黃惠燕,羅文匯,董玉娟,汪夢(mèng)霞,許燦新(1.廣東省人民醫(yī)院/廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥學(xué)部,廣州 510080;2.廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院,廣州 510095;.廣州中醫(yī)藥大學(xué),廣州 510405)
布渣葉為椴樹科植物破布葉Microcos paniculataL.的干燥葉,具有消食化滯、清熱利濕之功效,臨床上多用于飲食積滯、感冒發(fā)熱、濕熱黃疸等癥[1]。布渣葉主產(chǎn)于我國嶺南地區(qū),屬于廣東道地藥材,常用于廣東涼茶中。
紫外譜線組(Ultraviolet absorption spectra lines group,UASLG)法又可稱為“內(nèi)像法”,其著眼于中藥所含化學(xué)成分對(duì)光吸收的宏觀整體效應(yīng),將傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論的整體觀與現(xiàn)代紫外光譜技術(shù)相結(jié)合,是一種從物質(zhì)分子水平上控制中藥內(nèi)在質(zhì)量的方法[2]。
目前,布渣葉的定性鑒別主要采用薄層色譜法、紫外光譜(UV)法及高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜等方法[3-4],未見應(yīng)用紫外譜線組法對(duì)布渣葉藥材進(jìn)行相關(guān)研究的報(bào)道。本研究采用紫外譜線組法,測(cè)試了布渣葉在4種溶劑中的紫外譜線組圖譜,根據(jù)圖譜峰的數(shù)目、峰位值及峰形差異對(duì)其進(jìn)行鑒別。
UV-2550型UV計(jì)(日本島津公司);XS205DU電子分析天平(瑞士Mettler Toledo公司)。
無水乙醇、三氯甲烷、石油醚(60~90 ℃)均購于廣州市化學(xué)試劑廠;水為自制蒸餾水。
本研究所用布渣葉藥材均為市售,經(jīng)廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院劉法錦研究員鑒定為鍛樹科植物破布葉M.paniculataL.的干燥葉,詳見表1。

表1 布渣葉藥材來源Tab 1 Source ofM.paniculata herbals
稱取樣品粗粉各1 g,分別置于100 ml具塞錐形瓶中,分別加入蒸餾水、無水乙醇、三氯甲烷和石油醚(60~90 ℃)各20 ml,室溫浸泡2 h,振搖,濾過,即得。將樣品溶液置于UV計(jì)中檢測(cè),當(dāng)吸收度值上限超過5.0時(shí),需稀釋后重新檢測(cè)。
波長掃描范圍:200~800 nm;狹縫寬度:1 nm;掃描間隔:1 nm;掃描速度:中速。利用切線法測(cè)算出譜圖上每條譜線上的所有最大吸收峰位值,作為該藥材紫外光譜譜線組的光譜特征數(shù)據(jù)。每份樣品平行取樣2次進(jìn)行測(cè)定。
當(dāng)樣品的質(zhì)量濃度為0.05 g/ml時(shí),因質(zhì)量濃度較大、吸收度過高而超出上限得不到完整的圖譜,故取“2.1”項(xiàng)下的供試品溶液進(jìn)行稀釋。
以相應(yīng)溶劑為空白對(duì)照,掃描并繪出供試品溶液的紫外吸收光譜,詳見圖1。隨著質(zhì)量濃度的稀釋,以無水乙醇為溶劑的供試品溶液圖譜短波端的第1個(gè)峰的峰位值逐漸變小,其余峰的峰位值不變;其余3種溶劑的供試品溶液峰位值基本不變,比較穩(wěn)定。不同稀釋度對(duì)4種供試品溶液吸收峰的影響見表2。根據(jù)吸收度值大小,確定各供試品溶液的適宜的質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè),詳見表3。

圖1 不同質(zhì)量濃度的供試品溶液的紫外光譜譜線組圖譜A.水;B.無水乙醇;C.三氯甲烷;D.石油醚Fig 1 UV spectrum groups’spectrum of test solutions with different quality concentrationA.water;B.absolute alcohol;C.chloroform;D.petroleum
浸泡時(shí)間會(huì)影響浸出物的質(zhì)量濃度。經(jīng)檢測(cè),4種溶劑浸泡1~6 h對(duì)吸收峰位值無明顯影響,但對(duì)吸收度有一定影響。考慮到UV計(jì)的最佳測(cè)定吸光度為0.2~0.8,故本研究選擇浸泡時(shí)間為2 h。
不同批次樣品紫外吸收光譜圖比較結(jié)果顯示,其吸收峰數(shù)目和最大吸收峰峰位值均具有良好的重現(xiàn)性,表明紫外譜線組法可用于布渣葉的鑒別,詳見圖2。
紫外譜線組法是在單一紫外譜線法鑒別中藥的基礎(chǔ)上,著眼于中藥內(nèi)所含化學(xué)成分的總體宏觀效應(yīng),遵照“物質(zhì)相似相溶于相似”及混合物各組分的紫外吸收光譜具有疊加性的原理,改單一溶劑為多種溶劑,改單一紫外譜線為多條紫外圖譜線組,以其總的吸收峰數(shù)及峰位置對(duì)中藥進(jìn)行鑒別[15]。

表2 不同稀釋度對(duì)4種供試品溶液吸收峰的影響Tab 2 Effect of different dilutions on 4 kinds of test solutions’absorption

表3 各供試品溶液的適宜檢測(cè)濃度Tab 3 Suitable detectable concentration of test solutions

圖2 不同批號(hào)布渣葉4種溶劑浸泡液的紫外光譜譜線組圖譜A.水;B.無水乙醇;C.三氯甲烷;D.石油醚Fig 2 UV spectrum groups’spectrum ofM.paniculata solutions with different batches soaked by 4 kinds of solventA.water;B.absolute alcohol;C.chloroform;D.petroleum
本研究進(jìn)行了布渣葉的紫外譜線組法鑒別研究,結(jié)果顯示,布渣葉的4種溶劑浸泡液的紫外光譜譜線均有明顯的特征;且不同來源的布渣葉各溶劑浸泡液的紫外吸收譜圖中峰形、吸收峰數(shù)目及峰位值基本相同。
綜上所述,該法簡(jiǎn)便、可靠,可用于布渣葉藥材的鑒別和可為其質(zhì)量控制提供參考,并在一定程度上豐富了中藥布渣葉的鑒別方法。
[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典:一部[S].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:88-89.
[2]袁久榮.中藥鑒別紫外譜線組法及應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1999:80.
[3]曾聰彥,林銼.布渣葉的薄層色譜鑒別研究[J].中國民族民間醫(yī)藥,2009,18(22):14.
[4]孫冬梅,譚志燦,畢曉黎,等.布渣葉的薄層色譜鑒別及紅外光譜分析[J].中國藥業(yè),2012,21(12):15.
[5]李智勇.太白洋參的紫外譜線組法鑒別研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(6):1 311.