頭痛寧膠囊對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用的實驗研究

郭 珍 李 蕾 劉 靜 盛 剛

陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 (咸陽 712000 )

頭痛寧膠囊對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用的實驗研究

郭 珍 李 蕾△劉 靜▲盛 剛◇

陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院 (咸陽 712000 )

目的：觀察頭痛寧膠囊對小鼠的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，為頭痛寧膠囊的臨床應用和藥物開發(fā)提供依據(jù)。方法：圍繞頭痛寧膠囊的主要藥效學研究，應用機械性施壓刺激致小鼠鼠尾壓痛進行鎮(zhèn)痛試驗，應用二甲苯致小鼠耳腫脹進行了抗炎試驗，并進行統(tǒng)計分析。結(jié)果：頭痛寧大、中劑量組小鼠鼠尾壓痛痛閾明顯高于空白組，頭痛寧大劑量組、中劑量組均有顯著的抑制小鼠耳腫脹的作用；并且大劑量對小鼠耳腫脹的抑制作用明顯。結(jié)論：頭痛寧膠囊對于機械刺激所致的疼痛具有鎮(zhèn)痛作用，具有一定的抗炎作用。

偏頭痛是一種常見和慢性的神經(jīng)-血管性疾患,流行病學顯示偏頭痛流行廣泛,并具有一定危害,它不僅因頻繁和嚴重的頭痛導致患者的學習與工作能力下降、生活質(zhì)量降低[1]，表現(xiàn)通常呈一側(cè)或兩側(cè)疼痛，常伴惡心、嘔吐。頭痛寧膠囊源自清·陳士鐸《辨證錄·頭痛篇》中“散偏湯”，是陜西省名中醫(yī)楊秀清教授在中醫(yī)理論指導下，在“散偏湯”基礎(chǔ)上加減化裁研制而成的純中藥制劑，藥物組成有川芎、生白芍、香附、地龍等九味藥物。本文通過藥效學實驗研究，觀察其鎮(zhèn)痛、抗炎的作用。

1 實驗材料 1.1 實驗動物 健康昆明種小鼠50只，雌雄各25只，體重范圍在20±2g左右。由第四軍醫(yī)大學動物實驗中心提供。適應性飼養(yǎng)7d，按體重隨機分成空白組、陽性對照正天丸組、頭痛寧膠囊大劑量組、頭痛寧膠囊中劑量組、頭痛寧膠囊小劑量組，每組10只。

1.2 藥物與實驗儀器 1.2.1實驗用藥及陽性對照藥:頭痛寧膠囊，由陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院制劑中心提供，配制成藥物混懸液后根據(jù)大中小劑量組0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg分組給藥。正天丸，由三九醫(yī)藥股份公司生產(chǎn)，每袋凈重6g，按小鼠體重1.736g/kg給藥。100%二甲苯：西安化學試劑廠。

1.2.2 實驗儀器: YLS-3E電子壓痛儀：安徽淮北正華儀器有限公司。

2 實驗方法 2.1頭痛寧膠囊對小鼠鼠尾壓痛閾值的影響[2]空白組灌胃生理鹽水0.2mL/10g，陽性對照正天丸組灌胃正天丸0.2mL/10g；頭痛寧膠囊大、中、小劑量組，分別按0.2mL/10g灌胃。各組動物每天灌胃給藥1次，連續(xù)用藥7d，末次給藥前禁食不禁水12h。各組末次給藥30min后，將小白鼠放入固定筒內(nèi)，露出鼠尾，調(diào)整好尾根部受壓位置(約離尾根1cm處)，用YLS-3E電子壓痛儀，逐加壓力于上，當小鼠尾部受壓疼痛(指標為四肢亂動或足爪縮回，全身縮團抖動)停止加壓。所加壓力重量即為痛閾值，痛反應閾值可用重量(g)表示，測用藥前后的變化。

2.2 頭痛寧膠囊對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[3]空白組灌胃生理鹽水0.2mL/10g，陽性對照正天丸組灌胃正天丸0.2mL/10g；頭痛寧膠囊大、中、小劑量組，分別按0.2mL/10g灌胃。各組動物每天灌胃給藥1次，連續(xù)用藥7d，末次給藥前禁食不禁水12h。各組末次給藥30min后，用二甲苯(0.02mL/只)涂抹右耳兩面致炎。致炎2h后，頸椎脫臼處死小鼠，剪下小鼠耳片，分別稱重，并記錄左右耳重量差，其結(jié)果為耳腫的程度，取各組耳腫程度的均數(shù)與對照組作比較。并計算各組對耳腫脹的抑制率。抑制率=(空白組耳腫程度-給藥組耳腫程度)/空白組耳腫程度× 100%。

3 實驗結(jié)果 3.1 頭痛寧膠囊對小鼠鼠尾壓痛痛閾值的影響 結(jié)果見表1。給藥前：各給藥組與空白組相比，均無明顯差異(P>0.05)。給藥后：頭痛寧大、中劑量組小鼠痛閾明顯高于空白組，有非常顯著性差異(P<0.01)；正天丸組與空白組比較有顯著性差異(P<0.01)；小劑量組與空白組比較無顯著性差異(P>0.05)；頭痛寧大劑量組在提高小鼠痛閾方面優(yōu)于正天丸組(P<0.01)；頭痛寧中、小劑量組與正天丸組相比無顯著差異(P>0.05)。表明頭痛寧膠囊大劑量組鎮(zhèn)痛作用較正天丸強。

表1 頭痛寧膠囊對小鼠鼠尾壓痛痛閾值的影響

注: 與空白組相比，▲P<0.05,◇P<0.01；與正天丸組相比，◆P>0.05,△P<0.01

3.2 頭痛寧膠囊對二甲苯致昆明種小鼠耳腫脹的影響 結(jié)果見表2顯示，與空白對照組比較，正天丸組、頭痛寧組大劑量組、中劑量組對于小鼠耳腫脹均有顯著的抑制作用；并且大劑量組對于小鼠耳腫脹的抑制作用明顯，有非常顯著差異(P<0.01)。小劑量組與空白組比較無顯著性差異(P>0.05)，說明頭痛寧膠囊具有抗炎的藥效作用。并且頭痛寧大劑量組與正天丸組相比，抗炎作用強于正天丸組。

表2 頭痛寧膠囊對二甲苯致小鼠

注：與空白組相比較，▲表示P<0.01；△表示P<0.05

4 討 論 中醫(yī)藥在鎮(zhèn)痛方面有其獨到之處,尤其對輕度到中等程度疼痛有較好的鎮(zhèn)痛作用[4]。偏頭痛是一種疼痛性疾病，通過對頭痛寧膠囊的鎮(zhèn)痛作用的實驗可以說明其治療偏頭痛的有效性，小鼠鼠尾壓痛實驗是通過采用機械性施壓刺激壓迫小鼠鼠尾而產(chǎn)生疼痛，表現(xiàn)為四肢亂動或足爪縮回，全身縮團抖動。研究結(jié)果表明頭痛寧膠囊大、中劑量和正天丸均可以提高小鼠鼠尾壓痛痛閾,并且以大劑量組較為顯著，而且隨著頭痛寧膠囊劑量的增加小鼠鼠尾壓痛的痛閾也在隨之增加。本實驗在首次給藥后30min觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用，可以反映藥物的速效止痛效果，通過本實驗表明，頭痛寧膠囊具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，為頭痛寧膠囊用于快速緩解偏頭痛發(fā)作奠定了基礎(chǔ)。

偏頭痛發(fā)病機制中的三叉神經(jīng)血管學說認為誘發(fā)偏頭痛發(fā)作的各種因素可以引起血管的擴張，當血管擴張時可以促使三叉神經(jīng)末梢釋出血管活性肽類物質(zhì)，如P物質(zhì)、降鈣素基因相關(guān)肽等，這些因素會引起神經(jīng)源性炎癥。因此研究頭痛寧膠囊的抗炎作用也可以說明其治療偏頭痛的有效性。成功的藥物抗炎動物模型，是研究抗炎藥物的關(guān)鍵。致炎劑的選擇需要滿足能精確定量測定、所致炎癥穩(wěn)定可靠和持續(xù)時間較長等要求。現(xiàn)有的動物炎癥模型，根據(jù)炎癥不同進程設計，包括以腫脹、滲出等為主要指標的急性炎癥模型，以肉芽組織增生為主要指標的慢性炎癥模型及免疫性炎癥模型[5]。二甲苯為無色澄清液體，涂抹于小鼠耳廓兩面后，由于其刺激作用，可引起鼠耳局部毛細血管充血，通透性增加，滲出增多，發(fā)生水腫，表現(xiàn)出紅、腫、熱、痛等癥狀。二甲苯的致炎作用又快又強，小鼠耳廓腫脹法不需特殊的設備，簡便易行，實驗時間短，模型復制成功率高，是應用最多的研究藥物抗炎作用的模型之一。研究結(jié)果表明，頭痛寧膠囊大、中、小劑量及正天丸均有顯著的抑制小鼠耳腫脹的作用；并且大、中劑量對小鼠耳腫脹的抑制作用明顯并且三個劑量組具有明顯的劑量相關(guān)性，且大、中劑量比中成藥正天丸抗炎作用強，表明頭痛寧膠囊對急性炎癥有很好抑制作用,具有一定的抗炎作用。通過以上實驗可見，頭痛寧膠囊具有較好的鎮(zhèn)痛及抗炎作用，這為其治療偏頭痛提供了一定的藥理學基礎(chǔ)。關(guān)于頭痛寧膠囊鎮(zhèn)痛抗炎作用的其他分子機制及對神經(jīng)遞質(zhì)的影響仍需進一步研究。

[1] 張 穎，繆月琴，王振海.頭痛寧膠囊治療緊張型頭痛與偏頭痛的療效觀察[J].陜西中醫(yī),2010,31(7):845-846.

[2] 戰(zhàn)祥毅，王文萍，王 艷，等.中藥止痛巴布貼鎮(zhèn)痛效果實驗[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報,2011,13(7):45-46.

[3] 全智慧，趙自明，黃雪君，等.制川烏配方顆粒與標準煎劑對二甲苯致小鼠耳腫脹抑制作用的比較研究[J].藥物評價研究,2014,37(4):309-316.

[4] 康 飛，閆文俊，施澤濤，等.生姜鎮(zhèn)痛效果實驗觀察及其機制探索[J].陜西醫(yī)學雜志,2010,39(8):954-955.

[5] 夏東利，徐志立，張 瑩，等.穿心蓮內(nèi)酯對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用的實驗研究[J].兒科藥學雜志,2013,19(4):1-4.

(收稿2015-06-29；修回2015-08-04)

偏頭痛/中醫(yī)藥療法 鎮(zhèn)痛 動物實驗 小鼠 @頭痛寧膠囊

R747.2

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.11.052

△山西中醫(yī)學院第三中醫(yī)院(太原 030000)

▲延安大學咸陽醫(yī)院(咸陽 712000)

◇陜西省中醫(yī)醫(yī)院(西安 710000)