不同提取方法對人參皂苷收率的影響

信小娟，陳旸，叢建華

(大興安嶺地區農業林業科學研究院，黑龍江加格達奇165000)

不同提取方法對人參皂苷收率的影響

信小娟，陳旸，叢建華

(大興安嶺地區農業林業科學研究院，黑龍江加格達奇165000)

通過對索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法3種不同方法提取人參皂苷，比較人參皂苷的收率。采用相同的提取試劑-甲醇，利用索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法提取人參皂苷；紫外可見-分光光度法測定人參皂苷含量，比較人參皂苷的收率。結果表明，3種提取方法，人參皂苷的收率分別為8.34%、9.36%、8.76%。超聲提取法更適合應用于工廠化生產。

人參；索氏提取法；超聲波提取法；微波提取法；人參皂苷

人參為五加科人參屬植物(PanaxginsengC. A. Meyer)的干燥根和根莖，具有安神益智、大補元氣、生津養血、補脾益肺的功效，人參中的主要活性成分為人參皂苷[1-2]。人參皂苷(ginsenosides)具有抗腫瘤、抗心律失常、延緩衰老及增強免疫力等作用[3-6]。目前，對于中草藥中活性成分的提取主要采用索氏提取法、微波提取法和超聲提取法進行。本研究對上述3種方法提取人參皂苷的收率進行比較，對工廠化提取人參皂苷具有一定的指導意義。

1 材料與方法

1.1 材料

5年生干燥人參根，由大興安嶺地區農業林業科學研究院提供；人參皂苷對照品Re(批號：110754-201324)購買于中國食品藥品檢定研究院。

索氏提取器(鄭州興華玻璃儀器設備直銷店)；P70D20TLD4-型微波爐(廣東格蘭仕集團)；KQ250B-型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；755-型分光光度計(上海圣科儀器設備有限公司)；AUY220-型電子分析天平(日本島津公司)；電子恒溫水浴鍋(長春通州科技儀器廠)。

1.2 方法

1.2.1 人參皂苷的提取

將人參進行粉碎處理后過40目篩，精密稱取9份，每份1g，中性濾紙包好作為供試品；分別進行如下操作：(1)取3份供試品，分別置于索氏提取器中，加入80mL三氯甲烷，加熱回流提取8h；揮干三氯甲烷后加入60mL甲醇，加熱回流提取6h；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復溶，待測。(2)取3份供試品，分別置于50mL三角瓶中，加入20mL甲醇進行超聲處理10min；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復溶，待測。(3)取3份供試品，分別置于50mL燒杯中，加入20mL甲醇，低火微波5次，每次2min；棄掉濾紙包，揮干甲醇，加入20mL蒸餾水溶解后轉移至分液漏斗中；分別加入等體積的乙酸乙酯和水飽和正丁醇溶液進行除雜處理；揮干水飽和正丁醇溶液后加入10mL甲醇復溶，待測。

1.2.2 人參皂苷標準曲線的繪制

精密稱取人參皂苷-Re標準品適量，甲醇溶解后制備成2mg/mL的標準品溶液；分別吸取人參皂苷-Re標準品溶液10、20、30、40、50μL置于具塞試管中，向試管中分別加入90、80、70、60、50μL的甲醇，另備一支具塞試管加入100μL甲醇作空白處理；分別向具塞試管中加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振蕩混勻；60℃恒溫水浴20min后冰水浴10min終止反應；調節紫外-可見分光光度計至544nm處進行比色測定；以人參皂苷-Re標準品的進樣量(X，mg/mL)為橫坐標，吸光度(Y，OD544)為縱坐標，繪制出人參皂苷-Re的標準曲線，得到線性回歸方程：Y=0.1798X+0.0108(R2=0.9983)。

1.2.3 人參皂苷含量的測定

根據2010年版《中國藥典》(一部)關于人參皂苷含量測定的相關闡述，本研究采用紫外-可見分光光度法對人參皂苷含量進行測定[7]。分別精密吸取各組供試品溶液0.1mL，置于具塞試管中，加入0.5mL的0.5%香草醛-乙醇溶液和5mL的74%硫酸，振蕩混勻；將試管置于60℃恒溫水浴鍋中加熱20min后置于冰水中冷卻10min；在波長544nm處進行比色測定。

2 結果與分析

采用索氏提取法、超聲波提取法、微波提取法，以相同提取試劑—甲醇提取人參皂苷，3種不同提取方法對人參皂苷收率的影響見表1所示。在相同除雜處理的條件下，3組人參皂苷收率分別為8.34%、8.76%、9.36%。結果表明同樣以甲醇作為提取試劑，相同的除雜處理，超聲提取法提取人參皂苷的收率更高。

表1 不同提取方法對人參皂苷得率的影響

3 討論

超聲提取法是利用超聲波在液體介質中傳播時產生的“空化效應”，不斷產生無數個內部壓力達到上千個大氣壓的空氣穴，而空氣穴不斷爆破產生微觀上的強大沖擊波，不斷的轟擊人參粉末，使其含有的人參皂苷更容易溢出，從而加大了人參皂苷的得率。微波提取法同樣具有提取時間短、操作簡便的優點，但是相對于超聲提取法而言，其人參皂苷得率略低，且操作過程中容易發生危險，并不適合大規模生產。超聲提取法與微波提取法的提取時間較短、能源消耗少，而索氏提取法不但耗時、耗能而且還產生大量的廢液，從工廠生產的角度考量，超聲提取法更適合應用于大規模的人參皂苷提取。

[1]羅潔琦, 沙先誼,方曉玲. 三七總苷離子敏感型鼻用原位凝膠的制備 [J]. 中草藥, 2011, 42(7): 1299-1304.

[2]石楸鳴. 人參皂苷的藥理作用研究進展 [J]. 中草藥, 2010, 21(31): 2967-2969.

[3]Hasegawa H, Sung J H, Matsumiya S, et al. Reversal of daunomycin and vinblastine resistance in multidrug-resistant P388 leukemia in vitro through enhanced cytotoxicity by triterpenoids [J]. Planta Med, 1995, 60(5): 409-413.

[4]呂文偉, 劉 潔, 田建明, 等. 20-(S)和20-(R)人參皂苷Rg2對心源性休克犬血流動力學和血氧含量的影響 [J]. 中草藥, 2003, 34(3): 254-256.

[5]賈繼明, 王宗權, 吳立軍, 等. 人參皂苷Rh1的藥理活性研究進展 [J]. 中國中藥雜志, 2008, 33(12): 1371-1377.

[6]陳旸, 王義, 孫亮, 等. 植物乳桿菌發酵轉化人參皂苷的研究 [J]. 中國中藥雜志, 2014, 39(7): 58-63.

[7]國家藥典委員會匯編. 中國藥典 [M]. 2010年版一部, 北京:化學工業出版社, 2010: 8.

Effects of Different Extraction Methods on the Yield of Ginsenosides

Xin Xiaojuan,Chen Yang,Cong Jianhua

(North Drug Development Research Laboratory, Agriculture & Forestry Science Research Institute of Daxing’an Mountain range, Daxing’an Mountain range, Heilongjiang Province,165000)

Objective Through three different extraction method on ginsenosides of soxhlet extraction, ultrasonic extraction, microwave extraction, compared ginsenosides yield. Method Selected the same extraction reagent-methanol, used soxhlet extraction method, ultrasonic extraction method, microwave extraction method extractcted ginsenosides, determination of ginsenosides by UV visible spectrophotometry, compared ginsenosides yield. Results Three kinds of extraction methods, ginsenosides yield was 8.34%, 9.36%, 8.76%. Conclusion Ultrasonic extraction method is more suitable for industrial production .

Ginseng; Soxhlet extraction method; Ultrasonic extraction method; Microwave extraction method; Ginsenosides

2014-09-18

R284.2

A

doi.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.01.013