牛羊副結核病的流行、診斷及防制

張忠健

(黑龍江省肇東市畜牧獸醫局,黑龍江肇東 151100)

牛羊副結核病的流行、診斷及防制

張忠健

(黑龍江省肇東市畜牧獸醫局,黑龍江肇東 151100)

副結核病也叫副結核性腸炎,是由副結核分枝桿菌所致的主要是牛的一種慢性傳染病。其顯著特征是間歇性或持續性的頑固性腹瀉和漸進性消瘦,以及增生性腸炎導致的腸黏膜呈腦回狀增厚。

副結核病;診斷;防制

1 流行病學

病畜和帶菌畜是主要傳染源。本病主要經消化道感染，但也可經胎盤感染。副結核分枝桿菌主要引起牛（尤其是乳牛）發病，幼年牛最易感。除牛外，綿羊、山羊、駱駝、鹿、豬、馬、驢等動物也可患病。本病潛伏期甚長，可達6～12個月或更長，故表面上呈散發性，實際上是一種地方流行性。此病多見于母牛，公牛和閹牛少見，高產牛的癥狀較低產牛嚴重。

2 臨診癥狀

早期癥狀為間斷性腹瀉，以后變為經常性的頑固性拉稀，糞便稀薄惡臭，帶有黏液和氣泡。病初精神、食欲無顯著變化，以后食量逐漸減少，消瘦，常喜睡臥，泌乳量減少，最后完全停止。頜下及垂皮出現水腫。體溫多無明顯變化，一般經3～4個月，最后因心力衰竭而死。綿羊和山羊感染后癥狀同牛基本相似，發病率1～10%。

3 病理變化

主要病變見于空腸、回腸和結腸前段。腸壁增厚，形成彎曲堅實的皺褶，黏膜呈黃白色或灰黃色，黏膜上帶有黏液，漿膜下淋巴管和腸系膜淋巴管腫大，常呈索狀。腸系膜淋巴結腫大、質軟，切面濕潤，有黃白色壞死灶。

4 實驗室檢驗

家畜副結核病檢疫常用的檢驗方法有病原學檢查、皮內變態反應和補體結合反應。病原學檢查主要是取病料鏡檢和從病料中分離培養物，用于疫病的確診。皮內變態反應用于無臨診癥狀的家畜檢疫。

4.1 病原學檢查

（1）采集病料。收集混有黏液、血液、黏膜的糞便，也可用刮匙從病畜直腸深部（約30cm）刮取少量帶有黏液的糞便，盛于小瓶。或將上述材料直接制成涂片數張，自然干燥，用防水紙包扎送檢。病死畜可選明顯病變腸段，用自來水沖去腸內糞便，采取病腸鄰近的腸淋巴結和回盲瓣，裝入塑料袋中，冰凍送檢。

（2）細菌鏡檢。取糞樣或直腸刮取物（混有黏液、血液），加4～5倍蒸餾水，充分混勻，用4層紗布過濾，濾液用5000轉/min離心30min，取沉淀制成涂片2～4張。也可用糞樣或直腸刮取物直接涂片，火焰固定，用萋-尼氏抗酸染色法染色，顯微鏡觀察。副結核桿菌呈紅色球桿狀，成叢成團，背景成藍色。

（3）細菌培養鑒定

A.病料處理。取糞樣1～2g，加入生理鹽水40ml充分混勻，用4層紗布過濾，收集濾液加入等體積的含有10%草酸和0.02%孔雀綠水溶液，混勻，放入37℃水浴中30min，3500～5000轉/min離心30min，取沉淀物。或者取病變腸段，剪開，沖洗掉腸內容物，于玻璃板上攤開，用載玻片或手術刀刮取黏膜10～20g放于滅菌的帶有銅紗網的乳缽中研磨，邊研邊添加0.5%胰酶水溶液40ml，制成懸液；用1摩爾/升氫氧化鈉調pH至9.0，放在燒杯中，室溫下在磁力攪拌器上攪拌1h，再以5000轉/min離心30min，取沉淀物。或者取腸淋巴結10～20g，剔除脂肪后剪碎，按前面的操作方法研磨、離心、取沉淀物。

B.培養。將沉淀物涂片鏡檢，并將每份病料接種3～5管馬鈴薯湯培養基，第二天將露在試管外的棉塞剪去，用蠟封管口，37℃培養。一般經1～2個月出現肉眼可見的、針尖大的灰黃色隆起、不透明、邊緣不太整齊的細小菌落，鏡檢可見細小抗酸桿菌。未長出菌落的培養管，須培養到6個月，若仍未見菌落生長，方可棄去。

C.鑒定。分離出的細菌培養物，分別接種1管加有分枝桿菌素和1管不加分枝桿菌素的Dubos培養基上，37℃溫箱中培養20～30d。若是副結核分枝桿菌，則在加入分枝桿菌素的培養基上長生，而后一種培養基則無菌生長。

4.2 皮內變態反應

（1）材料準備：提純副結核菌素或禽型提純結核菌素（購自獸醫生物藥品廠）、游標卡尺、注射器等。

（2）檢驗方法：在牛頸左側中部上1/3處剪毛，直徑約10～15cm2，用卡尺測量皮膚皺褶的厚度并記錄。剪毛處如有硬結創傷或化膿等情況，應另選部位或在頸部對側進行試驗。羊在尾根皺褶部、頸部或肩胛部剪毛，測量皮膚皺褶厚度并記錄。

用滅菌生理鹽水或注射用水將提純副結核菌素稀釋為0.5mg/ ml，禽型提純結核菌素稀釋為25000國際單位/ml。皮內注射劑量為0.1ml。注射部位應出現小包，若無小包，應另選部位或在對側重新注射。注射后72h觀察反應，檢查注射部位有無熱、腫、痛等炎性反應，用卡尺測量注射部位皮膚皺褶厚度，從該測量數據減去注射前的測量數據，即為皮厚差。

（3）結果判定：①陽性反應：局部有炎性反應，皮厚差≥4mm。②可疑反應：局部炎性反應不明顯，皮厚差2.1～3.9mm，判為可疑感染動物。于3個月后，于對側頸部相應部位再進行一次試驗，若仍為可疑即判為陽性。②陰性反應：局部無炎癥反應，皮厚差≤2mm。

（4）注意事項：①進口動物檢疫時皮厚差＞2mm應判為陽性。②羊在尾根皺褶部無任何反應的判為陰性；有反應的，不論皮厚差大小和炎性反應輕重，均判為陽性。

5 防制措施

本病尚無有效藥物治療，預防本病重在加強飼養管理，嚴格檢疫，可預防注射副結核菌苗，使牛群獲得免疫。

[1] 何昭陽，陳獎勵.副結核病的診斷與防制[J].中國獸醫雜志，1991，（3）：52-54.