無糖型黃疸茵陳顆粒的質量標準研究

王 帆，孫 巖，楊玉華

蘭州佛慈制藥股份有限公司，甘肅 蘭州 730046

黃疸茵陳顆粒由茵陳、黃芩、大黃、甘草4味中藥組成，具有保肝、退黃疸、增強免疫力的功效，臨床用于治療急、慢性黃疸型傳染性肝炎［1］。為了更好地控制該產品的質量，本試驗采用高效液相色譜(HPLC)法測定該制劑中黃芩苷的含量，為該制劑的質量控制提供試驗依據。

1 儀器與試藥

1.1 藥物與試劑 黃芩苷(中國藥品生物制品檢定所，批號：110715-200212)；黃疸茵陳顆粒(無糖型，蘭州佛慈制藥股份有限公司提供，批號：201301)。甲醇為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

1.2 試驗儀器 SHIMADZU Prominence高效液相色譜儀；Luna 5u C18100A型色譜柱(美國菲羅門公司)；SK250HP型超聲波儀 (上海科導超聲儀器有限公司)；SHZ-DШ型循環水式真空泵 (鞏義市英峪予華儀器廠)；XS205型十萬分之一電子天平；UPH-I-10T純化水系統(成都超純科技有限公司)。

1.3 色譜條件 色譜柱為Phenomenex DDS-C18(5μm，4.6 mm×150 mm)，甲醇 -0.7%磷酸溶液 (46∶54)，檢測波長為 276 nm，柱溫 30℃，流速1mL/min，理論板數按黃芩苷峰計算不低于3000。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備 取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

2.2 檢測波長的選擇 測波長：據文獻報道［2］，黃芩苷在檢測波長280 nm處有最大吸收；經過試驗驗證，認為黃芩苷在276 nm處有最大吸收，且以276 nm作為檢測波長，分離效果較好。

2.3 供試品溶液的制備 取本品裝量差異項下的內容物，混勻，取2g，精密稱定，加70%乙醇40mL，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，濾液置100mL量瓶中，用70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液合并濾入同一量瓶中，加70%乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取2mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4 線性關系考察 取黃芩苷對照品(0.1572 mg/mL)溶液，精密量取5.0mL置50mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。制成黃芩苷為15.72μg/mL的對照品溶液并精密量取2.0，4.0，6.0，8.0mL置10mL容量瓶中，各加甲醇稀釋至刻度，搖勻。再從黃芩苷為15.72μg/mL的對照品溶液中，精密量取 2.0，4.0，6.0，8.0mL置 10mL容量瓶中，各加甲醇稀釋至刻度，搖勻。制得一系列不同濃度的黃芩苷對照品溶液。按上述色譜條件分別進樣，進樣量為10μL，測定峰面積。求得回歸方程為：y=4649416x-6420，R=0.9998。結果表明黃芩苷對照品在0.0314～1.2576μg范圍內呈良好的線性關系。

2.5 精密度實驗 取黃芩苷對照品溶液(0.01866 mg/mL)，連續進樣5次，每次進樣量10μL。測定峰面積，結果RSD為0.37%，表明本法精密度較好。

2.6 重復性試驗 按“3.3”項制備方法及色譜條件，取同一批供試品(批次3次)，制備6份供試品溶液，分別測定含量，其平均含量為4.5805 mg/g，RSD為2.48%。結果表明該方法重現性良好。

2.7 穩定性實驗 按“3.3”項制備方法及色譜條件，對同一批供試品在不同間隔時間 0、0.5、1、2、3、4、5小時測定 7次，RSD=0.28%。結果表明供試品溶液在5小時內穩定。

2.8 加樣回收實驗 因本品黃芩苷含量較高，為節省標準品，樣品及溶劑減量加入進行加樣回收率的測定，具體操作如下：取本品裝量差異項下的內容物，混勻，取0.15 g左右，共6份(批次3次，含量：4.5805mg/g)，精密稱定，各精密加入濃度為0.1572mg/mL的黃芩苷對照品溶液4 mL，加70%乙醇20mL，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，濾液置50mL量瓶中，用70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液合并濾入同一量瓶中，加70%乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

按樣品含量測定項下方法依法測定，計算回收率，結果見表1。

回收率=[(測出黃芩苷量－樣品中黃芩苷量)／加入黃芩苷量]×100%

試驗結果表明，本方法具有較好的準確度。

表1 加樣回收率試驗測定結果

2.9 樣品中黃芩苷的含量測定 為了確定黃疸茵陳顆粒(無糖型)中黃芩苷的含量限度，按“3.3”項制備方法及色譜條件，對10批黃疸茵陳顆粒(無糖型)樣品進行了黃芩苷的含量測定，結果見表2。

表2 10批樣品的黃芩苷含量測定結果 mg/袋

3 討論

通過對本品的各項檢測，證明在保證《衛生部藥品標準-中藥成方制劑》黃疸茵陳顆粒的質量標準的同時，所增加的鑒別項目及含量測定方法也確認可行，從而更好地保證了“黃疸茵陳顆粒(無糖型)”的產品質量。在測試中我們經過試驗驗證后認為黃芩苷在276 nm處有最大吸收，且以276 nm作為檢測波長，分離效果較好。

［1］中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準［M］.北京：人民衛生出版社，1991:173.

［2］國家藥典委員會，中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：85.