372例腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗研究

張軍艷，何啟強(qiáng)，陸明海，任慧玲

(1.湖北省十堰市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科 442012；2.武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部公共衛(wèi)生學(xué)院，武漢 430072;3.湖北汽車工業(yè)學(xué)院校醫(yī)院，湖北十堰 442012)

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·論 著·

372例腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗研究

張軍艷1,2，何啟強(qiáng)2，陸明海1，任慧玲3△

(1.湖北省十堰市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科 442012；2.武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部公共衛(wèi)生學(xué)院，武漢 430072;3.湖北汽車工業(yè)學(xué)院校醫(yī)院，湖北十堰 442012)

目的 探討糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物的耐藥性。方法 十堰市中醫(yī)院2010年1月至2014年1月檢出的372例腸球菌(280例糞腸球菌和92例屎腸球菌)，對青霉素、紅霉素、氯霉素、萬古霉素、利奈唑胺等16種抗菌藥物的藥敏試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果 糞腸球菌和屎腸球菌耐藥率最高的均是紅霉素，分別為86.07%和92.39%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，耐藥率最低的均是利奈唑胺，分別為0.36%和1.09%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在青霉素、氨芐西林、他唑巴坦、奈替米星、環(huán)丙沙星和呋喃妥因等6種抗菌藥物中，糞腸球菌的耐藥率明顯高于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而在氯霉素和高濃度鏈霉素中，糞腸球菌的耐藥率明顯低于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物有不同程度的耐藥性，且耐藥率有差異。

屎腸球菌； 糞腸球菌； 耐藥； 抗菌藥物； 藥敏試驗

腸球菌廣泛存在于人體腸道內(nèi)，當(dāng)廣泛應(yīng)用免疫抑制劑或手術(shù)等創(chuàng)傷時，容易出現(xiàn)腸球菌的感染[1]。由于抗菌藥物的大量應(yīng)用，腸球菌也逐漸成為一類多重耐藥性致病菌。腸球菌中最常見的就是糞腸球菌和屎腸球菌，現(xiàn)通過2種腸球菌對16種抗菌藥物進(jìn)行藥敏試驗分析。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至2014年1月在十堰市中醫(yī)院就診的患者尿液、傷口分泌物、體液、血液等檢出的402株腸球菌，其中分離出糞腸球菌和屎腸球菌共372例。2011年120株，糞腸球菌96株，屎腸球菌24株；2012年129株，糞腸球菌98株，屎腸球菌31株；2013年123株，糞腸球菌86株，屎腸球菌37株。糞腸球菌共有280例，屎腸球菌共有92株。

1.2 儀器與試劑 瓊脂平板、血平板等。青霉素、氨芐西林、奈替米星、環(huán)丙沙星、他唑巴坦、替考拉寧、利福平、高濃度慶大霉素(500 μg/mL)、呋喃妥因、高濃度鏈霉素(2 000 μg/mL)、萬古霉素、利奈唑胺、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、亞胺培南16種抗菌藥物，將糞腸球菌ATCC 29212作為質(zhì)控菌株。

1.3 方法 每次檢出的菌株均經(jīng)冷凍保存，進(jìn)行試驗時將其融化，接種于涂抹新鮮羊血的瓊脂平板上，并將溫度調(diào)節(jié)至35 ℃，先培育18～24 h，再轉(zhuǎn)種血平板上進(jìn)行孵育，時間18～24 h。將培養(yǎng)好的待測菌株制成菌細(xì)胞懸液接種在帶藥液的瓊脂平板上，35 ℃恒溫，培育18 h觀察結(jié)果，如有細(xì)菌生長，則判定為耐藥。若未見細(xì)菌生長，需繼續(xù)培養(yǎng)至24 h,如有細(xì)菌生長，則判定為耐藥，反之，則判定為對該抗菌藥物敏感[2]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料使用百分率，組間比較應(yīng)用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 16種抗菌藥物藥敏試驗結(jié)果比較 糞腸球菌耐藥率從高到低依次為：紅霉素、高濃度鏈霉素、利福平、奈替米星、高濃度慶大霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、青霉素、氨芐西林、亞胺培南、他唑巴坦、氯霉素、呋喃妥因、替考拉寧、萬古霉素、利奈唑胺。紅霉素耐藥率最高，為86.07%，利奈唑胺最低，為0.36%。屎腸球菌耐藥率從高到低依次為：紅霉素、奈替米星、環(huán)丙沙星、利福平、他唑巴坦、氨芐西林、亞胺培南、高濃度慶大霉素、青霉素、高濃度鏈霉素、四環(huán)素、呋喃妥因、氯霉素、萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺。紅霉素耐藥率最高，為92.39%，利奈唑胺最低，為1.09%。

2.2 糞腸球菌和屎腸球菌藥敏試驗結(jié)果比較 青霉素、氨芐西林、他唑巴坦、奈替米星、環(huán)丙沙星、呋喃妥因等6種抗菌藥物中，糞腸球菌的耐藥率明顯高于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而氯霉素和高濃度鏈霉素中，糞腸球菌的耐藥率明顯低于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。3年中2種腸球菌的耐藥率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2種腸球菌對16種抗菌藥物的藥敏試驗結(jié)果比較[n(%)]

3 討 論

近年來抗菌藥物的濫用，由腸球菌引起的院內(nèi)感染特別嚴(yán)重。腸球菌的檢出率以糞腸球菌和屎腸球菌較高，約90.00%以上。本組糞腸球菌和屎腸球菌的總檢出率為92.54%，與其他研究文獻(xiàn)有一致性[3-4]。

藥敏試驗是檢驗科工作中最常見的基礎(chǔ)檢驗手段，也是指導(dǎo)臨床合理用藥的一種重要檢驗方法。本研究通過對16種常見抗菌藥物的藥敏試驗結(jié)果表明，糞腸球菌和屎腸球菌對16種抗菌藥物均有不同程度的耐藥性。最高耐藥率和最低耐藥率差異較大。最高耐藥率是紅霉素等大環(huán)內(nèi)酯類以及阿米卡星等氨基糖苷類抗菌藥物，對萬古霉素和利奈唑胺等“特殊級”抗菌藥物的耐藥率則很低。本組結(jié)果顯示，該院近3年內(nèi)抗菌藥物的耐藥情況與全國其他地區(qū)有相似之處[5]。但也有研究報道，腸球菌屬中糞腸球菌對絕大多數(shù)抗菌藥物(氯霉素除外)的耐藥率均顯著低于屎腸球菌[6]。

除藥敏試驗外，近年來對耐藥細(xì)菌還進(jìn)行基因方面的檢測，耐藥基因檢測能為細(xì)菌的耐藥機(jī)制以及流行病學(xué)提供更多的實驗室數(shù)據(jù)[7-10]。由于設(shè)備的限制，很多實驗室都不具備基因檢測手段，因此，藥敏試驗因其簡單、操作可行性大依然成為大多數(shù)實驗室進(jìn)行耐藥試驗的檢驗手段。

正常臨床檢驗中，藥敏試驗通常不需要選擇較多的抗菌藥物。美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)委員會建議的標(biāo)準(zhǔn)是慶大霉素、青霉素(半合成類青霉素，如氨芐西林)、萬古霉素。有關(guān)研究認(rèn)為，根據(jù)腸球菌檢出部位的不同而有所不同，如泌尿系統(tǒng)進(jìn)行磺胺類藥物和呋喃妥因等，而非泌尿系統(tǒng)則進(jìn)行青霉素類的藥敏試驗；如對青霉素耐藥，則進(jìn)行萬古霉素藥敏試驗[11]。本研究細(xì)菌藥敏試驗具有臨床意義，可為抗菌藥物耐藥性的研究提供一定的實驗室依據(jù)。

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Drug Sensitive Analysis of Enterococcus towards Sixteen Antibacterials of Our Institute in Nearly Three Years

ZHANGJun-yan1,2,HEQi-qiang2,LUMing-hai1，RENHui-ling3△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory，HospitalofTraditionalChineseMedicineofShiyanCity,Shiyan,Hubei442012,China;2.DepartmentofPublicHealth,SchoolofMedicine,WuhanUniversity,Wuhan,Hubei430072,China;3.DepartmentofSchoolHospital,HubeiAutomotiveIndustriesInstitute,Shiyan,Hubei442012,China)

Objective Discuss drug resistance of enterococcus faecium and enterococcus faecalis to sixteen antibiotics.Methods Experiment with drug sensitivity of 372 types of entrococcus (including 280 enterococcus faecium and 92 enterococcus faecalis) were detected to sixteen antibiotics such as penicillin,erythrocin,chloramphenicol,vancomycin,linezolid etc.from Jan.2010 to Jan.2014.The data were analized.Results In nearly three years,the highest resistance rate of enterococcus faecium on erythrocin is 86.07%,the lowest on linezolid is 0.36%.The highest resistance rate of enterococcus faecalis on erythrocin is 92.39%,the lowest on linezolid is 1.09%.The resistance rate of enterococcus faecium is significantly higher than the enterococcus faecalis (P<0.05) among six antibiotics such as penicillin,ampicillin,tazobactam,netilmicin,ciprofloxacin and macrodantin,however,the resistance rate of enterococcus faecium is significantly lower than the enterococcus faecalis (P<0.05) among chloramphenicol and high concentrations of streptomycin.Conclusion Enterococcus faecium and enterococcus faecalis have varying degrees of multi-antibiotic resistance for sixteen antibiotics.

enterococcus faecium; enterococcus faecalis; antibiotic resistance; antimicrobial susceptibility test

張軍艷，女，碩士，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。△

，E-mail:475077981@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.037

A

1672-9455(2015)14-2063-02

2014-12-25

2015-02-22)