三種不同技術原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能對比

羅立 江光榮 周煒

三種不同技術原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能對比

羅立 江光榮 周煒

目的 探析三種不同技術原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能。方法 選取接收的51份第3代HIV感染病例為研究資料，將其分為3組：化學發光試驗組（化學發光法）、酶聯免疫吸附試驗組（酶聯免疫吸附法）及免疫膠體金組（免疫膠體金法），每組17例。對比分析3組病例采用第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能。結果 酶聯免疫吸附試驗組的敏感性為82.35%，化學發光試驗組為94.12%，均優于免疫膠體金組的41.18%（P＜0.05）；3組檢測方法的特異性差異無統計學意義。結論 在第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能中，酶聯免疫吸附試驗和化學發光試驗的敏感性和特異性較高，值得推廣和應用。

化學發光法；酶聯免疫吸附法；免疫膠體金法；HIV；診斷試劑

艾滋病是一種危害性極大的傳染病，HIV病毒是引發艾滋感染的主要因素，導致機體免疫功能下降，死亡率極高[1]。第3代HIV診斷試劑是繼第2代后產生的可縮短HIV病毒感染檢測窗口期的檢測試劑[2]，可提高輸血的安全性，且檢測質量較好。本文選取本院接收的51份第3代HIV感染病例資料為研究資料，對三種不同技術原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能對比效果進行評價，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月～2014年12月宜春市人民醫院接收的51份第3代HIV感染病例為研究資料，將其分為3組，每組17例。化學發光試驗組中，男11例，女6例；年齡22～45歲，平均年齡（33.5±1.5）歲。酶聯免疫吸附試驗組中，男10例，女7例；年齡22～47歲，平均年齡（34.5±1.3）歲。免疫膠體金組中，男12例，女5例；年齡20～45歲，平均年齡（32.5±1.2）歲。3組患者在性別、年齡等方面差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 方法 酶聯免疫吸附試驗組給予酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測（上海酶聯生物生產），按照說明書要求進行吸附測定。免疫膠體金組給予免疫膠體金法（DIGFA）檢測，使用上海金標生物科技有限公司生產的免疫膠體金檢測試劑進行測定。化學發光試驗組給予化學發光法（CLIA）檢測，使用全自動化學發光儀（北京昊諾斯科技有限公司；型號：5210450）對樣本進行檢測，若樣本的檢測結果與線性樣本不符，則采用梯度稀釋的方式處理。

1.3 統計學方法 本研究所有數據均采用SPSS 18.0統計軟件進行數據統計，計數資料用（%）表示，采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三種檢測方法的敏感性比較 酶聯免疫吸附試驗組的敏感性為64.71%，化學發光試驗組的敏感性為94.12%，免疫膠體金組的敏感性為29.41%，經統計學分析，3組組間差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組檢測方法的檢測敏感度比較（n）

2.2 三種檢測方法的特異性比較 通過對51例HIV陽性病毒進行檢測，酶聯免疫吸附試驗法檢測假陽性2例，特異性為96.08%；化學發光試驗法無假陽性例數，特異性為100%；免疫膠體金法檢測假陽性例數為3例，特異性為94.12%。3組數據比較，差異無統計學意義。

3 討論

有研究顯示[3]，在患者感染HIV病毒的半個月內，其血液循環中則會出現抗HIV抗體，其中絕大部分患者的抗HIV抗體均為陽性，因此，抗體檢測成為HIV感染在診斷和篩查中的重要部分。就檢測病毒性質而言，抗體檢測主要分為兩部分，其一是篩查試驗，其二是確認試驗[4]；就檢測技術而言，抗體檢測主要包括酶聯免疫吸附試驗法、化學發光法以及免疫膠體金等[5]。

酶聯免疫吸附試驗仍是現階段臨床檢測中應用范圍較廣的檢測技術，尤其是在HIV的臨床檢測中占據極其重要的地位。酶聯免疫吸附法將酶分子與抗體分子充分結合，不僅不會改變抗體的免疫學特性，同時也不會影響酶的活性和生物學特征。在HIV病毒的檢測過程中，酶聯免疫吸附試驗法的假陽性相對較小，此種檢測方法的特異性較高。通過對近年來的臨床報道和醫學文獻進行研究[6]，發現化學發光試劑的陽性檢出率較高，化學發光試劑是利用化學發光劑對抗原或抗體進行標記的免疫分析法，可在檢測過程中形成有效的激發態中間體，當此種中間體穩定時，將會同時產出定量的產額，對檢測結果具有一定的影響性作用。同時，假陰性和假陽性的現象較少。因此，在HIV病毒檢測中，化學發光試劑法檢測的特異性較高，具有較高的臨床應用價值。

檢測HIV抗體試驗是國際上發展最早、且應用最廣、發展最快的檢測技術，第3代HIV診斷試劑的出現可對各種類型的HIV抗體進行有效性檢測。研究結果顯示[7]，第3代HIV診斷試劑所采用的檢測方法為雙抗原夾心法，在檢查后捕捉到IgM及IgG，長期存在于機體內的IgG抗體可在兩周左右內產生。IgG在抗體檢測中具有保險性的作用，與此同時，IgE、IgD、IgA的敏感性相對較高，因此可保障酶聯3代的高檢測率。第3代檢測技術的窗口期在3周左右，可在安全的時間內對抗體性質進行確定和最終檢測，保障在窗口期內確診。同時，第3代檢測及時在檢測過程中無需對樣本進行稀釋，實現了真正意義上的HIV抗體篩查。此外，應用第3代檢測試劑的檢測特異性較高，因此，在檢 測過程中可避免出現假陽性多的現象，導致大量的血源被遺棄，減少HIV感染確診的人力、財力及物力的投入，降低HIV感染的危險度。除此之外，第3代診斷試劑所包被的抗原基本上是由基因工程組合成的多肽鏈，在樣本選擇上具有極大的包容性，可融合所有抗原成分，擴大了有效檢測面[8]。

本次研究結果顯示，酶聯免疫吸附試驗組的敏感性為82.35%，化學發光試驗組為94.12%，均優于免疫膠體金組的41.18%（P＜0.05）；3組檢測方法的特異性差異無統計學意義。提示酶聯免疫吸附試驗法和化學發光試驗法的檢測敏感度、特異性更高，免疫膠體金法的陽性檢出率相對較低，因此，前兩種檢測方法更適用于第3代HIV試劑的臨床檢測。

綜上所述，在第3代HIV診斷試劑的臨床檢測性能中，酶聯免疫吸附試驗和化學發光試驗的敏感性和特異性較高，值得在臨床上進一步推廣和應用。

[1] 李高輝,康可人,黎鋒,等.基于口腔黏膜分泌物的快速檢測HIV1/ 2型抗體方法建立及其臨床應用研究[J].中國醫藥生物技術,2013, 8(6)：460-462.

[2] 鐘敏,孫麗萍,張淑萍,等.結核感染T細胞斑點試驗診斷HIV／AIDS患者潛伏感染結核分枝桿菌的實驗研究[J].哈爾濱醫科大學學報, 2013,47(4)：329-332.

[3] 孫麗娜,孫京濤,田永全.肺結核抗體檢測聯合CRP檢測判斷HIV合并肺結核桿菌感染的效果研究[J].標記免疫分析與臨床,2015, 22(6)：546-548.

[4] 王斌,張錄喜,李紅，等.12 870例術前和輸血前四項傳染病指標檢測結果及意義[J].當代醫學,2012,18(11)：18-19.

[5] 馮偉明,嚴宇斌,劉燕，等.惠州市1996～2009年HIV監測結果分析[J].當代醫學,2010,16(16)：5-6.

[6] 梁景云.76例HIV抗體檢測結果分析[J].中國當代醫藥,2010,17(13)：83.

[7] 歐陽金鳴,韓曉旭,吉陽濤，等.三種不同技術原理的第4代HIV診斷試劑的臨床檢測性能比較研究[J].中華檢驗醫學雜志,2013,36(10)：903-907.

[8] 顧春瑜,劉英麗,王海濱，等.第四代HIV診斷試劑檢測HIV抗體假陽性原因分析[J].武警醫學,2013,24(9)：758-760.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.34.049

江西 336000 宜春市人民醫院血液科（羅立 江光榮 周煒）