飼料酸化劑對水貂小腸絨毛形態、營養物質消化率和N、P環境排放的影響

王凱英，鮑 坤，徐 超，王夕國，岳志剛，李光玉

(中國農業科學院特產研究所，吉林 132109)

飼料酸化劑對水貂小腸絨毛形態、營養物質消化率和N、P環境排放的影響

王凱英，鮑 坤，徐 超，王夕國，岳志剛，李光玉*

(中國農業科學院特產研究所，吉林 132109)

本試驗旨在通過不同水平磷酸、檸檬酸、乳酸對水貂營養物質消化率、小腸絨毛形態及N、P環境排放量的比較，篩選適宜水貂使用的酸化劑種類及其水平。將健康、體重相近的雄性育成短毛黑水貂100只，隨機分成10組，每組10只。對照組飼喂基礎鮮料，Ⅱ～Ⅹ組分別在鮮料中添加0.4%、0.6%、0.8%磷酸；0.5%、1.0%、1.5%檸檬酸；0.5%、1.0%、1.5%乳酸。結果表明，各組間干物質采食量(DMI)及干物質(DM)、粗蛋白(CP)、鈣消化率無顯著差異(P>0.05)，但隨酸化劑添加而升高的趨勢明顯；Ⅰ、Ⅳ組粗脂肪(EE)消化率顯著高于Ⅴ、Ⅸ、Ⅹ組(P<0.05)；Ⅷ、Ⅸ組磷消化率極顯著優于其他各組(P<0.01)，Ⅸ組磷消化率最高；各組間水貂小腸絨毛高度差異不顯著(P>0.05)，Ⅷ組小腸絨毛平均高度最大，是最小的Ⅲ組的145.8%，是對照組的120.3%；不同處理組水貂小腸絨毛表面積差異不顯著(P>0.05)，但Ⅷ組小腸絨毛平均表面積最大，是最小的Ⅲ組的160.24%，是對照組的131.77%；各組間水貂小腸絨毛密度差異不顯著(P>0.05)；各組間水貂N環境排放量無顯著差異(P>0.05)，但添加酸化劑N環境排放量下降趨勢明顯，對照組比最低的Ⅷ組高34.02%；對P環境排放量影響極顯著(P<0.001)，Ⅷ組最低，比對照組低57.33%。綜上表明：飼料酸化劑促進小腸絨毛發育、改善水貂營養物質消化率、降低環境氮、磷排放量作用明顯，本研究范圍內0.5%乳酸效果較好。

酸化劑；水貂；小腸絨毛；消化利用率；N、P排放量

酸性環境是飼料組分在動物體內被充分消化吸收、有益菌群合理生長、病原微生物受到有效抑制的必要條件，在飼料中添加酸化劑能有效調節動物胃內pH。研究表明，飼料酸化劑可改善日糧適口性，增加采食量和提高營養物質利用率，降低N、P環境排放量，促進小腸絨毛發育[1-8]。該技術在豬、雞等畜禽上的研究和應用已十分普遍，但因為水貂馴養歷史較家畜短，所以該技術是否適用，以及適宜酸化劑的種類和劑量有待進一步研究。

本試驗就磷酸、檸檬酸、乳酸對水貂小腸絨毛平均高度、密度和小腸絨毛平均表面積等形態指數和營養物質消化率及N、P環境排放量的影響進行研究，篩選適宜的酸化劑種類和水平，為飼料酸化技術在水貂養殖業的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

飼養試驗于2011年8月11日-12月5日在中國農業科學院特產研究所毛皮動物實驗基地進行。

1.2 試驗動物

選擇健康、體重相近、90日齡的雄性短毛黑水貂(Mustlavison)100只，體重平均為(1 160.14±130.71)g，隨機分成10組，每組10頭，各組間體重差異不顯著(P>0.05)，單籠飼養。

1.3 試驗設計和日糧配制

以膨化玉米、海雜魚、雞肝、雞腺胃、食鹽、預混料等配制基礎日糧，配方見表1。基礎日糧為對照組，基礎日糧添加酸化劑配制其余各組日糧，分別為0.4%、0.6%、0.8%磷酸(Ⅱ～Ⅳ組)，0.5%、1.0%、1.5%檸檬酸(Ⅴ～Ⅶ組)，0.5%、1.0%、1.5%乳酸(Ⅷ～Ⅹ組)。

表1 試驗水貂基礎日糧配方和營養水平

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet %

飼料原料Composition含量Content營養水平Nutrientlevels含量Content膨化玉米面Extrudedcorn14.0代謝能/(MJ·kg-1)ME13.24海雜魚Oddfish63.0干物質DM31.29雞肝Chickenliver9.0粗蛋白CP35.42雞腺胃Chickenglandularstomach12.5粗脂肪EE14.87食鹽NaCl0.5鈣Ca2.09預混料Mineralandvitaminpremix1.0磷P1.24總計Total100.0

每千克預混料含有:VA 100萬IU， VD 3 200萬 IU，VE 6 000 IU，VB1600 mg，VB2800 mg，VB6300 mg，VB1212 mg，VK3100 mg，VC 40 000 mg，煙酸4 000 mg，泛酸1 200 mg，生物素20 mg，葉酸80 mg，膽堿30 000 mg，Fe 8 200 mg，Cu 800 mg，Mn 1 200 mg，Zn 5 200 mg，I 50 mg，Se 20 mg，Co 800 mg

Contained the following per kg of premix： VA 1 000 000 IU， VD 32 000 000 IU，VE 6 000 IU，VB1600 mg，VB2800 mg，VB6300 mg，VB1212 mg，VK3100 mg，VC 40 000 mg，niacin acid 4 000 mg，pantothenic acid 1 200 mg，biotin 20 mg，folic acid 80 mg，choline 30 000 mg，Fe 8 200 mg，Cu 800 mg，Mn 1 200 mg，Zn 5 200 mg，I 50 mg，Se 20 mg，Co 800 mg

1.4 飼養管理

試驗動物由專人飼養，每日配好鮮料后30 min 內飼喂，投料時間為08：00和15：00，自由采食、保證飲水。

1.5 樣品采集

1.5.1 飼料采集 各處理飼料配好后30 min內采集料樣本并測定pH。1.5.2 采食量記錄 從8月17日起每隔7 d精確稱量水貂投料量和剩料量1次，記錄每頭水貂采食量。1.5.3 營養物質消化代謝試驗 于10月9-11日進行消化試驗，采用全收糞法收集水貂糞便，并對水貂營養物質采食量、糞便排泄量等精確計量，飼料、糞便、尿液樣本處理后保存備用。

1.5.4 小腸樣本采集 12月5日結合取皮在水貂進食8 h后，處死水貂后迅速取出十二指腸、空腸，進行腸雙側結扎，進行水貂小腸、空腸無菌性采集，剪去2～3 cm一段空腸，生理鹽水清洗后放入10%甲醛溶液浸泡固定，用于制備空腸組織切片。

1.6 測定指標及方法

應用pH計精確測定水貂飼料、胃及腸道內容物pH；應用恒溫烘箱對采集的飼料樣本進行65 ℃烘干，粉碎備用；干物質、粗蛋白、粗脂肪、鈣、磷等營養物質含量按GB/T 14924.9-2001方法測定。空腸組織經24 h固定后進行脫水、包埋、切片、染色、封片處理，在顯微鏡下觀察，計量小腸絨毛高度，應用專用軟件分析小腸絨毛密度和小腸絨毛表面積。

1.7 數據整理和分析

數據用Excel2010進行整理，用SAS軟件中的DUCAN程序進行方差分析和多重比較。

2 結 果

2.1 不同酸化劑處理對水貂飼料、胃及腸道內容物pH的影響

基礎料為對照組，基礎料中添加不同水平磷酸、檸檬酸、乳酸，配制Ⅱ～Ⅹ組日糧，飼料配好30 min內應用pH計精確測定飼料pH，結合屠宰試驗，在水貂進食8 h后進行胃、腸道內容物的無菌采集，液氮保存，30 min內應用pH計精確測定pH，結果如表2所示，各組鮮料pH差異極顯著(P<0.01)，Ⅶ組最低；各組水貂胃內容物pH差異極顯著(P<0.01)，Ⅳ組最低；各組水貂腸內容物pH差異不顯著(P>0.05)，Ⅷ組最低。

表2 各處理日糧、水貂胃液、腸液pH

Table 2 pH of diet，gastric juice and intestines juice

項目Item處理Treatment含量(加粗的為磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-value飼料pHDietpH磷酸6.49±0.01A5.72±0.01C5.50±0.01E5.34±0.03F檸檬酸6.49±0.01A5.69±0.01D5.11±0.01I4.57±0.01J乳酸6.49±0.01A5.89±0.03B5.20±0.01G5.14±0.02H0.0140.0001胃液pHGastricjuicepH磷酸4.48±0.31AB3.79±0.44BCDE3.54±0.37DE3.49±0.50E檸檬酸4.48±0.31AB4.89±0.94A4.36±1.02ABCD3.75±0.25BCDE乳酸4.48±0.31AB3.98±0.16BCDE4.39±.073ABC3.59±0.34CDE0.5770.0009腸液pHIntestinesjuicepH磷酸6.64±0.166.69±0.186.73±0.176.62±0.15檸檬酸6.64±0.166.81±0.286.67±0.176.64±0.29乳酸6.64±0.166.42±0.136.78±0.376.62±0.260.2260.380

同一行數值標相同字母或不標表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，下表(圖)同

In the same row，values with the same letter superscripts or no superscripts mean no significant difference (P0.05)，values with different small letter superscripts mean significant difference(P<0.05)，different capital letter superscripts mean significant difference(P<0.01).The same as below

2.2 不同酸化劑處理對水貂小腸絨毛形態的影響

由表3可知，鮮料中添加磷酸、檸檬酸、乳酸對水貂小腸絨毛高度、小腸絨毛平均表面積和小腸絨毛密度無顯著影響(P>0.05)，但添加酸化劑后水貂小腸絨毛高度、表面積、分布密度有明顯增加趨勢，0.5%乳酸處理組絨毛高度、絨毛平均表面積最高，分別是對照組的120.3%和131.76%；0.6%磷酸處理組小腸絨毛密度最高，是對照組的133.42%。

表3 不同處理水貂小腸絨毛形態

Table 3 Effect of different treatments on intestinal villus morphology in furring mink

處理Treatment含量/%Content絨毛高度/μmVillusheight絨毛表面積/μm2Villusarea絨毛密度/(根·μm-2)Villusdensity對照組Control819.2±239.18316211±891663.92±0.81磷酸Phosphoricacid0.4806.0±63.27336263±473214.48±0.430.6676.0±243.50260023±1274905.23±2.350.8834.8±94.70337431±610154.62±0.54檸檬酸Citricacid0.5799.3±158.99306716±962083.20±1.911.0705.3±268.06286012±1394703.65±0.321.5820.8±111.38343458±1008824.16±0.49乳酸Lacticacid0.5985.5±159.88416653±700854.22±0.471.0800.2±99.65302930±637723.77±0.491.5954.0±226.63375943±1329764.43±0.39R-MSE180.529.781.06P值P-value0.670.760.57

2.3 不同酸化劑處理對水貂營養物質采食及消化率的影響

由表4可知，磷酸、檸檬酸、乳酸對水貂干物質采食量(DMI)、干物質消化率(DMD)、粗蛋白消化率(CPD)、鈣消化率影響均不顯著(P>0.05)；粗脂肪消化率(EED)隨著酸化劑添加而下降趨勢明顯，Ⅰ、Ⅳ脂肪消化率顯著高于Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ組，其中Ⅳ組最高(P<0.05)；磷消化率隨飼料酸化劑添加上升趨勢明顯，其中Ⅷ、Ⅸ磷消化率極顯著高于其他各組(P<0.01)，Ⅸ組最高；除脂肪消化率外添加飼料酸化劑組與對照組相比，各指數均有明顯上升趨勢。

2.4 不同酸化劑處理對水貂養殖N、P環境排放的影響

由表5可知，各組水貂N環境排放量差異不顯著(P>0.05)，但飼料酸化劑處理組N環境排放量下降趨勢明顯，最高的對照組比最低的Ⅷ組高34.02%；對P環境排放量影響極顯著(P<0.001)，添加0.5%乳酸組環境P排放量最低，比對照組低57.33%。

3 討 論

3.1 飼料酸化劑對水貂小腸絨毛形態的影響

小腸是動物吸收養分的主要部位，小腸絨毛形態直接影響著營養物質消化和吸收，特別是小腸絨毛高度、表面積和分布密度直接影響小腸吸收面積。成熟細胞才有吸收功能，而絨毛高度、平均表面積、分布密度與絨毛上皮細胞數量呈顯著正相關[9-10]，因此絨毛長、表面積大時，成熟細胞多，養分吸收能力強[11]。本試驗表明，飼料酸化劑對水貂小腸絨毛高度、密度、平均表面積都有影響，促進小腸絨毛發育作用明顯。因為適宜水平的酸化劑能夠抑制有害細菌生長，激活并使消化酶保持較高活性，提高腸道中氨基酸和小肽類物質濃度，促進小腸絨毛表面細胞的發育。這和前人的研究結果[12-15]是一致的。

3.2 飼料酸化劑對水貂營養物質消化利用的影響

3.2.1 飼料酸化劑對水貂干物質采食量的影響 干物質采食量是動物自身狀態(即日齡、性別、生理時期、饑餓情況、環境條件等)與飼料特性(能量濃度、含水率、適口性等)共同作用的結果。本試驗中，各組水貂性別相同、出生日期相近、所處生理時期相同、體重無顯著差異(P>0.05)， 都是處于自由采食狀態，由相同基礎料添加種類和不同水平酸化劑配制日糧。統計結果表明，各組水貂DMI無顯著差異(P>0.05)，可知本試驗范圍內各組添加酸化劑對

表4 水貂采食量及營養物質消化率

Table 4 Effect of different treatments on nutrient digestibility in furring mink %

項目Item處理Treatment含量(加粗的為磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-value干物質采食量/(g·d-1)DMI磷酸119.76±27.01103.13±12.01107.75±6.15112.82±13.31檸檬酸119.76±27.01115.41±21.74127.31±12.68104.02±19.31乳酸119.76±27.01115.61±28.44119.76±27.01122.33±9.5817.520.31干物質消化率/%DMD磷酸76.95±2.3474.84±4.7276.85±2.5879.46±1.07檸檬酸76.95±2.3476.48±5.2677.24±3.1278.30±5.95乳酸76.95±2.3478.89±3.0177.20±1.4476.87±4.053.720.74粗蛋白消化率/%CPD磷酸85.08±1.4584.94±2.1086.58±2.5487.44±2.64檸檬酸85.08±1.4586.50±2.6487.18±2.3786.71±3.04乳酸85.08±1.4586.47±2.1786.22±2.1886.89±2.172.240.72粗脂肪消化率/%EED磷酸95.76±0.24a94.57±2.53abc95.18±0.58ab95.79±0.72a檸檬酸95.76±0.24a92.08±4.58c95.08±0.66ab95.03±1.73ab乳酸95.76±0.24a93.71±1.15abc92.79±2.34bc92.92±0.92bc2.020.02鈣消化吸收率/%Cadigestibility磷酸28.59±16.3528.05±17.5525.53±15.8619.93±2.85檸檬酸28.59±16.3534.15±21.4637.96±25.1729.52±13.42乳酸28.59±16.3548.97±11.6534.59±11.0734.36±16.0116.090.25磷消化吸收率/%Pdigestibility磷酸41.01±4.37C49.69±6.98BC54.67±22.69BC49.95±7.78BC檸檬酸41.01±4.37C53.97±6.39BC58.43±15.31B58.79±9.03B乳酸41.01±4.37C73.56±11.14A78.58±18.24A56.13±5.65C10.070.0001

表5 水貂氮、磷環境排放量

Table 5 Effect of different treatments on N，P Excretion of growing mink g·d-1

項目Item處理Treatment含量(加粗的為磷酸)/%Content00.4/0.50.6/1.00.8/1.5R-MSEP值P-valueN環境排放量Nexcretion磷酸1.30±0.251.14±0.251.02±0.091.12±0.25檸檬酸1.30±0.251.13±0.201.15±0.251.08±0.25乳酸1.30±0.250.97±0.141.24±0.230.97±0.160.2040.23P環境排放量Pexcretion磷酸0.75±0.15A0.62±0.11ABC0.64±0.10ABC0.68±0.12AB檸檬酸0.75±0.15A0.61±0.08ABC0.53±0.14BC0.50±0.16BCD乳酸0.75±0.15A0.32±0.05D0.49±0.24CD0.61±0.09AB0.1340.001

水貂日糧適口性影響不顯著(P>0.05)，這和王凱英等[16]研究結果是一致的。水貂DMI隨著酸化劑添加水平先升高后下降趨勢明顯，表明在適宜范圍內，酸化劑能夠促進水貂采食，超過適宜范圍飼料pH過低就會影響適口性，引起DMI下降。

3.2.2 飼料酸化劑對水貂CP、EE、Ca、P消化率的影響 CP、EE、Ca、P是對水貂重要的營養物質，其消化吸收除與營養物質自身特征(化合形式、日糧中濃度和相互比例等)相關外，還與消化液濃度、pH、特定消化酶活性有關。本試驗基礎日糧相同，組間日糧營養物質濃度和相互比例均無差異，日糧中酸化劑添加類別及水平不同對消化液分泌量、濃度、pH影響不同，這就使得消化酶活性有所變化，如表2，組間日糧和胃液pH差異顯著(P<0.05)，所以CP、Ca、P 等消化吸收與pH有直接關系的營養物質的消化利用率，隨酸化劑添加而提高趨勢明顯，這與R.Genitsen等在仔豬、肉雞和水貂上的研究結果[17-20]是一致的，即：酸化劑通過調節消化道pH，調控消化酶活性，促進動物體內中間代謝和蛋白質合成，同時適宜的pH又促進了飼料中礦物元素從螯合等狀態轉化為易吸收的離子狀態，促進了鈣、磷、銅、鋅礦物質營養的吸收，當酸化劑超過一定水平后，Ca、P消化率又呈下降趨勢，這是因為當可吸收性Ca、P含量超過需要時，其吸收率就會下降，這也是機體調節機制的體現；EE的消化率和體內脂肪酶活性關系緊密，脂肪酶在偏堿性的環境條件下活性較高，隨著pH下降，脂肪酶活性下降[21]，本試驗中處理組脂肪消化率低于對照組就是這一原因，與王凱英等研究結果一致[16]。

3.3 飼料酸化劑對水貂N、P環境排放量的影響

N、P是畜牧養殖廢棄物的主要污染成分，多源自糞、尿。水貂是肉食性毛皮動物，其飼料中動物成分達55%～65%，其糞、尿N、P含量較高，造成很大環境壓力。試驗組N環境排放量普遍小于對照組，這是因為適宜水平的飼料酸化劑對水貂消化道微生物有調節作用，能提高消化酶活性，提高營養物質消化率，同時酸化劑能夠促進動物體內中間代謝和蛋白質合成，所以從糞、尿排出的N、P總量減少，起到了保護環境、健康養殖的作用。Ⅳ組比Ⅷ、Ⅹ組蛋白質消化率高，N環境排放量卻比Ⅷ、Ⅹ組高，是因為乳酸直接參與是營養代謝，有促進營養物質，特別是蛋白質合成代謝的作用。但是隨著酸化劑添加量不斷增加，水貂飼料、消化道pH隨著降低，超過臨界值后消化道菌群數量、消化酶活性及營養物質代謝都會受到影響，引起營養物質消化吸收率下降、代謝率升高、存留率下降，環境排放量增加。可見無論磷酸、檸檬酸還是乳酸作為飼料酸化劑均有其適宜區間，在適宜區間篩選適宜水平應用是技術關鍵。

4 結 論

水貂鮮料中添加適宜水平的磷酸、檸檬酸、乳酸均能促進小腸絨毛生長發育，提高干物質采食量和營養物質的消化吸收率，極大地降低了N、P環境排放量。本試驗范圍內以0.5%乳酸組綜合效果最佳。

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(編輯 郭云雁)

Effect of Acidifier on Intestinal Villus Morphology，Nutrient Digestibility，N，P Excretion of Growing Mink

WANG Kai-ying，BAO Kun，XU Chao，WANG Xi-guo，YUE Zhi-gang，LI Guang-yu*

(InstituteofSpecialWildEconomicAnimalandPlantSciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Jilin132109，China)

The experiment was carried out to investigate the effect of acidifiers with different levels in the same basal diet on intestinal villus morphology，nutrient digestibility and N，P excretion in growing mink.One hundred black male minks were randomly allotted into 10 treatment groups.Every group consisted of 10 minks.The control was fed conventional fresh diet，the testing groups were added acidifier，phosphoric acid 0.4%(Ⅱ)，0.6% (Ⅲ) and 0.8%(Ⅳ)，citric acid 0.5%(Ⅴ)，1.0%(Ⅵ) and 1.5%(Ⅶ)，lactic acid 0.5%(Ⅷ)，1.0%(Ⅸ) and 1.5%(Ⅹ)，respectively.The results indicated that there were no significantly difference (P>0.05) in the DMI and digestibility of DM，CP and Ca among groups，but there were clearly increasing tendencies for these with acidifiers adding.The EE digestibility in groupⅠ and Ⅳ were significantly higher than that in group Ⅴ，Ⅸ，Ⅹ(P<0.05).The P digestibility in group Ⅷ and Ⅸ were higher than that in other groups(P<0.01)，and Ⅸ group was the best.The height of intestinal villus was similar(P>0.05) among groups，and Ⅷ group was the highest，it was 145.8% and 120.3% compared to group Ⅲ and Ⅰ.The average surface area of intestinal villus had not significantly different(P>0.05) among groups，however，it in Ⅷ group were 160.24% and 131.77% respectively to group Ⅲ and Ⅰ.There were no significantly different (P>0.05) in the density of intestinal villus；The N excrention was similar(P>0.05) among groups and the decrease tendencies with acidifiers addition was clearly，the group Ⅰ was higher 34.02% than group Ⅷ.The quantity of P excrention was significantly different (P<0.001)，group Ⅷ was the lowest and fewer 57.33% than group Ⅰ.The results showed that it can significantly improve the activity of nutrient digestion and intestinal villus morphology and decrease N，P excretion，by adding 0.5% of lactic acid during hair growth period in mink diets.

acidifier；mink；intestinal villus morphology；nutrient digestibility；N，P excretion

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.04.022

2014-04-30

國家公益性行業(農業)科研專項(200903014)；吉林省科技發展計劃重點項目(20110230)

王凱英(1975-)，男，副研究員，碩士，主要從事經濟動物營養與生物學研究，E-mail：tcswky@126.com

*通信作者：李光玉，研究員，主要從事經濟動物營養與飼養研究，E-mail：tcslgy@126.com

S839；S815

A

0366-6964(2015)04-0665-07