寡雄腐霉防治蘋果樹腐爛病試驗

曹欣然 鄒宗峰 田明英

山東省煙臺市農業技術推廣中心植保站·264008

寡雄腐霉防治蘋果樹腐爛病試驗

曹欣然 鄒宗峰 田明英

山東省煙臺市農業技術推廣中心植保站·264008

蘋果樹腐爛病是果園的重要病害，危害主枝、主干，導致死枝、死樹，嚴重時導致毀園。防治腐爛病通常在早春將病斑刮除，然后涂抹藥劑，其中使用最多的是福美胂,其他有松焦油、腐植酸、腐植酸銅、過氧乙酸等。調查中發現防治腐爛病的用藥比較混亂，一些常用藥劑在無公害果園生產中已被禁用。因此,迫切需要開發篩選出一種既能防治蘋果樹腐爛病,且安全、無毒、有效的新型農藥來取代。

寡雄腐霉是一種廣譜微生物殺菌劑，和化學藥品、傳統生物制劑相比，無論對農作物還是對人體、生態環境都相對安全，同時可作用于作物的不同生育期，不產生抗性。該殺菌劑是自然界中存在的一種攻擊性很強的寄生真菌，能在多種農作物根圍定殖，不會對作物產生致病作用，能抑制或殺死其它致病真菌和土傳病原菌，同時可以誘導植物產生防衛反應，從而減少病原菌的入侵。

本研究選用不同濃度的寡雄腐霉藥液,對蘋果樹腐爛病的抑菌作用進行毒力測定，同時根據室內毒力測定結果進行田間藥效試驗,旨在為大面積推廣使用該藥劑提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 供試藥劑

寡雄腐霉孢子粉（多里維生），北京比奧瑞生物科技有限公司；4.5%腐殖·硫酸銅水劑（腐迪），96.6%甲基硫菌靈原藥，煙臺綠云生物化學有限公司。

1.2 供試菌種

供試菌種由青島農業大學農學與植保學院植病室分離自蘋果樹腐爛病的樹皮。

1.3 試驗地概況

試驗地位于煙臺招遠市金陵鎮大戶陳家村。樹齡20～25年，栽培密度為3 m×4 m，果園管理粗放，蘋果樹腐爛病發生較嚴重，所有試驗小區的栽培管理條件均勻一致。

1.4 試驗方法

1.4.1 室內毒力測定采用生長速率法,用萬分之一電子天平分別稱取寡雄腐霉孢子粉50 mg,用10 mL滅菌水制備成5 000 μg/mL孢子懸浮液,分別按二倍法逐步進行稀釋,得到寡雄腐霉5 000 μg/mL、500 μg/mL、50 μg/mL和5 μg/mL的藥液；稱取96.6%甲基硫菌靈原藥51.7 mg和4.5%腐殖·硫酸銅水劑1.1 g,制備成5 000 μg/mL母液，二倍法稀釋后得到5 000 μg/mL和500 μg/mL的藥液。

在無菌操作條件下，把配置好寡雄腐霉母液用冷卻到30℃左右的PDA培養基稀釋成50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的系列濃度的含毒培養基平板；把配置好的甲基硫菌靈母液用PDA培養基稀釋成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL的系列濃度的含毒培養基平板；把配置好的腐殖·硫酸銅母液用PDA培養基稀釋成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL的系列濃度的含毒培養基平板。設不含藥劑處理的空白對照，各處理重復4次。

接種蘋果腐爛病菌,在26℃恒溫箱中培養36 h后,十字法交叉測量各皿菌落直徑,然后計算不同藥液對菌絲生長的抑制,求出每個藥劑的有效中量EC50的值。

1.4.2 田間藥效試驗試驗設計按照國家標準GB/T 17980.116和117制定，共設3個處理。寡雄腐霉2 000倍,4.5%腐殖·硫酸銅水劑200～300 mL/m2，清水為對照。采用樹干涂抹法用藥。施藥前將病部刮除,將藥液涂抹于其上。每個處理重復5次,分別在A、B、C、D和E 5個小區同時進行,用紅漆標記。采用隨機排列,寡雄腐霉分別于2013年6月18日、7月29日、8月29日和9月30日用藥涂抹；腐殖硫酸銅于3月份刮治腐爛病斑后進行涂抹，2013年11月18日進行調查,計算不同小區的復發率和新生病疤增長率,統計防效。

試驗數據計算方法：

病疤復發率（%）=病疤累計復發病塊數÷調查病疤總塊數×100

防治效果（%）=（空白對照區病疤復發率—藥劑處理區病疤復發率）÷空白對照區病疤復發率×100

平均每株新病塊數（塊/株）＝新病塊數÷調查總株數

新增病塊增長率（%）＝（藥后每株病塊數－藥前每株病塊數）÷藥前每株病塊數×100

防治效果（%）＝〔1－（對照區藥前新增病塊增長率×處理區藥后新增病塊增長率）÷（對照區藥后新增病塊增長率×處理區藥前新增病塊增長率）〕×100

2 結果與分析

2.1 室內毒力測定

由表1可以看出，寡雄腐霉在50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的濃度時，抑菌率分別為86.31%、79.23%、64.32%、56.11%、53.32%和42.25%，其有效中量濃度EC50為0.02 μg/mL。甲基硫菌靈在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL濃度時,其抑菌率分別為82.52%、65.77%、51.42%、44.17%、22.19%和10.21%，其有效中量濃度EC50為8.03 μg/mL。腐殖·硫酸銅水劑在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL濃度時,其抑菌率分別為85.23%、69.65%、57.09%、36.16%、23.60%、11.05%，其有效中量濃度EC50為8.50 μg/mL。寡雄腐霉有效中量濃度EC50低于甲基硫菌靈的有效中量濃度EC50401倍,低于腐殖硫酸銅水劑有效中量濃度EC50425倍。

表1 不同藥劑防治蘋果樹腐爛病的毒力測定結果

2.2 田間藥效試驗

通過田間藥效對比試驗(表2、3)表明,寡雄腐霉涂治后的病疤復發率為10.14%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑涂治后的病疤復發率為14.61%，空白對照為65%；寡雄腐霉病疤復發防效達到84.40%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑防效77.53%，寡雄腐霉的病疤復發防效是4.5%腐殖·硫酸銅水劑的1.10倍，差異性顯著。寡雄腐霉處理后的新生病疤增長率較低,為5.92%,而4.5%腐殖·硫酸銅水劑為8.94%,清水對照為40.0%；寡雄腐霉防治新生病疤的防效為84.31%，4.5%腐殖·硫酸銅水劑防效為74.67%，寡雄腐霉的病疤復發防效是4.5%腐殖·硫酸銅水劑的1.13倍，差異性顯著。

表2 藥劑防治蘋果腐爛病病疤復發結果

表3 藥劑防治蘋果腐爛病新生病疤結果

3 結論與討論

通過初步研究表明,寡雄腐霉2 000倍防治蘋果樹腐爛病病疤復發防治效果為84.40%，明顯優于對照藥劑4.5%的腐殖硫酸銅水劑(防治效果為77.53%)。同時，防治腐爛病新生病疤防效上，寡雄腐霉2 000倍的防效為84.31%，防效顯著。該藥劑是生物源農藥，對環境無不良影響，符合綠色果品生產要求，在生產上普遍應用后,對控制蘋果樹腐爛病的危害及進一步提高防治水平有重要意義。

煙臺市矮化蘋果園有害生物綜合防控關鍵技術集成與應用2012NC233