全自動固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測法測定生活飲用水中苯酚

張玲玲 顧耀秦

（蘇州大學衛生與環境技術研究所 江蘇蘇州 215000）

酚類化合物中苯酚的毒性最大，苯酚是重要的有機化工原料，在化工原料、合成纖維、塑料、合成橡膠、醫藥、農藥、香料、涂料和煉油等工業中有著廣泛的用途。因此苯酚對水體有著很大的影響。是水污染的重要來源，其生活飲用水也深受其害。生活飲用水中苯酚含量較低，水樣在測定之前需要前期的預富集處理。常用的處理方法有液液萃取、固液萃取、濁點萃取。液液萃取等方法其操作繁瑣，消耗大量的有機試劑，對人體和環境造又成很大的危害和二次污染；濁點萃取作為一種新興的萃取方法具有安全、節約、操作簡單、毒性小的優點，目前被廣泛的應用于金屬離子、生物大分子、有機污染物等物質的提取中。但是表面活性劑的選擇濃度，添加劑、溶液的PH和離子強度、平衡時間溫度等對濁點萃取的萃取效率有著很大的影響。固相萃取法是目前替代液液萃取的最主要技術，如今固相萃取已經被廣泛認為是水樣中待測化合物提取凈化的首選方案。特別是全自動固相萃取儀，不僅操作簡便，減少手動操作所產生的誤差，減少有機溶劑的用量，而且時間大大縮短，可以做到無人看守，大大提高了實驗的工作效率。建立全自動固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測器測定飲用水中苯酚的分析方法，操作簡便、準確度、精密度高，適用于飲用水中苯酚的含量測定，結果令人滿意。

1 實驗

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：AllianceE2695-2475熒光檢測器(美國Waters公司)。

全自動固相萃取儀：LabTechSepLine-S4（北京萊伯泰科公司）

氮吹儀：AUTOSCIENCEMTN-2800W

苯酚標準溶液：1.0g/mL 色標5mL（天津光復精細化工研究所）

四氫呋喃:色譜純4L 批號123829（美國賽默飛世爾科技）

甲醇：色譜純4L 批號124635（美國賽默飛世爾科技）

乙酸：分析純 500mL批號20140305（國藥集團化學試劑）

乙酸銨：分析純 500g 批號20141114（國藥集團化學試劑）

1.2 標準曲線的配制

將1.0g/mL的苯酚標準溶液用水分步稀釋成1000μg/mL、1.0μg/mL最后稀釋為100μg/L的苯酚標準使用液100mL。

準確移取苯酚標準使用液：10μL、20μL、40μL、120μL、200μL、280μL、400μL于1.5mL液相色譜專用樣品瓶中定容到1mL。標準曲線系列溶度：1.0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L、12.0μg/L、20.0μg/L、28.0μg/L、40.0μg/L。

在后續發展中，相關養殖人員以及疾病防控單位應進一步將非洲豬瘟重視起來，針對具體的防控辦法及疫苗等進行研究，盡量將這一疾病對我國豬養殖業的影響降低到最小，避免因為這一疾病導致養殖人員遭受經濟損失，最終達到促進我國養殖業不斷發展的目的。

1.3 樣品處理

水樣-飲用水均為實驗室自來水。

1.3.1 用固相萃取專用樣品瓶分別取2份50mL水樣。

1.3.2 將樣品瓶放置全自動固相萃取儀的樣品板盤上，并放置收集瓶于全自動固相萃取儀的收集盤上，收集洗脫液，注意樣品瓶、收集瓶的位置編號。

1.3.3 加載苯酚萃取方法（如圖1）并運行儀器參數

Condition潤洗——10mL純化水，流速10.0mL/min

SampleLoading上樣——50mL水樣，流速10.0mL/min

Flowpathrinsing淋洗——10mL純化水，流速10.0mL/min

Elution洗脫——5.0mL四氫呋喃，流速5.0mL/min

圖1 全自動固相萃取苯酚萃取方法

1.3.4 等整個方法運行結束后將收集瓶取下，將洗脫液氮吹濃縮至近干，然后用水重新定容至1mL，待測。

1.4 色譜條件

檢測波長：激發波長:230nm 發射波長:320nm

色譜柱：WatersXBridger-C18（3.5um 4.6*150mm）

柱溫箱溫度：25℃

流動相：甲醇+0.01mol/L乙酸-乙酸銨緩沖溶液（PH=4.0）=55+45

流速：1.0mL/min

進樣量：20ul

2 結果與討論

2.1 苯酚標準品色譜圖（如圖2）

圖2 苯酚4.0ug/L 的標準品

2.2 標準曲線及方法檢出限

根據信噪比S/N=3計算檢出限，苯酚的檢出限為：1.0ug/L。

圖3 苯酚標準曲線圖（y=3.624e+001+1.658e+002 R2=0.9995）

2.3 回收率與精密度

取5份49.7mL水樣分別加入100μg/L苯酚標準使用液300μL，即樣品加標為6.0μg/L，取5份48.6mL水樣分別加入100μg/mL苯酚標準使用液1400μL，即樣品加標為28μg/L。按照苯酚萃取方法（如圖1）進行萃取，按照1.4色譜條件進行檢測。

表1 回收率與精密度實驗

3 結語

本實驗表明全自動固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測器測定飲用水中苯酚的分析方法操作簡便、準確度精密度高，減少手動萃取帶來的誤差，可以做到無人萃取，節省時間，提高了實驗效率，便于大批量樣品的測定。

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