磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的制備

劉 凱，何 媛

（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，江蘇連云港222047）

·制劑研究·

磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的制備

劉 凱，何 媛

（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，江蘇連云港222047）

目的制備磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物，并對其提高藥物溶解性和穩定性的作用進行考察。方法采用相溶解度法測定表觀穩定常數，中和法制備磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物，并對包合物的溶出度進行了考察。結果與格列本脲原料藥相比，磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物顯著提高了藥物的溶解度。結論制備格列本脲的環糊精包合物具有良好的實際應用價值。

格列本脲；磺丁基醚－β－環糊精；包合物；制備方法

格列本脲（GM）是磺酰脲類的第二代口服降血糖藥物，其口服吸收快，在臨床上主要用于治療非胰島素依賴型糖尿病，但因為水溶性差而導致在體內的生物利用度很低［1］，而包合物作為一種新的劑型的出現得到了極大的發展與應用。包合物是將藥物作為客體分子包合入環糊精類物質中，可以起到增加溶出度、改善穩定性、提高生物利用度等作用。制備環糊精包合物需要注意環糊精的空腔應該與藥物分子的大小吻合，又因為空腔是疏水性的，所以要包裹的物質應該具有疏水性，而所用溶劑則應該是強親水性的介質以防止溶劑本身形成包合物，此外，各種附加劑如pH調節劑、防腐劑、滲透壓調節劑的添加，可以起到穩定包合物的作用［2，3］。而在制備過程中一些外在因素如反應物濃度、反應溫度等均會影響包合物的形成［4，5］。磺丁基醚－β－環糊精（SBE－β－CD）是由美國Cydex公司研發的水溶性、陰離子型β－環糊精衍生物，是一種良好的藥用輔料［6～10］，可以用作格列本脲的包合物的制備。因此，本文研究了通過磺丁基醚－β－環糊精作為主體分子制備格列本脲的包合物，并進行了溶解性的進一步研究。

1 材料與儀器

1.1 材料 磺丁基醚－β－環糊精（實驗室自制，批號：20140712）；格列本脲對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100135－201405）；格列本脲原料藥（天津津康藥業有限公司，批號：20140211）；磷酸鹽（廣東汕頭市隴東化工廠）；其他試劑為色譜純，水為雙重蒸餾水。

1.2 儀器 SPE－KOL 1200紫外分光光度儀（德國Jena分析儀器有限公司）；pHS－3C型精密pH計（上海雷磁精密科學儀器有限公司）；HZQ－C空氣浴振蕩器（哈爾濱市東明醫療儀器廠）；KQ－100型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；FA－104電子分析天平（上海精密科學儀器有限公司）；AR1140型精密電子天平（沈陽杰龍儀器有限公司）。

2 實驗方法

2.1 檢測波長的選擇 取適量的格列本脲對照品及一定量的磺丁基醚－β－環糊精，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液分別配制成澄清溶液，以磷酸鹽緩沖液為空白，在200～400 nm范圍內使用紫外分光光度計進行掃描。

2.2 標準曲線方程的確定 精密稱取格列本脲對照品4.0 mg，置50 mL量瓶中，加pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，作為貯備液。分別精密量取貯備液0.5、2.0、4.0、8.0、16.0 mL，置于各個50 mL量瓶中，再加入pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度，搖勻，得到濃度為0.8、3.2、6.4、12.8、25.6 mg·L－1的標準系列溶液，在225 nm下測定吸光度（A），記錄結果并得出標準曲線方程。

2.3 表觀穩定常數的測定 采用相溶解度法，考察磺丁基醚－β－環糊精對格列本脲的增溶作用。以pH 7.4磷酸鹽緩沖液配制濃度分別為0、2、5、10、20、30、40 mmol·L－1的磺丁基醚－β－環糊精系列溶液。取上述溶液分別置于具塞試管中，加入過量的格列本脲固體粉末，密封后置于25℃空氣浴恒溫震蕩器中振搖（100 rpm），振搖3 d使得增溶作用達到平衡，將上清液用0.45μm的微孔濾膜過濾，取濾液用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液稀釋適當的倍數，在225 nm處測定格列本脲的吸光度A，代入所得的標準曲線方程，得到飽和溶液中含有的格列本脲濃度。以格列本脲的濃度（mmol·L－1）為縱坐標，磺丁基醚－β－環糊精的濃度（mmol·L－1）為橫坐標作出相溶解度圖。磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的表觀穩定常數（Kc）根據下面的公式計算：Kc＝斜率／［截距×（1－斜率）］［11］。

2.4 磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的制備 采用中和法［12］制備磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物。在室溫下將一定量格列本脲分別加入到不同濃度的磺丁基醚－β－環糊精的0.1 mol·L－1的NaOH溶液中（按格列本脲與磺丁基醚－β－環糊精質量比為1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30、1∶40投料），超聲使格列本脲完全溶解，再緩慢滴加0.5 mol·L－1HCl，調節溶液的pH至7.0，持續攪拌20 min，使用0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液即得到包合物溶液。包合物溶液再經過冷凍干燥，最終得到磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物粉末。

2.5 溶解度的測定 稱取過量的格列本脲、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物粉末各三份，分別加入到10 mL水溶液中形成過飽和溶液，密封后置于25℃空氣浴恒溫震蕩器中振搖（100 rpm），振搖3 d使得溶解達到平衡，將上清液用0.45μm的微孔濾膜過濾，取濾液用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液稀釋適當的倍數，代入之前計算的標準曲線方程中，對格列本脲、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物在水中的溶解度分別進行計算。

2.6 溶出曲線的繪制 分別稱取格列本脲、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包結物粉末適量（含2.5 mg格列本脲），測定溶出度。具體方法參照“格列本脲片溶出度測定方法［《中國藥典》2010年版（二部）］”［13］，以250 mL的0.02%三羥甲基氨基甲烷溶液作為溶出介質，每分鐘75轉。于2.5、5、15、30、45 min各時間點取樣5 mL，濾過，續濾液于225 nm處測定吸光值，計算出溶出量，繪制溶出曲線。

3 結果與討論

3.1 檢測波長的選擇 根據紫外分光光度計的全波長掃描結果發現格列本脲的最大吸收波長為225 nm，此時磺丁基醚－β－環糊精對測定無干擾，因此將檢測波長定為225 nm。

3.2 標準曲線方程的確定 根據格列本脲系列標準溶液的吸光度測定，得出標準曲線方程為C（mg·L－1）＝36.864A＋0.011 8（r＝0.999 6，n＝6），該結果表明格列本脲在0.8～25.6 mg·L－1濃度范圍內線性關系良好。

3.3 表觀穩定常數的測定 所得相溶解度曲線見圖1，相溶解度方程為Y＝0.004 3X＋0.001 1，R2＝0.997 9，表觀穩定常數Kc＝392.60 L·mol－1。由圖1可以看出隨著磺丁基醚－β－環糊精溶液濃度的增加，格列本脲的濃度呈現線性增加，表明磺丁基醚－β－環糊精對格列本脲具有良好的增溶效果，且相溶解度曲線為典型的AL型特征，推測主客分子的包合是按1∶1的比例進行的。

圖1 格列本脲在磺丁基醚－β－環糊精溶液中的相溶解度圖

3.4 不同質量比對包合率的影響 制備包合物的常用方法有飽和水溶液法、中和法、研磨法等，針對熱穩定性包合物可以采用噴霧干燥技術、熱不穩定的包合物可以采用冷凍干燥技術進行干燥。本文中采用較常見的中和法，并考察了磺丁基醚－β－環糊精與格列本脲的投料質量比對所得包合物中的格列本脲的包合率的影響，所得結果見表1。從表中可以看出在質量比大于20∶1后，格列本脲的包合率增加不明顯，考慮到增加磺丁基醚－β－環糊精的量會使得制劑的滲透壓增大，所以采用20∶1的質量比即得較好的磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物。

表1 不同質量比下制備的磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物包合率

3.5 溶解度的測定 格列本脲、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物在水中的溶解度及增溶倍數均列于表2。從結果可以看出，格列本脲自身在水中的溶解度只有4.44 mg·L－1，而磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的溶解度增加到77.83 mg·L－1，增溶達到17.53倍，明顯的改善了格列本脲的溶解性。

表2 樣品的水溶解度及增溶情況

3.6 溶出曲線的測定 溶出度的測定結果見圖2，由結果可以看出物理混合物與格列本脲原料藥的溶出速率無過大差別，而磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物的溶出速率則大大提高，在15 min累積溶出度就達到了90%以上。表明包合物的制備對于格列本脲的溶出度有明顯改善。

圖2 各樣品溶出曲線

4 結論

制備磺丁基醚－β－環糊精／格列本脲包合物有力地改善了格列本脲的水溶性差的問題，具有良好的發展前景，相信隨著對磺丁基醚－β－環糊精研究的不斷拓展與深入，該類包合物的制備會帶來較好的實際意義和臨床應用價值。

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Preparation of butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclam ide clathrate

LIU Kai，HE Yuan
（Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Incorporated Company，Lianyungang 222047，China）

ObjectiveTo prepare butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate，and explore their effect on improve the dissolution and stability of drug.M ethodsPhase solubilitymethod was implemented to determine the apparent stability constant，neutralization was used to prepare butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate；The dissolution of inclusion compoundswas investigated.ResultsCompared with the glibenclamide bulk drug，butyl ether－β－cyclodextrin and Glibenclamide clathrate had increased the drug solubility significantly.ConclusionThe preparation of butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate had good practical application value.

Glibenclamide；Butyl ether－β－cyclodextrin；Clathrate；Preparation method

R944．9

A

2095－5375（2015）07－0401－003

劉凱，男，博士研究生，研究方向：新藥制劑研發，E－mail：hrsliukai＠163.com