探討急性淋巴細胞白血病患者費城染色體陽性的生物學特征及臨床預(yù)后

李新星，墻 星，張小南，羅效梅，蔡 俊

(1.武警重慶市總隊醫(yī)院檢驗科，重慶 400061；2.第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院血液科，重慶 400037；3.四川省瀘州市婦幼保健院檢驗科 646000)

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·論 著·

探討急性淋巴細胞白血病患者費城染色體陽性的生物學特征及臨床預(yù)后

李新星1，墻 星2△，張小南3，羅效梅1，蔡 俊1

(1.武警重慶市總隊醫(yī)院檢驗科，重慶 400061；2.第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院血液科，重慶 400037；3.四川省瀘州市婦幼保健院檢驗科 646000)

目的 分析費城(Ph)染色體陽性(+)急性淋巴細胞白血病(ALL)的發(fā)生率，探討其生物學特征與臨床預(yù)后的關(guān)系。方法 應(yīng)用G顯帶的常規(guī)細胞遺傳學技術(shù)對300例ALL患者進行檢測，其中Ph染色體(+)患者36例，Ph染色體陰性(-)患者264例，分析Ph染色體(+)組患者與Ph染色體(-)組患者的生物學特征、緩解率、生存期差異。結(jié)果 300例ALL初診患者發(fā)現(xiàn)Ph染色體(+)患者36例，Ph染色體陽性率為12.0%。Ph(+)組患者的中位血紅蛋白、血小板計數(shù)、外周血和骨髓幼稚淋巴細胞比例與Ph染色體(-)組患者比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；但Ph(+)組患者的白細胞計數(shù)明顯高于Ph(-)組患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。36例Ph染色體(+)患者免疫分型資料顯示：前B-ALL 9例、My+-ALL 5例、Common-ALL 22例。預(yù)后分析顯示：Ph(+)組ALL患者和Ph(-)組ALL患者的第1次緩解率分別為52.8%(19/36)和84.8%(224/264)，兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=29.89，P<0.05)；兩組復(fù)發(fā)率分別為57.9%(11/19)和25.4%(57/224),兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=22.13，P<0.05)。兩組患者隨訪期內(nèi)中位生存期分別為8、34個月。結(jié)論 Ph染色體(+) ALL患者比Ph染色體(-)ALL患者預(yù)后更差，生存期短，臨床上要注意根據(jù)Ph染色體陽性與否采取相應(yīng)的治療策略。

急性淋巴細胞白血病； 費城染色體； 生物學特征； 預(yù)后

費城(Ph)染色體t(9；22)陽性(+)是急性淋巴系統(tǒng)白血病(ALL)中較常見的染色體結(jié)構(gòu)異常，臨床上表現(xiàn)為白細胞計數(shù)高、肝脾腫大、常伴有中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病浸潤，預(yù)后差，生存期短等特征，是其高危因素之一[1]。本文用G顯帶的常規(guī)細胞遺傳學技術(shù)分析本院300例ALL患者，總結(jié)了36例Ph染色體(+)的患者臨床特點，比較與Ph染色體(-)患者的區(qū)別，探討Ph染色體對患者臨床預(yù)后的影響，尋找其他可能的染色體預(yù)后相關(guān)因素，指導(dǎo)臨床治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2005年1月至2013年12月在本院就診的ALL患者，其中男196例，女104例。收集其初診、復(fù)診和隨訪期間外周血細胞計數(shù)、骨髓分析資料、實驗室檢查及其臨床資料，并隨訪其生存期。ALL的診斷和治療均根據(jù)《血液病診斷及療效標準》第2、3版[2]。

1.2 細胞遺傳學檢查 采用直接法或培養(yǎng)法制備骨髓染色體標本，采用G顯帶技術(shù)進行染色體核型分析。每個患者標本分析20個中期核型，按《人類染色體國際命名體制(ISCN)》規(guī)范描述染色體核型。

1.3 血液細胞學分析 患者初診、復(fù)診及其隨訪期間均定期進行常規(guī)外周血細胞計數(shù)、外周血細胞形態(tài)學檢查和骨髓細胞形態(tài)學檢查。

1.4 骨髓細胞免疫分型檢測 間接免疫熒光或流式細胞儀檢測法分析骨髓細胞免疫表型，T淋巴系列抗原：CD2、CD3、CD4、CD7和CD8；B淋巴系列抗原：CD10、CD19、CD20、CD22和Cyu等；髓系標記抗原：CD13、CD15、CD33，免疫學角度分析白血病抗原表達，確定其型別。

2 結(jié) 果

2.1 ALL患者Ph染色體(+)的診斷和發(fā)生率 300例ALL初診患者中，Ph染色體(+)患者36例，發(fā)生率為12.0%(36/300)。所有t(9；22)易位均經(jīng)骨髓染色體核型分析和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測bcr/abl融臺基因陽性證實。

2.2 兩組患者初診的臨床特點 Ph染色體(+)ALL中位起病時間為35 d(7～90 d)，乏力、發(fā)熱、骨痛為常見癥狀。Ph染色體(+)組中位白細胞計數(shù)為101.6×109/L明顯高于Ph染色體(-)組患者的56.7×109/L，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Ph染色體(+)組患者的中位血紅蛋白、血小板計數(shù)、外周血和骨髓幼稚淋巴細胞比例與Ph染色體(-)組患者比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。36例Ph染色體(+)患者免疫分型資料顯示：前B-ALL 9例、My+-ALL 5例Common-ALL 22例。36例Ph染色體(+)組有1例患者伴有淋巴瘤轉(zhuǎn)移，Ph染色體(-)組患者未見。

2．3 細胞遺傳學特征分析 36例Ph染色體(+)患者，其中單純t(9；22)患者26例，占72,2%。t(9；22) 伴有附加異常的核型有8例患者，其中1例患者伴單純數(shù)目異常，Ph變異易位2例，2例患者+Ph，1例為+21，另外7例伴有結(jié)構(gòu)異常和數(shù)目異常，累及的染色體幾乎除Y染色體外所有的染色體，染色體數(shù)目異常包括-Ph、-7等；染色體結(jié)構(gòu)異常有del(9)(p11-12)、del(20)(q11-12)、add/t(16)，其中序號為2、6和7的患者變異核型尚未見報道，見表1和圖1。

表1 8例Ph染色體陽性患者伴附加異常的核型

圖1 Ph染色體陽性患者(序號6)的染色體核型圖

2.4 兩組患者的預(yù)后及生存期分析 Ph(+)組ALL患者和Ph(-)組ALL患者的第1次緩解率分別為52.8%(19/36)和84.8%(224/264)，兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=29.89，P<0.05)；兩組復(fù)發(fā)率分別為57.9%(11/19)和25.4%(57/224),兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=22.13，P<0.05)。兩組患者隨訪期內(nèi)中位生存期分別為8、34個月。

2.5 Ph染色體核型變異對ALL患者的影響 將單純具有Ph染色體或Ph合并其他染色體異常的ALL患者分為2組：單純Ph組(8例)、Ph伴其他染色體異常組(26例)。Ph伴其他染色體異常組血小板計數(shù)為(29.9±5.8)×109/L明顯低于單純Ph組的(54.6±7.3)×109/L，兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=20.14，P<0.05)。但兩組的其他臨床指標幼稚細胞比例、白細胞計數(shù)、血紅蛋白、緩解率和生存期比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3 討 論

目前，70%～90%成年人ALL可獲得完全緩解，25%～50%的患者可達到長期無病生存。既往研究認為有髓系抗原表達的ALL預(yù)后差，但強化誘導(dǎo)緩解治療已能改善預(yù)后，不再是影響預(yù)后的重要因素[3-4]。7號染色體缺失是成年人ALL預(yù)后不良因素,而t(10;14)和14q11-13異常的ALL患者預(yù)后好，而Ph染色體是ALL的高危因素和重要的預(yù)后因素。腫瘤和白血病研究組B(CALGB)8811研究及9111研究對353例ALL患者進行了不良預(yù)后因素與生存關(guān)系的研究，分析了4個不利因素：(1)年齡大于60歲；(2)缺乏縱膈腫物；(3)白細胞計數(shù)大于30 000/μL；(4)不良實驗室特征(如形態(tài)學屬于L3型、免疫表型屬于B或B-髓系雙表達型、BCR/ABL融合基因陽性或Ph染色體陽性)等，結(jié)果顯示：22例不具有上述任何不良特征的患者，其3年生存率為91%；13例具有上述全部4項不良特征者，無1例存活超過17個月。Ph染色體(+)患者預(yù)后差，緩解期短，平均CR期小于1年。因此，Ph染色體(+)患者CR后行異基因移植效果最好[5-6]。

本研究結(jié)果顯示，Ph染色體(+)發(fā)生率為12.0%，低于其他研究團隊的數(shù)據(jù)[7]。白細胞計數(shù)、第1次緩解率和生存期與Ph染色體(-)患者組有明顯差異，顯示Ph染色體是影響預(yù)后的重要因素。在某些血液系統(tǒng)疾病中，Ph染色體(+)伴其他染色體異常、核型變異、白細胞計數(shù)、抗原表達的差異及治療敏感性等因素明顯影響到患者的生存狀況，如在慢性粒細胞白血病中Ph染色體(+)伴其他染色體異常被認為是預(yù)后不良的因素。在本研究中，Ph伴其他染色體異常組血小板計數(shù)明顯低于單純Ph組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。但兩組的其他臨床指標幼稚細胞比例、白細胞計數(shù)、血紅蛋白、緩解率和生存期比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。Ph染色體(+)伴其他染色體異常并不影響患者的生存期，附加染色體異常出現(xiàn)的類型也與以往報道相似，如常見-7、Ph+、9p-、i(7q)等，但有的異常染色體核型(序號2、6、7患者)尚未見報道。

對于預(yù)后不良的Ph染色體(+)ALL患者，經(jīng)聯(lián)合化療獲得第1次完全緩解后，若有可能，應(yīng)考慮進行異基因造血于細胞移植[8-9]。據(jù)報道，異基因造血干細胞移植可給這些患者帶來較長的無病生存期。然而，即使采用移植治療，BCR/ABL(+)ALL患者復(fù)發(fā)率仍高達40%～80%。最近，在這些異基因干細胞移植的患者中，微小殘存病變狀態(tài)的研究對BCR/ABL(+)患者復(fù)發(fā)危險性提供了重要信息，并可幫助確定有復(fù)發(fā)可能的患者。如果染色體和分子學的發(fā)現(xiàn)早于血液學復(fù)發(fā)，這些患者將可作為采取其他治療措施的候選者，包括應(yīng)用干擾素或抗體介導(dǎo)的免疫治療，以預(yù)防真正的臨床復(fù)發(fā)。

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Biological features and clinical prognosis in patients with acute lymphoblastic leukemia and philadelphia chromosome-positive

LIXin-xing1,QIANGXing2△,ZHANGXiao-nan3,LUOXiao-mei1,CAIJun1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ChongqingCorpsHospitalofArmedPoliceForces,Chongqing400061,China;2.DepartmentofHematology,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,China;3.DepartmentofClinicalLaboratory,LuzhouMunicipalMaternalandChildHealthCareHospital,Luzhou,Sichuan646000,China)

Objective To analyze the incidence of Philadelphia chromosome(Ph)-positive in the patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL),and to discuss the relationship between the biological features and clinical prognosis.Methods The G banding conventional cytogenetic technology was used to test 300 ALL patients,including 36 patients with the Ph chromosome (+),264 patients with Ph chromosome (-).The differences in the biology characteristic,remission rate and survival period between the Ph (+) group and the Ph (-) group were analyzed.Results Among 300 cases of newly diagnosed ALL,36 cases were found Ph chromosome (+) with the Ph chromosome positive rate of 12.0%.The median of hemoglobin,platelet count and percentage of immature lymphocyte in peripheral blood and bone marrow had no statistically significant differences between the Ph (+) group and Ph (-) group(P>0.05);but white blood cell(WBC)count was obviously higher than that of Ph (-) group,the difference was statistically significant (P< 0.05).The immune classification data in 36 cases of Ph (+) showed that pro-B-ALL was in 9 cases,My+-ALL was in 5 cases and common-ALL was in 22 cases.The prognostic analysis showed that first time remission rate in the Ph (+) and Ph (-)groups were 52.8% (19/36) and 84.8% (224/264) respectively,the difference between the two groups was statistically significant(χ2= 29.89,P<0.05);the recurrence rates in the two groups were 57.9% (11/19) and 25.4% (57/224) respectively,the difference between the two groups was statistically significant(χ2=22.13,P<0.05).The median lifetime of the Ph (+) and Ph (-) groups were 8 months and 34 months respectively.Conclusion The ALL patients with Ph (+) have poorer prognosis and shorter survival period than those with Ph (-),therefore clinic should adopt the corresponding treatment strategies according to whether Ph positive or not.

acute lymphoblastic leukemia; Philadelphia chromosome; bological features； prognosis

李新星，女，本科，主管檢驗師，主要從事檢驗工作。△

，E-mail：164411763@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.13.017

A

1672-9455(2015)13-1859-03

2015-01-15

2015-03-12)