原材料天麻、丹參提取工藝研究

韓春艷，孔德東

(牡丹江友搏藥業(yè)股份有限公司，黑龍江牡丹江157013)

原材料天麻、丹參提取工藝研究

韓春艷，孔德東*

(牡丹江友搏藥業(yè)股份有限公司，黑龍江牡丹江157013)

以水為提取溶劑，以丹酚酸B的提取率以及出膏率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)比較水煎煮回流法，滲漉法和超聲提取法對(duì)丹參酚酸類物質(zhì)的提取率的影響，優(yōu)選確定采用超聲波輔助法提取丹參酚酸類物質(zhì)。以丹酚酸B的提取率以及出膏率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用高效液相色譜測(cè)定，通過(guò)單因素法和正交法實(shí)驗(yàn)考察固液比、溫度、時(shí)間、提取次數(shù)等因素的影響，優(yōu)選出丹參酚酸類物質(zhì)的最佳超聲提取工藝條件為超聲輔助提取20min，加入20倍水，超聲溫度控制在80℃。連續(xù)提取2次，該提取工藝中丹酚酸B的轉(zhuǎn)移率達(dá)到95%以上，出膏率為48.81%。通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較發(fā)現(xiàn)該法與常規(guī)熱回流法的單次出膏率分別為40%和70%左右，表明超聲提取法在保證高提取率的前提下明顯的降低了雜質(zhì)的溶出。

天麻；丹參；天麻素；丹酚酸B；浸膏率

天麻(GastrodiaelataBl.)的主要有效成份天麻素，丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)的主要有效成份丹參酚酸、丹參素、原兒茶醛等，皆為水溶性成分。天麻注射劑可擴(kuò)張動(dòng)脈血管，加快血流量，天麻湯能抑制血小板粘聚，對(duì)抗血栓形成[1]；丹參的水溶性提取物丹參注射液已廣泛應(yīng)用于臨床治療心腦血管疾病，由于天麻、丹參的水提浸膏率過(guò)高，需醇沉后采用水提。

本提取工藝研究中采用了超聲波低溫提取的方式，利用超聲波在液體介質(zhì)中傳播的特性和“空化效應(yīng)”[3]，低溫情況下就可以將有效成份從藥材中提取出來(lái)。

1 方法與結(jié)果

1.1 吸水率考查

將稱好的天麻和丹參藥材用水浸泡至潤(rùn)透心，過(guò)濾掉多余的水分，稱藥材重，測(cè)得吸水率為318%±0.53%(n=3)。

1.2 提取條件的優(yōu)選

1.2.1 以浸膏得率和天麻素提取率、丹酚酸B提取率為考查指標(biāo)，采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)超聲提取條件進(jìn)行優(yōu)選。

1.2.2 因素水平表

表1 因素水平

1.2.3 正交實(shí)驗(yàn)。按表2，用L9(34)安排實(shí)驗(yàn)，稱取9份樣品，每份含天麻粗顆粒40.0g+丹參粗顆粒100.0g，浸泡30min后提取，提取液離心，上清液定容至2500mL[2]。

1.2.3.1 浸膏率的測(cè)定：吸取20mL置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿，水浴蒸干溶媒，105℃烘3h，干燥器中放涼，迅速稱定。測(cè)浸膏率，結(jié)果見(jiàn)表2。

1.2.3.2 天麻素含量的測(cè)定：照中國(guó)藥典附錄ⅥD高效液相法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表2。

1.2.3.3 丹酚酸B含量的測(cè)定：照中國(guó)藥典附錄ⅥD高效液相法測(cè)定。流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水-甲酸(30∶10∶59∶1)，檢測(cè)波長(zhǎng)281nm。結(jié)果見(jiàn)表2。

由上面的分析中得出，對(duì)浸膏率的影響次序?yàn)槿苊搅?提取溫度>提取時(shí)間，但是這3個(gè)因素對(duì)浸膏率的影響沒(méi)有顯著性差異(F<9),最佳工藝為A2B2C1；對(duì)天麻素提取率的影響次序?yàn)槿苊搅?提取時(shí)間>提取溫度，這三個(gè)因素對(duì)浸膏率的影響也沒(méi)有顯著性差異(F<9)，最佳工藝為A2B2C3。對(duì)丹酚酸B提取率的影響次序?yàn)樘崛囟?提取時(shí)間>溶媒量，其中提取溫度的影響具有顯著性(F<19)，溶媒量和提取時(shí)間沒(méi)有什么影響(F<9)，最佳工藝為A2B2C3。由于溶媒量、提取溫度、提取時(shí)間對(duì)浸膏量、天麻素提取率影響不顯著，考慮到丹酚酸B、天麻素有效成分指標(biāo)的重要性，綜合考慮，優(yōu)選工藝為A2B2C3，即10/8倍量水，55℃提取2次，每次40min。

表2 正交實(shí)驗(yàn)及結(jié)果

注：1.粗顆粒的粒徑為3～10mm；2.天麻提取率以每克天麻生藥材中提取出的天麻素的量來(lái)計(jì)[4]；3.丹酚酸B提取率以每克天麻生藥材中提取出的丹酚酸B的量來(lái)計(jì)[5]。

表3 浸膏得率方差分析

表4 天麻素提取率方差分析

表5 丹酚酸B提取率方差分析

2 工藝驗(yàn)證、第三次提取及粒度考察

稱取天麻40.0g+丹參100.0g,粗顆粒(3～1mm)、切片(1～3mm厚)各3份，按優(yōu)選工藝提取，定容2500mL；藥渣再8倍量水提40min，定容1000mL。

2.1 浸膏率的測(cè)定

各吸取20mL置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿，水浴蒸干溶媒，105℃烘3h，干燥器中放涼，迅速稱定。測(cè)浸膏率，結(jié)果見(jiàn)表6。

2.2 天麻素的測(cè)定

照中國(guó)藥典附錄ⅥD高效液相法測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表6。

2.3 丹酚酸B含量的測(cè)定

照中國(guó)藥典附錄ⅥD高效液相法測(cè)定。流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水-甲酸(30∶10∶59∶1)，檢測(cè)波長(zhǎng)281nm。結(jié)果見(jiàn)表6。

3次平行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果顯示結(jié)果一致，表明優(yōu)選工藝可行；粒度考察結(jié)果表明,用粗顆粒提取較切片略好，但二種粒度差異不大，皆適于生產(chǎn)；第3次提取考察顯示第1、2次基本提取完全，不用提取第3次。

表6 工藝驗(yàn)證、粒度及第3次提取考察結(jié)果

[1]范士忠.天麻的藥用[J]. 東方藥膳,2006(10).

[2]肖波,胡開(kāi)治,劉杰,等. 蜜環(huán)菌菌種分離新法——天麻組織分離法[J]. 微生物學(xué)通報(bào),2006(3).

[3]葉勇.丹參有效成分分離的研究進(jìn)展[J/OL].藥品評(píng)價(jià),2005(2):118,146-148. doi:10.3969/j.issn.1672-2809.2005.02.018.

[4]伍振峰,何偉,馬建春.天麻中天麻素含量測(cè)定方法改進(jìn)的研究[J].中成藥，2009(6).

[5]蘇酩,苗建武,田景振.丹參有效成分的提取純化研究[J].齊魯藥事,2010(9).

2015-03-05

韓春艷(1985-)，女，助理工程師，主要從事藥品生產(chǎn)，E-mail:hcy@ybyy.com；*通訊作者：孔德東(1983-),主要從事藥品生產(chǎn)，E-mail:kdd@ybyy.com。

R284.2

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.03.014