付麗萍,丁 艷,馬學芳,聶玉琴
在醫學研究過程中,小鼠由于體型小、易于控制、飼養管理方便,常被用作動物實驗。而小鼠尾靜脈注射就是常用的方法之一,但由于小鼠尾靜脈較細,同時尾部皮膚角質層較厚造成穿刺難度較大,在很大程度上影響了實驗的進展,筆者在小鼠尾靜脈注射造影劑的實驗當中總結了一種新的靜脈穿刺方法,其操作更簡單、穿刺成功率更高,現介紹如下。
1.1 材料 選取雌性BALB/c-nu/nu裸鼠40只,鼠齡4周~6周,體重14g~18g。飼養環境:SPF級,分籠飼養,籠具、墊料、飲用水和食料均經滅菌處理,按標準方式給予,裸鼠自由進食及飲水。隨機分為A組和B組各20只。材料包括1.5m×1.2m操作臺1張、10%水合氯醛、75%乙醇、生理鹽水、41頭皮2針數個、醫用膠布1卷、醫用棉簽及一次性5mL、1mL注射器。
1.2 方法
1.2.1 操作方法 A組用1mL一次性注射器抽取10%水合氯醛0.2mL在裸鼠腹部皮下注射0.2mL,待裸鼠鎮靜,將裸鼠平臥放置于1.5m×1.2m操作臺面上,協助者一人分開裸鼠后退與腹部,充分暴露左右腿內側,選擇清晰可見的股靜脈1條,用75%乙醇棉簽擦拭消毒預穿刺部位,操作者右手持41 2頭皮針,拇指、食指前后固定針柄,左手握住裸鼠小腿并繃緊選皮膚,選擇進針點,針尖與靜脈角度5°~10°進針,針頭刺入后若無阻力輕抽見回血,輕推注射器見液體沿靜脈走向流動表明穿刺成功,沿血管方向緩慢置入針所剩全部針梗,用膠布固定針柄與小腿部防止針頭脫出。連接抽有造影劑的1mL注射器,勻速緩慢推注。B組用1mL一次性注射器抽取10%水合氯醛0.2mL在裸鼠腹部皮下注射0.2mL,待裸鼠鎮靜,然后將尾部浸泡于45℃溫水2min,進針處最好在尾部下1/3處或1/2,左手食指或中指壓住小鼠靠近身體的一端,拇指壓住所選血管的尾尖端緊貼操作臺邊緣,進針時一定要掌握好進針角度,針頭與操作臺面平行,針尖稍稍朝下,右手拇指和食指前后固定針柄,刺入血管回抽見回血或進針無阻力輕推鹽水無泛白的皮丘則穿刺成功,沿血管方向緩慢置入針所剩全部針梗,用膠布固定針柄與尾部。連接抽有造影劑的1mL注射器,勻速緩慢推注。兩組靜脈穿刺操作由同一護士完成,操作過程中記錄每只小鼠從鎮靜到穿刺成功所需的穿刺次數及所耗的時間。
1.2.2 統計學方法 采用SPSS 13.0進行統計分析,計量資料采用均數±標準差(±s)表示,計數資料比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
實驗觀察到,從小鼠鎮靜時算起到穿刺成功,A組股靜脈穿刺所消耗時間在13s~87s(27.50s±18.23s),B組尾靜脈注射所消耗時間在12s~207s(42.71s±37.99s),A組小鼠股靜脈穿刺所消耗時間明顯小于B組(P<0.05)。A組股靜脈穿刺次數為1次或2次,穿刺成功率95%,B組尾靜脈穿刺次數為1次~5次,穿刺成功率40%。
由于本研究選取的裸鼠需經過2次靜脈注射造影劑,對裸鼠靜脈注射造影劑的技術水平要求很高。小鼠尾靜脈注射是目前動物實驗最常用的操作方法,但由于小鼠尾靜脈較細、局部角質較厚,造成穿刺難度較大,很大程度上制約了實驗的成功與否[1],同時還存在小鼠尾靜脈注射時操作繁瑣、耗時較長、穿刺成功率較低。小鼠股靜脈穿刺注射方法選擇部位為小鼠大腿內側,此處皮膚較薄、小鼠靜脈清晰明顯,操作范圍視野較大便于掌握控制,此處靜脈血管與嬰幼兒的毛細血管有極其相似的特點,官腔細小但血管走向清晰,便于操作,對于有臨床兒科護理操作經驗的護理人員來講易于掌握,同時此處靜脈注射操作簡單,不需要特制約束小鼠的工具,不需要擴張血管耗時較少,穿刺成功率較高。
[1] 陳霆,李楓,鄧巍,等.小鼠內呲靜脈叢注射與尾靜脈注射比較[J].中國比較醫學雜志,2014,24(1):72-73.
[2] 葉明霞,孔利佳,許迪,等,淺談大小鼠尾靜脈注射之經驗體會[J].中華臨床醫學雜志,2008,9(12):58-59.
[3] 溫軍業,問明,楊冬野,等.C57BL/6小鼠尾靜脈注射不同方法的比較[J].中華實驗外科雜志,2013,30(6):13-17.