3種化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)測定血清胰島素及C-肽結(jié)果的差異比較

盧晉英，唐雪峰，張淑文

(天津市第三中心醫(yī)院，天津300170)

血清胰島素(INS)、C肽(C-P)水平可反映INS合成與分泌功能［1］，是評價胰腺β細(xì)胞功能和鑒別糖尿病類型的重要指標(biāo)。隨著自動化免疫分析技術(shù)的快速發(fā)展，化學(xué)發(fā)光免疫分析在INS和C-P檢測中占據(jù)主要地位;但是，同一份標(biāo)本在不同發(fā)光免疫系統(tǒng)的測定結(jié)果是否存在差異、是否具有可比性，是值得關(guān)注的問題。本研究選擇3種化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)，比較不同化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)測定血清INS和CP結(jié)果的差異。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2013年4～6月天津市第三中心醫(yī)院住院及門診進行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)患者20例，男12例、女8例，年齡38～65歲。

1.2 儀器和試劑 羅氏公司的 Elecsys 2010 (e2000)全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，及配套定標(biāo)液、試劑;西門子公司Immulite-2000(i2000)全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，及配套定標(biāo)液、試劑;西門子公司的ADVIA CentaurXP(CentaurXP)全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，及配套定標(biāo)液、試劑。質(zhì)控品:博樂公司干粉，免疫質(zhì)控品水平2和水平3。

1.3 方法

1.3.1 觀察指標(biāo)及方法 患者均按照OGTT要求，于空腹及服糖后0.5、1、2、3 h分別采集2.5～3.0 mL靜脈血，離心后及時分離血清。同時應(yīng)用e2000、i2000、CentaurXP等3種化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，檢測同一個體在OGTT中各時間點血清INS和C-P水平，并分別計算血清INS和C-P在服糖后各時間點水平與其空腹水平的比值，比較各系統(tǒng)檢測結(jié)果的相關(guān)性。按3種檢測系統(tǒng)的儀器和試劑說明書操作，當(dāng)日質(zhì)控合格。血清INS的單位為μU/ L，C-P的單位為ng/mL，各系統(tǒng)檢測在3 h內(nèi)完成。

1.3.2 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。正態(tài)分布數(shù)據(jù)相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析;非正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較采用 Wilcoxon檢驗，相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同系統(tǒng)血清INS和C-P檢測結(jié)果 e2000: INS:4.51～203.84 μU/L，C-P:0.35～11.86 ng/ mL;i2000:INS:1.92～137 μU/L，C-P:0.22～13.9 ng/mL;CentaurXP:INS:3.04～232.90 μU/L，C-P: 0.17～7.65 ng/mL。

2.2 不同系統(tǒng)檢測血清INS和C-P結(jié)果間的差異性及相關(guān)性分析 見表1、2。

表1 不同系統(tǒng)檢測血清INS或C-P結(jié)果間的差異性

表2 不同系統(tǒng)檢測血清INS或C-P結(jié)果間的相關(guān)性

2.3 不同系統(tǒng)檢測OGTT后不同時間點血清INS、C-P水平與其空腹水平比值間差異性結(jié)果 見表3。

表3 不同系統(tǒng)檢測OGTT后不同時間點血清INS、C-P水平與其空腹水平比值間的差異性

3 討論

化學(xué)發(fā)光法是近些年引入我國的非同位素檢測方法，其原理是用能產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的化合物代替放射性標(biāo)記物［2］，此化合物在堿性條件下遇過氧化物發(fā)生單光子發(fā)射，光子數(shù)量與結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上的發(fā)光化合物的量呈正比，因此反映抗原抗體復(fù)合物的量。化學(xué)發(fā)光法與放射免疫法相比，具有無污染、無需每次進行標(biāo)準(zhǔn)曲線制定等優(yōu)點，且其測定時間相對較短，重復(fù)性好，靈敏度、特異度均高，在糖尿病的臨床診斷、治療監(jiān)控方面有重要意義［3～5］。完成一個檢測項目所需要的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計劃等的組合，稱為檢測系統(tǒng)［6］。各個檢測系統(tǒng)對同一份標(biāo)本的同一項目檢測結(jié)果應(yīng)具有可比性。

本研究選擇3種常用的化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，平行檢測同一個體在OGTT中空腹及服糖后各時間點血清INS、C-P水平。結(jié)果表明，INS測定結(jié)果在e2010檢測系統(tǒng)和i2000檢測系統(tǒng)間，在i2000和CentaurXP檢測系統(tǒng)間存在顯著差異，而在e2010和CentaurXP檢測系統(tǒng)間無顯著差異。分析原因可能與兩個系統(tǒng)檢測參考范圍相似有關(guān)。另外，C-P測定結(jié)果在 i2000和 CentaurXP檢測系統(tǒng)間，在e2010和CentaurXP檢測系統(tǒng)間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，在e2010和i2000兩個檢測系統(tǒng)間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與張然星等［7］研究結(jié)果不完全一致。INS、C-P測定結(jié)果在兩檢測系統(tǒng)間存在顯著差異，可能是由于兩系統(tǒng)間的測定原理不同、所用儀器、標(biāo)定液、儀器及檢測范圍不同。國外的相關(guān)報道［8～10］也指出，這種由于缺乏標(biāo)準(zhǔn)化參考系統(tǒng)而導(dǎo)致的不同檢測系統(tǒng)測定結(jié)果間差異是很難克服的，即使應(yīng)用同一種檢測方法、同一種標(biāo)準(zhǔn)品，測定同一份血清的結(jié)果在不同地區(qū)、不同實驗室間的差異都很大。因此，在測定血清INS和C-P時最好以各自檢測系統(tǒng)的參考范圍作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，以免造成臨床上的誤判。與此相對，不同系統(tǒng)檢測同一項目的結(jié)果之間又具有密切的相關(guān)性。本研究3種系統(tǒng)在檢測臨床標(biāo)本時，其測定結(jié)果能夠較為一致地反映血清INS和C-P在OGTT中峰值出現(xiàn)的時間及變化趨勢。

本研究中，在OGTT服糖后同一時間點血清INS、C-P水平與其空腹水平的比值在任意兩系統(tǒng)間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。這表明服糖后同一時間血清INS、C-P水平與其空腹水平的比值，在各檢測系統(tǒng)間是一個較為恒定的指標(biāo)，具有一定的可比性，是一個有望成為不同檢測系統(tǒng)間可比性的指標(biāo)，從而盡量避免臨床應(yīng)用中因單獨依靠測定絕對值所帶來的判斷誤差，甚至是錯誤結(jié)論。

鑒于目前檢測血清INS、C-P的實際情況，我們認(rèn)為:①不同檢測系統(tǒng)間應(yīng)使用各自的參考范圍，不能混用;②服糖后各時間點血清INS、C-P水平與其空腹水平的比值，可作為不同檢測系統(tǒng)或臨床實驗室間可比的一個參數(shù)。由于本研究的納入病例數(shù)量有限，所得結(jié)論尚有待于大量的實驗進一步驗證。

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