鷓鴣菜人工再生苗繁育試驗(yàn)初報(bào)

摘 要 為了優(yōu)化鷓鴣菜人工育苗方法，為工業(yè)化生產(chǎn)鷓鴣菜提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。利用植物細(xì)胞具有“全能性”，采用鷓鴣菜體細(xì)胞培育出再生苗種。結(jié)果在溫度為20～25℃，光照強(qiáng)度為27～36 μmol/（m2·s），光照周期為12 h∶12 h的條件下，20 d左右可培育出種苗。種苗在潮間帶放養(yǎng)即可發(fā)育成完整藻體。

關(guān)鍵詞 鷓鴣菜；組織培養(yǎng)；人工再生苗

中圖分類號(hào)：Q943.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號(hào)：1673-890X（2015）01-016-02

知網(wǎng)出版網(wǎng)址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.S.20150127.1345.007.html 網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015/1/27 13：45：40

鷓鴣菜（Caloglossa leprieurii）屬于紅葉藻科，是暖溫性海藻，分布于我國(guó)浙江、福建以及廣東沿海[1]。其始載于明代1530年間的福建《漳浦縣志》，今《中華海洋本草》有詳細(xì)記載，具有悠久的藥用歷史[2]。鷓鴣菜含有海人草酸及海人草素，因其具有驅(qū)蟲作用，一直被用來治療蛔蟲病[3]和由蟲積或蟲咬引起的疾病，我國(guó)中成藥美舌藻片[4]和復(fù)方鷓鴣菜散[5]便是以鷓鴣菜為主要原料制成的。此外，鷓鴣菜的降壓作用機(jī)理也有學(xué)者探討。隨著對(duì)鷓鴣菜的深入研究，它將會(huì)成為應(yīng)用廣泛的海洋植物藥用資源。但是由于環(huán)境變化及人為破壞等原因，鷓鴣菜資源量正逐步減少，無法滿足社會(huì)需求。我國(guó)學(xué)者曾進(jìn)行鷓鴣菜人工栽培研究，雖然已經(jīng)取得成功，但仍未達(dá)到規(guī)模化生產(chǎn)水平，目前藥農(nóng)仍靠自然生長(zhǎng)采收鷓鴣菜。

本研究選取鷓鴣菜孢子體組織在一定條件下培育出再生苗，旨在優(yōu)化鷓鴣菜人工育苗的方法，為工業(yè)化繁殖鷓鴣菜提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用藻種來源于濠江出海口潮間帶，每年3月中旬—4月上旬為最佳采收時(shí)期，此時(shí)采收的鷓鴣菜絕大多數(shù)為鷓鴣菜的孢子體（二倍體）。

試驗(yàn)用水鹽度為6‰～13‰，pH7.9～8.4，其他理化指標(biāo)應(yīng)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB 11607-1989）和無公害食品之海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（NY 5052-2001）要求，文中稱培育用水。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1 消毒液的配制

在培育用水中添加青霉素鈉，使其含量為20～60 TU/L，備用。

1.2.2 材料預(yù)處理

用培育用水洗去鷓鴣菜上的雜藻和浮泥，在消毒液中浸泡滅菌20～40 min后，用解剖鏡挑選形態(tài)完整、細(xì)嫩、無四分孢子、無囊果的藻體作為組織塊供體。

1.2.3 培養(yǎng)基的配制

將培育用水用0.22 μm孔徑的無菌微孔濾膜過濾除去顆粒狀異物，添加營(yíng)養(yǎng)鹽調(diào)配成營(yíng)養(yǎng)液作為培養(yǎng)基。

1.2.4 附苗基處理

選用200～300目的篩絹，根據(jù)培養(yǎng)容器裁剪成合適大小，使用前用淡水洗凈并在開水中煮沸30 min后晾干備用。

1.2.5 組織塊的制備與附著

在解剖鏡下將作為供體的鷓鴣菜切割成1～3 mm大小的組織塊，用消毒液漂洗干凈。將切好的鷓鴣菜組織塊移放到準(zhǔn)備好的篩絹上，篩絹將作為組織塊的附著基，用噴壺向排列好的組織塊多次、少量噴灑培養(yǎng)液，保持篩絹濕潤(rùn)3～4 h，使組織塊基本粘連在篩絹上。

2結(jié)果與分析

經(jīng)過20 d的培育，肉眼可見組織塊長(zhǎng)出嫩苗。嫩苗呈葉狀，這些帶葉狀嫩苗的組織塊可作為新種苗放養(yǎng)到海區(qū)。將鋪滿種苗的篩絹固定在出海口潮間帶巖石上，再生苗可發(fā)育成完整植株。結(jié)果表明在溫度為20～25℃，光照強(qiáng)度為27～36 μmol/（m2·s），光照周期為12 h∶12 h的條件下，20 d左右可培育出種苗。種苗在潮間帶放養(yǎng)即可發(fā)育成完整藻體。放養(yǎng)時(shí)可以在篩絹層上再鋪上網(wǎng)簾或棉繩，隨著種苗的繼續(xù)發(fā)育，網(wǎng)簾和棉繩也將成為附著基，既增加鷓鴣菜的產(chǎn)量又便于采收。

試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)帶叉點(diǎn)的組織塊更容易培育出再生種苗，且種苗更多、更大、更健壯，這說明叉點(diǎn)處的細(xì)胞再生能力更強(qiáng)，更適宜作為組織塊供體。

3小結(jié)

鷓鴣菜是一種副作用極低的重要中藥資源，野生資源量不足制約了其新功能的開發(fā)利用，也阻礙了相關(guān)藥企發(fā)展。試驗(yàn)證實(shí)了鷓鴣菜組織在植物激素和一定條件的誘導(dǎo)下，可以培育出再生種苗，而且這些種苗都能發(fā)育成完整個(gè)體。人工再生苗可以大大提高鷓鴣菜的產(chǎn)量，滿足生產(chǎn)研究的需求，實(shí)現(xiàn)資源的可持續(xù)利用，使鷓鴣菜實(shí)現(xiàn)由傳統(tǒng)種植向現(xiàn)代化生產(chǎn)轉(zhuǎn)變。本研究除了對(duì)鷓鴣菜的快速繁育具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值外，還為其他經(jīng)濟(jì)海藻的人工栽培研究提供了參考。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)帶叉點(diǎn)的組織塊更容易培育出再生種苗且種苗更多、更大、更健壯，說明叉點(diǎn)處的細(xì)胞再生能力更強(qiáng)，更適合作為組織塊供體。本研究證實(shí)了孢子體適宜作為組織塊供體，但其具有一定的季節(jié)性。如何保存好組織供體或使鷓鴣菜的不同世代都適合作為組織供體，確保工業(yè)化生產(chǎn)的連續(xù)進(jìn)行，有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]李偉新，朱仲嘉，劉鳳賢.海藻學(xué)概論[M].上海：上海科技出版社，1982：82-83.

[2]管華詩，王曙光.中華海洋本草（第2冊(cè)）[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2009： 143-146.

[3]中國(guó)人民解放軍后勤衛(wèi)生部，上海醫(yī)藥工業(yè)研究院.中國(guó)藥用海洋生物[M].上海：上海人民出版社，1977：32-44.

[4]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草（第1冊(cè)）[M].上海：上海科技出版社，1999：482.

[5]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑（第19冊(cè)）[S].1989：119.

（助理編輯：易婧；責(zé)任編輯：敬廷桃）