EDTA-K2抗凝血對生化檢驗結果的影響及校正方法分析

蘇東 桂滿元 王永娜 趙亞南

臨床生化檢驗中，常常遇到生化標本太少或者存在溶血，影響生化檢驗結果準確性、及時性；同時部分患者（新生兒、兒科患者、燒傷患者、ICU室患者）重新采血存在困難，而這類患者往住是血常規(guī)檢測與生化檢測基本上是同步進行的，筆者嘗試用EDTA-K2抗凝血經(jīng)離心后取血漿替代血清標本進行常用生化項目檢測，旨在分析EDTA-K2抗凝血對生化檢驗結果的影響，分析原因并提出相關的處理措施，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料及試劑 無抗凝劑管或促凝管、EDTAK2抗凝管，由湖南瀏陽醫(yī)用儀具廠提供。檢測項目原理及試劑：總膽紅素（TBIL，氧化法）、直接膽紅素（DBIL，氧化法）、總蛋白（SP）、白蛋白（A）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、總膽汁酸（TBA，循環(huán)酶法）、尿素（BU，酶法）、肌酐（Cr，苦味酸法）、尿酸（UA，酶法）、血糖（GLU，己糖己酶法）、血淀粉酶（AMS）、磷（P）、鎂（Mg）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、載脂蛋白A1（APOA1）、載脂蛋白B（APOB）等項目由山東3V生物科技有限公司生產(chǎn)，C反應蛋白（CRP）、抗O（ASO）、RF、IgG、IgM、IgA、C3、C4均為永和陽光生物科技有限公司生產(chǎn)。缺血修飾白蛋白（IMA）由長沙熙康生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 儀器 AU2700全自動生化分析儀，長沙湘智TDZ5-WS低速離心機。

1.3 標本來源 本院住院部同一患者同時采取血常規(guī)及血生化標本，其中血常規(guī)足夠量及肉眼未見小凝塊，所有標本經(jīng)離心后無明顯溶血及乳糜狀。

1.4 質控物 朗道質控物，批號：ZX21511N。

1.5 方法 先用朗道質控物進行測定，所有項目均在控，進行下一步分析。取同一患者的血常規(guī)剩余血及血生化標本，經(jīng)離心后取血漿或血清在AU2700生化析儀上進行相關生化項目分析，所得結果進行統(tǒng)計學分析。

1.6 統(tǒng)計學處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件對本組數(shù)據(jù)進行分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義，同時對絕大多數(shù)生化項目進行直線回歸及相關性分析。

2 結果

兩組標本生化項目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比較差異有統(tǒng)計學意義外，其他項目無統(tǒng)計學意義；直線回歸方程及相關性良好（r2>0.80）的 生 化 項 目 有 TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。結果見表1。對結果相差太大的生化項目（ALP、IMA）不進行直線回歸方程及相關性分析，但分析其原因。

表1 血清組與EDTA-K2抗凝血漿組生化結果及直線回歸與相關系數(shù)分析

3 討論

本實驗研究發(fā)現(xiàn)，EDTA-K2抗凝血漿組與血清組在肝、腎功能、血糖血脂、心肌酶、免疫球蛋白等多數(shù)項目比較差異無統(tǒng)計學意義，與有關文獻[1-3]略有差異，筆者認為有兩個方面的原因：其一是筆者所采用的標本是住院患者，來源廣泛且高、低值相差大，而有關文獻標本來源是體檢者，結果在一定范圍內波動，故統(tǒng)計學處理方面會有差異；其二可能存在不一樣廠家試劑或方法學不一致。

EDTA-K2抗凝原理是EDTA-K2中的EDTA成分可與Ca2+形成配位化合物，而Ca2+是內、外凝血途經(jīng)的必需因子，所以血液不能凝固，從而起到抗凝作用，因此EDTA-K2抗凝血漿組中的鈣、鎂含量下降，與文獻[1-4]報道一致。

此次實驗中發(fā)現(xiàn)EDTA-K2抗凝血漿組ALP的檢測值明顯低于血清值，甚至有個別檢測值為負數(shù)或零，呈明顯的抑制狀態(tài)，文獻[5]認為這主要因為ALP檢測中的中間產(chǎn)物對硝基苯酚需要在堿性溶液中轉變?yōu)轷浇Y構，呈現(xiàn)較深的黃色而進行比色分析，而EDTA在抗凝過程中產(chǎn)生了氫離子，而使溶液成中性甚至酸性，故檢測受到抑制；EDTA-K2抗凝血漿組IMA的檢測值明顯高于血清值，這是否與EDTA-K2中的某些成分能促進缺血修飾白蛋白檢測反應，有待進一步驗證。

臨床護理工作中，多個項目檢測抽血時，一般會按照如下順序進行抽血：凝血功能→血常規(guī)→血生化→免疫等[6]，對于某些患者（新生兒、兒科患者、大面積燒傷患者等）會存在抽血困難，抽取一、二管血后，適當擠壓抽完后面部分項目（生化、免疫等），往往會造成輕度溶血，而溶血標本對部分生化項目檢測有影響[7-10]。

EDTA-K2抗凝血對血生化項目的影響，各文獻[1-5，11-13]說法不一，有學者雖提出建立抗凝血漿結果參考值或進行校正，但未見相關報道[12]。本文參照文獻[14]，進行直線回歸及相關性分析，經(jīng)驗證EDTA-K2抗凝血多數(shù)生化項目結果在本實驗室內可替代血清的結果，可用于臨床，這不僅可以減少“醫(yī)源性貧血”的隱患[15]，而且對于某些溶血、血少患者需重新抽血檢測時，縮短樣本檢測周期有著重要的意義[16-17]。

綜上所述，EDTA-K2抗凝血與血清在多數(shù)生化項目上相關性良好，其檢測結果經(jīng)校正后可以替代血清用于臨床。

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