叉枝斑鳩菊低極性GC-MS分析及抗氧化活性測試

楊 丹，劉賢賢，張 業，王 凱，徐莉莉，程忠泉*

(1.桂林師范高等專科學校化學與藥學系，廣西桂林 541001；2.云南大學化學科學與工程學院，云南昆明 650091)

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叉枝斑鳩菊低極性GC-MS分析及抗氧化活性測試

楊 丹1，2，劉賢賢1，張 業1，王 凱1，徐莉莉1，程忠泉1*

(1.桂林師范高等專科學校化學與藥學系，廣西桂林 541001；2.云南大學化學科學與工程學院，云南昆明 650091)

[目的]研究叉枝斑鳩菊中低極性成分及不同萃取部分的抗氧化活性。[方法]經溶劑提取后，以面積歸一化法計算各組分含量。叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，并測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進行對比。[結果]鑒定了29個化合物的，其含量占總檢出峰的88.30%，并證實正丁醇萃取部分具有一定的抗氧化活性。[結論]通過對叉枝斑鳩菊低極性部分進行GC-MS分析及抗氧化活性測試，該植物有進一步研究的價值。

叉枝斑鳩菊；低極性成分；GC-MS；抗氧化活性

叉枝斑鳩菊(Vernoniadivergens(DC.)Edgew.)為菊科(Compositae)斑鳩菊屬(Vernonia)植物，該屬植物超過1 000種，多數為草本、木本植物或樹木，廣泛分布于熱帶地區[1]。斑鳩菊屬化學成分類型豐富，如黃酮、萜類、生物堿等。這些化合物往往具有比較廣泛的生物活性，如抗腫瘤、抗感染，治療瘧疾等[2-5]。為進一步研究叉枝斑鳩菊的藥理活性，筆者在此對采于廣西柳州的該植物的低極性部分進行了氣質聯用分析及不同萃取物部分的抗氧化活性試驗。

1 材料與方法

1.1 植物來源叉枝斑鳩菊于2012年9月采自廣西柳州，經黃德青博土鑒定為菊科(Compositae)斑鳩菊屬(Vernonia)植物叉枝斑鳩菊(Vernoniadivergens(DC.) Edgew.)。植物樣本存放于桂林師范高等專科學校化學系與藥學系博士科研室，新鮮樣品經自然晾干后備用。

1.2 主要儀器氣相色譜-質譜-計算機聯用儀(島津QP2010，日本島津公司)，北京普析TU-1901雙波長紫外可見分光光度計。

1.3 試劑DPPH(1，1-二苯基-2-三硝基苯肼)、維生素C、1，10-鄰菲啰啉、鄰苯三酚、Na2HPO4、NaH2PO4、硫酸亞鐵銨(FeSO4(NH4)2SO4)、H2O2、鐵氰化鈉、三氯乙酸、FeCl3、三羥甲基氨基甲烷(Tris)、鹽酸、乙醇等，以上試劑均為分析純。

1.4 GC-MS 分析

1.4.1色譜條件。石英毛細管柱Rtx-1MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm。升溫程序從40 ℃開始，保持1 min，以10 ℃/min升至250 ℃，保持35 min，進樣量1 μl，分流比1∶40，載氣為He，柱流量1.0 ml/min，進樣口溫度250 ℃。

1.4.2質譜條件。EI源，電離電壓70 eV，離子源溫度200 ℃，掃描范圍20～500 amu，質譜庫NIST27和NIST147。

1.4.3樣品定性、定量分析方法。對得到的總離子流圖中各峰進行質譜掃描，得到相應各峰質譜圖，與Nist 27、Nist 147數據庫標準物質質譜圖進行對比分析，確認叉枝斑鳩菊揮發油中各組分化學結構，用峰面積歸一化法計算出各組分在揮發油中的相對百分含量。

1.5 樣品前處理方法取叉枝斑鳩菊粉碎后樣品20 g，置于250 ml索氏提取器中，丙酮提取3 h，提取液濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，乙醚萃取2次，每次30 ml，乙醚層用無水碳酸鈉干燥，濃縮得浸膏0.5 g。浸膏用1 ml正己烷溶解，溶液經0.45 μm微孔濾膜過濾作為樣品供試液。

1.6 抗氧化活性分析粉碎后的叉枝斑鳩菊樣品20 g，置于250 ml索氏提取器中，丙酮提取3 h，真空濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，先后用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到正己烷提取物(EO)、乙酸乙酯提取物(EE)、正丁醇萃取物(BE)。以上3種萃取物以維生素C作對比進行抗氧化活性分析。

2 結果與分析

2.1 GC-MS分析從叉枝斑鳩菊低極性成分的相對百分含量和總離子流圖(表1和圖1)可看出，已鑒定的29個化合物占總含量的88.30%，其中脂肪類及其脂類占已鑒定化合物的74.91%；含量較多的包括棕櫚酸(13.46%)、棕櫚酸甲酯(13.49%)、(Z)-十八烯酸甲酯(7.87%)、13，16-十八碳二烯酸甲酯(4.49%)、棕櫚酸丁基酯(5.23%)、(正)十七烷(4.07%)。

表1 叉枝斑鳩菊低極性化學成分

2.2 抗氧化活性分析按“1.6”項方法，叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，并測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進行對比。結果顯示(圖2)，正丁醇萃取部分對DPPH及還原能力比乙酸乙酯萃取部分及正己烷萃取部分有較強的活性。

3 結論

筆者對叉枝斑鳩菊中低極性成分進行了GC-MS分析及不同萃取部分的抗氧化活性的研究，GC-MS檢出的各成分與Nist 27、Nist 147數據庫標準物質質譜圖進行對比分析，確認了29個化合物，其含量占總檢出峰的88.30%。叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進行對比，證實了正丁醇萃取部分具有一定的抗氧化活性。通過對叉枝斑鳩菊低極性部分進行GC-MS分析及抗氧化活性測試，發現該植物有進一步研究的價值。

[1] 中國植物志編委會.中國植物志第74卷[M].北京：科學出版社，1985：30.

[2] 孫力，巴玉蘭，于魯海，等.斑鳩菊屬植物藥理活性研究進展[J].新疆中醫藥，2009，27(6)：82-85.

[3] 劉清華，楊峻山，索茂榮.斑鳩菊屬的倍半萜內酯類及甾體皂苷類化學成分及藥理活性研究進展[J].中國中藥雜志，2007，32(1)：10-17.

[4] 李蓉濤，丁智慧，丁靖塏.滇緬斑鳩菊的化學成分[J].云南植物研究，1997，19(4)：443-445.

[5] 劉靜，丁廣治，庾石山.毒根斑鳩菊莖皮的化學成分研究[J].中國中藥雜志，2010，35(11)：1421-1424.

GC-MS Analysis of Low-polar Compounds and Antioxidant Activity Test ofVernoniadivergens

YANG Dan1,2, LIU Xian-xian1, ZHANG Ye1, CHENG Zhong-quan1*et al

(1. Department of Chemistry and Pharmaceutical Sciences, Guilin Normal College, Guilin, Guangxi 541001; 2. School of Chemical Science and Technology, Yunnan University, Kunming, Yunnan 650091)

[Objective] To analyze the low-polarity chemical constituents and antioxidant activity of V. divergens. [Method]V.divergenswere extracted with acetone and were isolated and identified by GC-MS method. The relative contents of the chemical constituents were determined by area normalization method. [Result] 29 compounds were detected and identified which accounted for 88.30 % of total low-polarity chemical constituents.V.divergenswere extracted and concentrated successively with n-hexane, EtOAc, n-butanol to yield essential oils (EO), EtOAc extracts (EE) and n-butanol extracts (BE). The antioxidant activities of different parts were evaluated and compared with Vc as standard antioxidant in vitro against DPPH to give the results of antioxidant activity ofV.divergens. [Conclusion]V.divergenshas further research value based on the GC-MS analysis and antioxidant activity research.

Vernoniadivergens; Low-polarity components; GC-MS; Antioxidant activity

廣西自然科學基金(2014GXNSFBA118050)；化學與分子工程國家重點實驗室(CMEMR2014-B)

楊丹(1984- )，女，四川眉山人，講師，博士，從事天然藥物化學成分及活性研究。*通訊作者，教授，博士，從事天然藥物化學成分及活性研究。

2014-11-28

S 567

A

0517-6611(2015)02-097-03