棗果黑斑病病菌對新疆不同棗樹品種的致病性

劉曉琳，梁英梅，游崇娟，馬 榮，＊，趙景玲，潘 明

（1.新疆農業大學林學與園藝學院，烏魯木齊 830052；2.北京林業大學標本館，北京 100083；3.北京林業大學林學院，省部共建森林培育與保護教育部重點實驗室，北京 100083；4.新疆阿克蘇市林果業管理辦公室，阿克蘇 843300）

棗（ZiziphusjujubaMill.）在中國的栽培歷史悠久［1］，是我國極具民族特色的果品之一，富含維生素C和人體所需的微量元素，堪稱果中佳品。新疆獨特的氣候條件和豐富的光熱資源使得棗樹已成為新疆林果業發展中又一新興產業［2］，種植面積已突破40萬hm2，占全國總面積的近1／3，其中阿克蘇、喀什、和田、巴州、哈密等地區的棗果產量占到全國總產量的50%以上，紅棗產業已成為新疆農民增收致富的支柱型產業。棗果病害的發生影響著紅棗產業的健康發展。2010-2013年在新疆阿克蘇、和田等地區棗園里棗果黑斑病的發病率達30%［3］，病重棗園發病率高達50%［4］，果農損失慘重。

棗樹上的黑斑病于1975年在印度哈里亞納首次在葉片上發現［5］。1985年，在云南‘毛葉棗’的葉片上發現該病害［6］，隨后在‘青棗’［7］、‘冬棗’［8］、‘梨棗’［9］、‘壺瓶棗’和‘駿棗’［10］等棗果上陸續發現該病害。國內目前對于棗果黑斑病研究主要集中在防治上，通過化學方法和生物方法減少該病害造成的損失［11-14］。選育和利用抗病品種是防治植物病害最經濟、有效的途徑［15-16］。關于棗果黑斑病菌對新疆不同棗樹品種致病性尚未開展過系統的研究。本研究通過對新疆阿克蘇、和田地區棗果黑斑病發生情況進行調查，并比較病原菌對不同棗樹品種的致病性差異，為棗果黑斑病抗病品種的選育及該病害的綜合防治奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 供試棗樹品種與病原菌

于2014年8-10月，在新疆阿克蘇、和田地區的棗園開展棗果黑斑病發生情況調查，同時在實驗室完成病原菌對不同棗樹品種的致病性測定。供試棗樹品種詳細信息見表1。

棗果黑斑病病原菌（Alternariaalternata）由新疆農業大學林學與園藝學院病理實驗室提供。

表1 供試棗樹品種的相關信息Table 1 Information of different jujube varieties

1.2 棗果黑斑病在田間不同棗樹品種上發生情況調查

在樣地按照5點取樣法，每點選取3株樹，共15株，每株按東、南、西、北4個方位，每個方位隨機選取5個棗吊，即每株選取20個棗吊，共300個棗吊，統計每個棗吊掛果數量及病果數量，依據病情分級標準［17］，計算病情指數［18］。

1.3 不同接種體的制備

在純化培養3d 的菌落邊緣上，打取直徑為6mm的菌齡一致的菌餅，作為菌絲接種體；在純化培養7d的菌落上，打取直徑6mm 的菌齡一致的菌餅作為菌餅接種體；用無菌水沖洗純化培養7d后的病原菌PDA 平板，配成1×105個／mL 的孢子懸浮液作為接種體。

表2 棗果黑斑病病情分級標準Table 2 Grading standard of jujube black spot disease

1.4 接種前棗果的處理

采集不同品種的白熟期的健康棗果，用自來水將棗果表面沖洗干凈后再用75%乙醇消毒90s，無菌水沖洗3次，自然晾干后待用。用滅菌的接種針在棗果的胴部上扎孔，傷口為直徑5mm 的圓［19］。

1.5 不同接種體對駿棗棗果的致病性測定

在處理好的駿棗的胴部，分別用菌餅和菌絲直接接種，用脫脂棉蘸取孢子懸浮液接種，每處理10個棗果，重復3次。接種后的棗果用保鮮膜包裹置于無菌托盤內，推盤底層為無菌濾紙，注入一定無菌水保濕，將托盤用保鮮膜密封。48h后去除棗果表面的保鮮膜，十字交叉法測量病斑大小，每天觀察病斑變化［20］，通過發病情況和病斑擴展速度篩選最優接種體。

1.6 病原菌對不同品種棗果的致病性測定

在不同品種棗果的胴部分別按照1.4的方法處理，以1.5試驗篩選出的最佳接種體進行接種，每品種10個棗果，重復3次，以未接病菌的培養基作為對照，保濕方法同1.5，48h后每天觀察棗果上病斑直徑的變化情況，直至病斑不再變化，統計病斑面積，計算發病棗果的病情指數。

1.7 數據分析

選用Excel和DPS軟件包進行數據統計分析，采用Duncan氏新復極差法（P＜0.05，P＜0.01）進行顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 棗果黑斑病菌在不同棗樹品種上的發生情況

田間調查發現，棗果黑斑病菌在不同棗樹品種上發病情況差異顯著，主栽品種上病害發生較為普遍，少數品種未受到危害（表3）。‘駿棗’上病害發病率最高，達34.35%，病情指數為8.34；其次是‘壺瓶棗’，發病率為30.12%，病情指數為4.85；在‘圓脆棗’、‘馬牙棗’和‘酸棗’上病害未發生；而在‘灰棗’、‘贊皇棗’、‘冬棗’、‘相棗’、‘板棗’、‘雞心棗’和‘金絲棗’上發病率和病情指數均較低。

表3 不同棗樹品種棗果黑斑病的田間發生情況1）Table 3 Occurrence of jujube black spot on different jujube varieties

不同地區的同一棗樹品種上病害發生情況差異不大。‘駿棗’在阿克蘇地區的發病率（34.35%）、病情指數（8.34）略高于和田地區（32.65%／8.26）；‘壺瓶棗’在阿克蘇的發病率（30.12%）稍高于和田地區（21.38%），但是病情指數相差不大；不同地區‘灰棗’的發病率以及病情指數相差無幾。總體來看，病害在阿克蘇地區的發生情況相對和田地區嚴重，主要由于棗果收獲期阿克蘇地區的降雨量較和田地區豐富，田間濕度較大，病害的發生相對嚴重。

2.2 病原菌不同類型接種體對駿棗棗果的致病性

采用菌餅、孢子懸浮液和菌絲3種接種體對‘駿棗’棗果開展致病性測定。結果表明不同接種體對棗果的致病性存在差異（圖1）。接種菌餅的棗果發病最早，在接種后2d棗果胴部上出現病斑，接種后10d病斑停止擴展，直徑為17mm；接種孢子懸浮液的棗果接種后2d開始發病，病斑擴展較慢，接種后10d病斑停止擴展，直徑為9mm；接種菌絲的棗果接種后3d開始表現明顯病狀，接種10d病斑后停止擴展，直徑為8mm。采用菌餅接種的棗果發病較快且病斑擴展速度快，故選擇菌餅作為最優接種體。

圖1 病原菌不同類型接種體對‘駿棗’棗果的致病性測定結果Fig.1 Pathogenicity of different pathogen inoculums on‘Junzao’

2.3 病原菌對不同棗樹品種棗果的致病性

病原菌接種于不同品種的棗果上均能致病，且不同品種的棗果發病癥狀一致，對照不發病。棗果接種2～3d后開始出現水漬狀圓形或橢圓形病斑，病斑逐漸擴大且變黑變硬，病斑內部果肉分離（圖2）。病原菌對不同品種的棗果致病性差異顯著（表4），致病性依次為：‘駿棗’＞‘壺瓶棗’＞‘哈密棗’＞‘相棗’＞‘板棗’＞‘酸棗’＞‘圓脆棗’＞‘雞心棗’＝‘金絲棗’＞‘贊皇棗’＝‘灰棗’＝‘冬棗’＝‘馬牙棗’；病原菌對‘駿棗’的致病性最強，病情指數為58，其次是‘壺瓶棗’，病情指數為40，對‘馬牙棗’、‘灰棗’、‘贊皇棗’和‘冬棗’的致病性最弱，病情指數均為20。

供試棗果中，‘冬棗’、‘雞心棗’、‘馬牙棗’和‘酸棗’在接種后3d發病，其他棗果在接種后2d發病；所有供試品種在接種后第10天病斑停止擴展。病原菌在不同品種棗果中的病斑擴展情況存在差異。接種后4～10d時間段內，‘贊皇棗’、‘雞心棗’、‘灰棗’、‘圓脆棗’等品種上病斑持續緩慢擴展；‘哈密棗’在接種后4～7d相對擴展較慢，接種后7～10d擴展較快；‘駿棗’、‘壺瓶棗’和‘板棗’在接種后4～10d內持續快速擴展。

表4 病原菌對不同品種棗果的致病性Table 4 Pathogenicity of jujube black spot on fruits of different jujube varieties

3 結論與討論

本研究通過調查不同棗樹品種棗果黑斑病的田間發生情況，發現‘駿棗’和‘壺瓶棗’上病害發生較為嚴重。病原菌對新疆13個棗樹品種棗果的致病性測定結果表明，病原菌對‘駿棗’棗果的致病性最強，其次為‘壺瓶棗’，對‘冬棗’和‘馬牙棗’的致病性最弱。病害在大果型的棗果上發生嚴重，小果型品種上相對較輕，可能與不同品種棗果的生理結構有關。

國內學者開展棗果黑斑病相關研究時，多數選用孢子懸浮液和菌餅作為接種體［3，8-9，21］。本試驗探討了不同接種體對致病性的影響，結果表明直接在傷口上放置菌餅的接種效果最好。

圖2 不同品種棗果接種菌餅7d后的發病癥狀Fig.2 Symptoms of different jujube varieties at 7day after inoculation by stabbing with mycelium disk

從已有報道來看，國內紅棗產區棗果黑斑病的發生情況不盡相同。山東沾化棗果黑斑病主要侵染‘冬棗’的葉片和果實，其病果率一般在30%，最嚴重達80%以上［22］。山西太谷縣和交城縣的‘駿棗’和‘壺瓶棗’上病害發病率在60%左右，嚴重時達到80%以上［10］。本研究通過對新疆阿克蘇和和田地區棗園的調查發現，‘駿棗’和‘壺瓶棗’的發病最為嚴重，發病率在30%左右，病原菌只危害‘冬棗’的果實，且發病率極低（0.46%）。由此可見，不同地域棗果黑斑病的發生情況差異較大，可能與地區間的氣候和地理環境有關［23］。

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