鴨坦布蘇病毒病診斷方法及防治措施

王善輝

(江蘇省徐州生物工程職業技術學院動物工程系,江蘇徐州 221006)

鴨坦布蘇病毒病診斷方法及防治措施

王善輝

(江蘇省徐州生物工程職業技術學院動物工程系,江蘇徐州 221006)

鴨坦布蘇病毒病是一種以出血性卵巢炎為主要病變特點的新發、急性、烈性傳染病該病,給我國養鴨業造成了巨大的經濟損失。論文就鴨坦布蘇病毒病臨床診斷方法、病毒分離鑒定、防治措施進行綜述,以期為鴨坦布蘇病毒病的診斷與防控提供參考。

鴨坦布蘇病毒;傳染病;診斷;防治

自2010年春季開始，我國福建、浙江、上海、山東等主要鴨養殖密集區由南到北暴發了一種以出血性卵巢炎為主要病變特點的新發、急性、烈性傳染病，給我國養鴨業造成了巨大經濟損失。經病原分離及基因測序，已確定其病原為鴨坦布蘇病毒（Duck tembusu virus，DTMUV）[1]。國內外學者開展針對該病的病原學、診斷技術、疫苗等方面的相關研究工作。本文對DTMUVD診斷方法及防治措施作一綜述，以期為DTMUV防控提供參考。

1 臨床診斷

1.1 臨床癥狀

感染鴨主要表現為采食量突然下降，隨之產蛋率大幅度下降，群內發病率達100%，病死率為0～12%。體溫升高，排綠色稀糞。感染后期，出現腿癱、轉圈等神經癥狀[2]。

1.2 病理變化

病理剖檢主要表現為卵巢出血、變性、萎縮和破裂；卵泡嚴重出血、壞死；多數病鴨肝臟淤血、腫大、壞死；具有神經癥狀的發病鴨可見腦膜出血，腦組織水腫。

2 實驗室診斷

2.1 病毒的分離與鑒定

采集發病鴨的卵泡膜、肝臟、脾臟等組織，可分離到病毒。萬春和等[3]從病死種鴨的卵巢、肝臟等病變組織分離到DTMUV。

2.2 RT-PCR方法

RT-PCR技術具有快速、特異、簡便等優點，是目前DTMUV準確、簡單診斷的主要方法。張帥等[4]設計了一對特異性引物，建立了檢測DTMUV的一步法RT-PCR方法。

2.3 熒光定量RT-PCR方法

實時熒光定量PCR技術實現了PCR擴增反應的實時跟蹤和定量檢測，是當前動物疫病檢測技術中簡單、快速、敏感、特異的檢測技術。研究人員在E基因序列區內設計了用于TaqMan熒光定量RT-PCR的一對特異性引物及TaqMan探針，分別建立了檢測DTMUV的熒光定量RT-PCR方法。

2.4 套式RT-PCR方法

套式PCR，是使用兩對PCR引物擴增完整的片段。如果第一次擴增產生了錯誤片段，則第二次能在錯誤片段上進行引物配對并擴增的概率極低。因此，巢式PCR的擴增非常特異。黃欣梅等[5]根據鵝黃病毒JS8O4株全基因序列，設計了2對特異性引物，分別建立了快速檢測DTMUV的半套式RT-CR方法及套式RT-PCR方法。

2.5 RT-LAMP方法

RT-LAMP即環介導等溫擴增技術，因其具有無需PCR儀、操作簡便、反應迅速靈敏度高等優點，特別適合在現場和基層部門應用。李兆龍等[6]根據禽新型黃病毒E蛋白基因序列，在保守區設計了6條特異性引物，分別建立了檢測MDTUV的RT-LAMP方法。

2.6 血清學檢測方法

國際上通用的黃病毒屬血清學檢測方法有ELISA、瓊脂擴散試驗（AGP）、血凝抑制試驗（HI）等。姬希文等[7]用純化的FX2010株作為包被抗原，建立了檢測DTMUV血清抗體的間接ELISA法。謝星星等[8]、傅秋玲等[9]也先后建立了關于E蛋白的間接ELISA方法并用于臨床檢測。

3 防治措施

3.1 預防

消滅傳播媒介，全場除草滅蚊。加強飼養管理，適當補充營養藥。鴨群飼喂抗病毒中藥、干擾素進行預防，發病鴨群同時喂給抗生素，預防繼發感染。2011年有鴨坦布蘇病毒病油乳劑滅活疫苗相關報道，推薦免疫程序為開產前2～3周免疫2次，間隔2周。2014年中國農業科學院科研人員研制的“鴨坦布蘇病毒病活疫苗”，可較好地預防本病。

3.2 治療

該病目前沒有特效治療藥，只能采取對癥治療措施。發病期間，經常對鴨場進行徹底消毒，在鴨群的飲水中添加抗病毒藥物，同時使用清熱解毒的中草藥和增強鴨體免疫力的黃芪多糖，并添加多維和礦物質。發病鴨群可適當添加多維及中藥如清溫敗毒散，提高鴨群抵抗力。或飼料中單獨添加白術、水飛薊素、仙人掌、白花蛇舌草等對發病有所減輕。

[1] 滕巧泱，顏丕熙，張旭，等.一種新的黃病毒導致蛋鴨產蛋下降及死亡[J].中國動物傳染病學報，2010，18（6）：1-4.

[2] 李玉峰，馬秀麗，于可響，等.一種從鴨新分離的黃病毒研究初報[J].畜牧獸醫學報，2011，42（6）：885-891.

[3] 萬春和，施少華，程龍飛，等.一種引起種（蛋）鴨產蛋驟降新病毒的分離與初步鑒定[J].福建農業學報，2010，25（6）：663-666.

[4] 張帥，云濤，葉偉成，等.鴨坦布蘇病毒一步法RT-PCR檢測方法的建立和應用[J].浙江農業學報，2012，24（1）：37-40.

[5] 黃欣梅，趙冬敏，劉宇卓，等.禽黃病毒套式RT-PCR檢測方法的建立及應用[J].畜牧與獸醫，2012，44（6）：5-8.

[6] 李兆龍，陳仕龍，林鋒強，等.禽新型黃病毒RT-LAMP檢測方法的建立[J].畜牧獸醫學報，2012，43（4）：659-663.

[7] 姬希文，閏麗萍，顏丕熙，等.鴨坦布蘇病毒抗體間接ELISA檢測方法的建立[J].中國預防獸醫學報，2011，33（8）：630-634.

[8] 謝星星，李銀，李祥瑞，等.檢測坦布蘇病毒的雙抗體夾心ELISA方法建立及初步應用[J].畜牧與獸醫，2014，46（5）：24-30.

[9] 傅秋玲，陳珍，施少華，等.鴨坦布蘇病毒E蛋白包被抗原間接ELISA方法的建立[J].福建農業學報，2015，30（1）：1-5.

王善輝（1977—），女，內蒙古人，博士，講師，研究方向：分子病毒學與免疫學。

徐州市科技項目（XM13B120）；徐州生物工程職業技術學院科研課題（2013B03）。