夏枯草在云南山地仿野生撫育后其迷迭香酸含量的變化

2015-03-24 07:28:14欒曉文

云南中醫中藥雜志 2015年10期

張婭，欒曉文

(1.云南省中醫中藥研究院，云南昆明 650223；2.成都軍區昆明總醫院，云南昆明 650032)

張婭1，欒曉文2△

(1.云南省中醫中藥研究院，云南昆明 650223；2.成都軍區昆明總醫院，云南昆明 650032)

筆者在云南文山西疇縣山地仿野生撫育夏枯草后，針對其不同子代藥材中主要有效成分(迷迭香酸)含量的變化展開研究。方法用HPLC，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.1%三氟乙酸溶液(42：58)為流動相，檢測波長為330nm，測定夏枯草種苗、仿野生撫育一年后子代、仿野生撫育二年后子代中迷迭香酸的含量，并進行對比分析。結果經過含量測定及對比分析可知，夏枯草種苗、仿野生撫育一年后子代、仿野生撫育二年后子代藥材內迷迭香酸含量呈現增長趨勢。

夏枯草；仿野生種植；含量變化

藥用植物野生撫育是野生藥用植物采集與藥用植物栽培的有機結合，是藥用植物農業產業化生產經營的新模式，是解決中醫藥可持續發展的正確和關鍵的決策之一。藥用植物野生撫育突破了傳統的野生藥用植物生產經營模式，將藥用植物大田栽培和野生采集的優勢有機地結合了起來，較好解決了當前野生藥用植物資源面臨的產出量不足、藥材質量差、資源瀕危和生態環境惡化的四大難題，實現了生態環境保護、資源再生和綜合利用及野生藥材可持續利用的三重并舉，將開辟一個富有生命力的野生中藥材生態產業新模式[1]。

目前我國仍有80%左右的中藥材來自野生，保證野生中藥資源的可持續利用，保證野生藥材采集與生態環境保護的協調，實現人與自然的和諧共處，是中醫藥可持續發展必須解決的關鍵問題之一[2]。另一方面，如何提高栽培藥材質量，使其與野生藥材相近，保證生產藥材的天然性，也倍受人們關注。

藥用植物野生撫育具有如下特征：①具有明顯的經濟學特點。撫育的目的是增加目標藥材種群數量，給人類提供可采集利用的中藥資源，由此區別于單純的生物多樣性保護、自然保護區建設或植被恢復；②野生撫育的場地是野生藥用植物原生環境，不同于在退耕還林等人工林下栽培中藥材；③野生撫育種群數量增加可以在種群遭到破壞或沒有遭到破壞的基礎上進行，而植被恢復指已遭到破壞的植被重新生長和恢復；④野生撫育種群數量的增加方式有兩種，一是人工栽植，二是創造條件，令原有野生種群自然繁殖更新；⑤野生撫育增加了目標藥材種群的數量，改變了群落中各物種的數量組成，但群落的基本特性未改變。

目前，國內已有數種藥用植物野生撫育取得了很好的效果，如：茅蒼術野生撫育[3]、貓爪草野生撫育[4]、寧前胡仿野生栽培[5]、川貝母野生撫育[6]、林下栽培野山參[7]、天麻仿野生栽培[8]、冬蟲夏草半野生撫育[9]、林下栽培黃連[10]等。

對野生撫育后產出的藥材進行與引種種苗有效成分的含量比對和對二代藥材品質的評價方法的系統研究還很欠缺，從而導致了使用其產出的藥材沒有可靠的實驗依據，這將嚴重地制約了藥用植物野生撫育技術的應用及長遠發展。因此，需要大力的推進對這些方面的研究工作，以保證藥材及其制劑的品質及安全性。

1 實驗材料及儀器

1.1 實驗材料夏枯草種苗、夏枯草一年后子代、夏枯草兩年后子代：采自云南省西疇縣把獨村仿野生中藥材種植基地。

1.2 實驗儀器 BSA124S-CW電子天平(賽多利斯科學儀器北京有限公司)；ZF-I型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)；電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠)；CQ250超聲清洗儀(上海超聲波儀器廠)；202-1A(PCD-3000serials)烘箱(上海喬躍電子有限公司)；戴安UltiMate3000高效液相色譜儀(美國戴安公司)；Gemini5uC1811oA4.6×250mm色譜柱(美國phenomenex公司)；PhernomexC18保護柱(美國phenomenex公司)。

2 實驗方法

2.1 水分檢查

2.1.1 夏枯草(種苗)水分測定取夏枯草供試品4.2987 g，放入干燥至恒重的扁形稱瓶(27.3498 g)，在105℃下干燥5h，取出，移至干燥器冷卻30 min，精密稱定重量(31.2753 g)，再在105℃下干燥1 h，冷卻，稱重(31.2750 g)，至連續兩次稱重的差異不超過5 mg為止。根據減失重量，計算供試品中含水量(%)。

2.1.2 夏枯草(一年后子代)水分測定取夏枯草供試品3.9263 g，放入干燥至恒重的扁形稱瓶(27.0542 g)，在105℃下干燥5h，取出，移至干燥器冷卻30 min，精密稱定重量(30.4911 g)，再在105℃下干燥1h，冷卻，稱重(30.4894 g)，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失重量，計算供試品中含水量(%)。

2.1.3 夏枯草(兩年后子代)水分測定取夏枯草供試品3.8465 g，放入干燥至恒重的扁形稱瓶(27.6043 g)，在105℃下干燥5 h，取出，移至干燥器冷卻30 min，精密稱定重量(30.9152 g)，再在105℃下干燥1 h，冷卻，稱重(30.9135 g)，至連續兩次稱重的差異不超過5 mg為止。根據減失重量，計算供試品中含水量(%)。

2.2 含量測定色譜條件與系統適用性試驗以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.1%三氟乙酸溶液(42：58)為流動相；檢測波長為330 mn。理論板數按迷迭香酸峰計算應不低于6000。

2.2.1 對照品溶液的制備取迷迭香酸對照品適量，精密稱定，加稀乙醇制成每l mL含0.5 mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品粉末(過二號篩)約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加人稀乙醇50 mL，超聲處理(功率90W，頻率59kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注人液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含迷迭香酸不得少于0.20%。