劉 貴
(重慶市涪陵區李渡街道畜牧獸醫站,重慶 405000)
淺談豬細小病毒病
劉 貴
(重慶市涪陵區李渡街道畜牧獸醫站,重慶 405000)
豬細小病毒病是由豬細小病毒所引起的,主要發生于初產母豬的繁殖障礙性疾病,其特征為流產、產死胎、木乃伊胎及病弱仔豬,母豬通常不表現其他臨床癥狀。呈世界性分布。近年來發現,豬細小病毒與豬圓環病毒2型混合感染后,可促進圓環病毒病癥狀的出現。近年來此病在我區部分養殖場發生和流行,部分養殖業主對該病認識不足從而引起多種疫病共同發生。
1.1 形態學特性
豬細小病毒(PPV)屬細小病毒科成員,病毒無囊膜。
1.2 理化特性
本病毒具有良好的血凝活性。能凝集豚鼠、雞、貓、猴、大鼠和小鼠等多種動物的紅細胞,不凝集牛、綿羊、倉鼠、豬的紅細胞。在實驗室中通常使用豚鼠紅細胞,因凝集效果較好。雞紅細胞不太使用,這是因為不同遺傳北京和不同年齡雞的紅細胞對凝集性有影響。
本病毒對外界環境的抵抗力較強,如對熱具有很強的抗性,70℃2h仍不使其喪失感染性和血凝活性,80℃5min可使其喪失血凝活性,在4℃條件下穩定,在-20℃或-70℃可長期保存。病毒對脂溶劑(如乙醚、氯仿等)有抵抗力,對酸、甲醛蒸汽和紫外線有一定抵抗力,但是在0.5%漂白粉或NaOH中5min即可被殺死,2%戊二醛205min,3%甲醛2h可以滅活該病毒。
2.1 易感動物
不同年齡、性別、品種的豬都可以感染,呈地方性流行或散發,易感豬群初次感染時可呈急性暴發,出現大量流產、產死胎。
2.2 傳染源
感染本病毒的額公豬和母豬是本病主要的傳染源;公豬精液可攜帶病毒,此病毒可能來自體內和體外污染。母豬所產死胎木乃伊弱仔及子宮分泌物中均含有高滴度的細小病毒。由于病毒對外界的抵抗力強,污染的圈舍4個月還具有感染性,當再次防入易感豬時,仍能感染。
2.3 傳播途徑
主要為胎盤感染精液傳播(交配感染) 。豬感染本病毒后排毒時間為兩周左右,易感豬接觸被細小病毒污染的物體后,可經口鼻途徑感染。
2.4 發病季節
本病發生沒有明顯的季節性。
⑴本病的主要臨床癥狀是母豬的繁殖障礙。還可引起母豬發情不正常和久配不孕等癥狀。
⑵不同孕期感染時,對胎兒的影響有所不同。在懷孕后30d內感染時表現為胎兒死亡,死亡的胚胎被母體迅速吸收,母豬有可能重新發情。
⑶在懷孕后30~50d感染,主要產木乃伊胎。
⑷在懷孕50~60d感染主要產死胎。
⑸在懷孕后70d感染時出現流產。
⑹懷孕70d之后感染,母豬多能正常產仔,但是所產仔豬在各種組織中帶毒,成為重要的傳染源。
⑴可見母豬子宮內膜有輕度的炎癥反應,胎盤部分鈣化,胎兒在子宮內有被溶解吸收的現象。
⑵組織學檢查可見母豬子宮上皮組織和固有層有局灶性或彌散性單核細胞浸潤,在大腦、脊髓有漿細胞和淋巴細胞形成的血管套。
⑶感染的胎兒表現出不同程度的發育障礙和營養不良,出現木乃伊胎、畸形、骨質溶解的腐敗黑化胎兒。胎兒皮膚充血、出血、水腫和脫水等癥狀,全身組織器官可見關懷反的細胞壞死、炎癥。
本病根據臨床癥狀和流行病學可作出初步診斷。即如果僅初次妊娠努豬發生流產、產死胎、木乃伊胎、胎兒發育異常等現象,母豬無其他臨床癥狀,有證據表明是傳染性疾病時,則應考慮本病的可能,但進一步確診必須進行實驗室診斷。
5.1 病原學檢測
(1)病毒分離鑒定
采取流產或死胎兒的新鮮臟器(如腦、腎、肝、肺、睪丸、胎盤及腸系膜淋巴結等),研磨凍融后,去上清同步接種PK-15細胞和IBRS-2細胞,逐日觀察細胞病變。隨后再用免疫熒光試驗,血凝試驗和PCR等方法進行確認。在上述樣本中,以腸系膜淋巴結和肝臟的分離率最高;但是如果胎兒死亡時間過長,組織中病毒的感染性逐漸喪失,影響分離結果。
(2)熒光免疫技術
可以對感染細胞和疑似病例組織中的細小病毒進行快速檢測。在檢測前,感染細胞需要用丙酮固定,待檢組合子需制成冰凍切片。隨后,用陽性血清和熒光素標記的二抗依次染色,最后在熒光顯微鏡下觀察。出現熒光,表明細胞或組織中含有病毒。
(3)PCR技術
針對細小病毒VP2基因,設計引物,進行PCR檢測,是目前大多數實驗室采用的方法,用于分離病毒的鑒定和病料中細小病毒的檢測,具有快速和敏感的優點。
5.2 抗體檢測方法
血清中和試驗、血凝抑制試驗、酶聯免疫吸附試驗、乳膠協同凝集試驗、瓊脂擴散試驗和補體結合試驗等,都可用于檢測抗體。其中最常用的是血凝抑制試驗。可采取母豬血清,也可用70日齡以上感染胎兒的心血或在組織浸出液。被檢血清先經56℃30min滅活,加入50%豚鼠紅細胞(最濃度)和等量的高嶺土,搖勻后放室溫15min,經2000r/min離心10min,取上清,以除掉血清中的非特異性凝集素和抑制因素。抗原用4個血凝單位的標準血凝素,紅細胞用0.5%豚鼠紅細胞懸液。判定標準暫定1:16以上為陽性。
鑒別診斷: 引起母豬繁殖障礙的原因很多應與豬偽狂犬病、豬乙型腦炎、豬瘟、衣原體、弓形蟲和豬布氏菌病等鑒別診斷。
本并無有效的治療方法。防控原則是不引進帶毒豬,以免疫預防為主,初產母豬配種前需獲得免疫力。
6.1 加強飼養管理和消毒措施
堅持自繁自養的原則。如需要引種,應從未發生過本病的豬場引進,隔離飼養半個月后,經兩次血清學檢測,HI效價在1:256以下或陰性時方可混群飼養。經確診為細小病毒感染后同窩的幸存者豬不能作為種用;母豬流產時,應做好豬場(尤其是繁殖豬舍)的消毒。
6.2 免疫預防
由于PPV血清型單一及其較強的免疫原性,免疫接種已成為預防本病的有效措施。目前,在我國使用較多的是油乳劑滅活疫苗。初產母豬在配種前2個月進行免疫一次(必要時可在一個月后加強免疫一次),在整個妊娠期獲得足夠的保護力。經產母豬一般不需要再免疫。
6.3 自然免疫
本病流行地區,將母豬配種時間推遲到9月齡以后,因為此時大多數母豬已經建立起主動免疫;也可以在配種前2個月,將后備母豬與老母豬混養,檢測后備母豬,確認感染成功,獲得主動免疫后在配種。