蝶蘭，屬熱帶氣生蘭，多年生草本植物。蝴蝶蘭屬是著名的切花種類，是國際上最具商業價值的四大觀賞熱帶蘭之一[1]。蝴蝶蘭有“洋蘭皇后”的美稱，隨著國內市場需求量的增加，蝴蝶蘭生產前景將越來越好，具有極高的經濟價值。由于蝴蝶蘭屬于單軸性氣生蘭，種子細小，胚及胚乳等發育不完全[2]，不適合用傳統方法進行播種。利用組織培養進行蝴蝶蘭種苗大量繁殖是一個快速、便捷、不受時間約束的有效途徑。

1材料與方法

1.1試驗材料

試驗材料選用哈爾濱市農業科學院溫室栽培的盆栽蝴蝶蘭白花紅唇自交品種（代號W1）。

1.2試驗方法

1.2.1 人工授粉

在3月末至4月初，蝴蝶蘭開花的第3天進行人工授粉。首先將鑷子用酒精消毒，然后將父本花粉頭取下放入母本柱頭上，1株蝴蝶蘭最多授粉2朵花，以防營養缺失。授粉后做好記錄。授粉花朵逐漸凋萎，子房逐漸膨大成蒴果。4個月后取下未開裂果莢備用。

1.2.2 果莢處理

在無菌超凈臺內將果莢用0.1%的升汞滅菌10 min，再用75%酒精滅菌3 min，滅菌水清洗3～5次，用無菌濾紙吸干表面多余水分。然后用解剖刀縱向切開果莢，將細小的種子均勻撒在培養基上，每個果莢用培養基5瓶。

1.2.3 培養基

試驗用基礎培養基有MS、KYOTO、1/2MS，添加不同濃度激素及蔗糖3%、瓊脂6 g/L，pH 調至5.6～5.8。配制好的培養基分裝滅菌備用。

1.2.4 培養條件

遮光暗培養7 d，溫度保持25℃，7 d后采用光強1000～1500 lx、光照時間15 h/d進行培養。1個月后調查萌發率。

2結果與分析

2.1不同基礎培養基對蝴蝶蘭種子萌發的影響

將蝴蝶蘭種子分別接種到MS、KYOTO、1/2MS培養基中，每種培養基接種20瓶，30 d后觀察萌發情況。從表1可以看出，3種培養基中1/2MS培養基萌發率較高。

2.2不同激素配比培養基對蝴蝶蘭種子萌發的影響

在1/2MS培養基中分別加入6-BA 1.0 mg/L、2.5 mg/L、4.0 mg/L，NAA 0.2 mg/L、0.6 mg/L、1.0 mg/L，共得到表2的9組培養基組合。結果表明，播種90 d的種子萌發率都在60%以上，其中“1/2MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L”組合的培養基萌發率最高，達到98%左右（見表2）。播種30 d后，種子由黃變綠、膨大；播種60 d后，1/3的種子萌發出小葉片；90 d后，基本全部萌發，小苗高約0.6 cm。

2.3不同激素配比的培養基對叢生芽增殖和成苗的影響

為減少污染、節約成本，本試驗采用3步成苗法：播種→分瓶擴繁→壯苗培養。接種時按照大小分級，每1000 mL蝴蝶蘭專用瓶移入20個帶葉小苗。以MS作為基礎培養基，在培養基中分別加入6-BA 2.0 mg/L、3.0 mg/L、4.0 mg/L，NAA 0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.3 mg/L。從表3中可以看出，培養基“MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L”生長快、幼苗壯、小苗達標率高。

2.4移栽

小苗高約6 cm、具有3～5條根時，把培養基瓶打開，移到溫室環境下煉苗2周，然后將小苗栽于水藻中，一般成活率可以達到75%左右，“MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L”培養基組合的成活率可以達到85%。

3小結與討論

從授粉開始經過120 d，發育成熟的蝴蝶蘭種子胚呈淡黃色，接種到培養基中易均勻散播、生長較快、原球莖易形成、顆粒整齊飽滿、成苗快。不同培養基對蝴蝶蘭種子的生長萌發有較大影響，1/2MS培養基利于蝴蝶蘭種子的萌發，不會出現萌發后漸漸枯黃的現象；在此基礎培養基中添加“6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L”可以促進種子萌發，節約成本。“MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L”培養基組合利于叢生芽增殖成苗，提高移栽成活率，蝴蝶蘭長勢良好，畸形率極低。

參考文獻：

[1]盧思聰.蘭花栽培入門[M].北京：金盾出版社，1990：19.

[2]杜廣平.蝴蝶蘭種子無菌培養的研究[J].黑龍江農業科學，2010（10）：16-18.

（責任編輯：丁志祥）